五加生化缓释片的制备及体外释放度的研究

徐艳明+李铁男+张宁+李建民+王雪+王业秋+王发善

[摘要] 目的 筛选五加生化缓释片的最佳制备工艺，并进行体外释放度研究。 方法 采用正交试验法筛选处方；以羟丙甲基纤维素（HPMC）为骨架材料，制备五加生化缓释片，并对优化的试验结果进行体外释放效果考察。 结果 最优处方为HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg，采用最佳工艺制备的五加生化缓释片体外释放性能较好，HPMC的规格对药物的释放影响最大。 结论 本法制备的缓释片比普通片具有明显的缓释作用。该制备工艺简单易行，生产成本低，片剂外观及可压性良好。

[关键词] 五加生化；缓释片；释放度

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）11（b）-0013-03

五加生化缓释片源于产后圣方《生化汤》，经黑龙江省中医研究院省名中医王克勤、妇科专家王孝莹结合多年的临床经验，秉承中医药理论，化裁组方而成。其主要成分为刺五加浸膏、甘草、桃仁、当归、川芎、炮姜等药物，组成行气止痛、益气养血、活血化瘀功效，是治疗产后出血症的疗效独特的产品[1-3]。目前，五加生化的产品多以片剂和胶囊为主，均为普通制剂，生物半衰期短，血药浓度起伏大，服药次数多、剂量大，患者顺应性差。本实验以羟丙甲基纤维素（HPMC）作为主要骨架材料研制五加生化缓释制剂，减少了普通剂型给药所呈现血药浓度峰谷的现象，使血药浓度保持在比较平稳持久的有效范围内，提高了药物的安全性。

1 仪器与试药

DP12单冲压片机（上海天凡药机制造厂）；CJY-2A片剂脆碎、硬度两用测定仪（上海新诺仪器设备有限公司）；电子天平BP121S（赛多利斯公司）；ZX型高效液相色谱仪（美国戴安公司）；RC-6型智能溶出度测试仪（上海新诺仪器设备有限公司）；异嗪皮啶标准品（中国药品生物制品检定所，批号：110807-200374）；HPMC（金虎羟丙基纤维素公司）；微晶纤维素（药用，北京化工厂）；乳糖（药用，北京化工厂）；硬脂酸镁（药用，广州市天润药业有限公司）；淀粉（佳木斯市淀粉厂）；乙腈、甲醇（色谱纯，美国DIKMA公司）；超纯水（自制）；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 五加生化缓释片的制备

按处方量取甘草、川芎、当归、干姜、桃仁、刺五加浸膏，川芎、当归、干姜、桃仁挥发油β-环糊精饱和物，与HPMC、微晶纤维素（MCC）、淀粉按比例混合，混匀后加入一定比例乙醇制软材，过20目筛制粒，45℃干燥3 h，再加入3%的硬脂酸镁混匀后压片，即得。

2.2 标准曲线的制备

精密称取异嗪皮啶标准品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每毫升含异嗪皮啶215 μg的标准品溶液。精密吸标准品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成标准品溶液20 μl注入高效液相色谱仪，以峰面积（mAU×min）积分值为纵坐标，标准品浓度（mg/L）为横坐标绘制标准曲线，异嗪皮啶（λ=343 nm）Y=0.853X-1.0382（r=0.9995），线性范围5.10～30.60 mg/L[4-5]。

2.3 释放度试验

依据2010版中国药典（第二部）附录XD释放度测定方法以及XIXD缓释、控释制剂指导原则进行释放度试验。蒸馏水900 ml，转速100 r/min，温度（37±0.5）℃。依法操作，在2、4、6、8、10、12 h分别取样，并及时补充空白介质，使用0.45 μm微孔滤膜过滤处理后注入液相色谱仪，求算药物质量浓度，计算累计溶出释放。公式如下：Q（%）=（C×V×N/M）×100%，其中，V为溶出介质的体积，C为溶出液的质量浓度（μg/ml），N为测定时稀释的倍数，M为片剂标示量[6-7]。

2.4 正交试验

对影响释药速度的关键因素：不同种类的HPMC（A）、黏合剂浓度（B）、MCC的用量（C）及淀粉的用量（D）作4个因素，3水平的L9（34）正交试验。根据“2.1”项下进行五加生化缓释片的制备，测定各处方所制缓释片的体外释放度，依据《中国药典》（2010年版二部）附录XIXD缓释、控释制剂指导原则，取3个时间点评价缓释片的体外释放度。本试验以2、6、12 h的累积释放百分率作为评价指标，综合评分法对正交试验设计的结果进行分析，累积释放度Q2、Q6、Q12用参数P来表示。以综合评分P=|Q2-0.25|+|Q6-0.05|+|Q12-0.90|为指标，得分越低，说明与所定的标准越接近，因素的水平数越佳。结果见表1。

2.5 正交试验结果

A、B、C、D4因素在3个水平上的变化，影响因素主次为A>D>C>B，即HPMC的种类为最主要影响因素。因此，确定各因素最优水平组合为A3B3C1D2，即HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg（表2）。

2.6 最优处方的验证试验

按筛选出的最优处方制备五加生化缓释片3批，按照“2.3”项下方法测定缓释片的体外释放度，根据结果绘制三批样品的溶出曲线，结果如图1。结果表明，根据最优处方所制得的五加生化缓释片各时间点累积释放量与设定标准较为接近，重现性良好。

3 讨论

本研究结果表明，最优处方为HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg，该制备工艺简单易行，生产成本低，片剂外观及可压性良好。其中HPMC的规格是影响药物释放的最主要因素。HPMC为亲水凝胶骨架材料，吸水膨胀后可在片剂表面形成凝胶层，HPMC黏度越大，遇水形成凝胶层越厚，骨架溶蚀越慢，药物释放速度越慢[8-10]。MCC是填充剂，具有一定的阻滞作用，主要起到调整缓释片的释药速率的作用；淀粉起到稀释剂的作用。

释放度实验结果表明，五加生化缓释片2 h释放出标示量30%左右的药物，6 h释放出标示量60%左右的药物，12 h基本释放药物，各点累积释放量满足缓释制剂特征。

[参考文献]

[1] 何欣欣.五加生化胶囊的药理及临床应用[J].吉林医学，2014，35（1）：92-93.

[2] 张凤，董玉国.五加生化胶囊药理作用及临床应用[J].今日科苑，2009，13（8）：290-291.

[3] 张颖智，路娟，宋婷.五加生化胶囊对气虚血瘀模型大鼠血液流变学和细胞内皮因子的影响[J].中成药，2013，35（7）：1535-1538.

[4] 耿放，朱魁元，王发善，等.HPLC同时测定五加生化胶囊中3种有效成分的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012， 18（9）：109-111.

[5] 耿放，朱魁元，王发善，等.五加生化胶囊的高效液相色谱指纹图谱研究[J].分析科学学报，2012，28（3）：408-410.

[6] 中华人民共和国药典第二部[M].北京：人民卫生出版社，2010，附录.

[7] 葛裕华，程路峰.释放度测定研究进展[J].新疆医科大学学报，2008，31（8）：757-758.

[8] 王博，张来华，李苑新，等.亲水凝胶骨架缓释片释药机制评价方法和研究进展[J].中国医药工业杂志，2009，40（10）：782-785.

[9] 陈挺，陈子晟，包泳初，等.国产HPMC作为盐酸普萘洛尔缓释骨架片基质的研究[J].中国医药工业杂志，1998， 29（1）：10-16.

[10] 徐济恒，马凤余，周亚球.缓释片剂的研究概况[J].安徽化工，2011，37（1）：27-30.

（收稿日期：2014-07-28 本文编辑：郭静娟）

[摘要] 目的 筛选五加生化缓释片的最佳制备工艺，并进行体外释放度研究。 方法 采用正交试验法筛选处方；以羟丙甲基纤维素（HPMC）为骨架材料，制备五加生化缓释片，并对优化的试验结果进行体外释放效果考察。 结果 最优处方为HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg，采用最佳工艺制备的五加生化缓释片体外释放性能较好，HPMC的规格对药物的释放影响最大。 结论 本法制备的缓释片比普通片具有明显的缓释作用。该制备工艺简单易行，生产成本低，片剂外观及可压性良好。

[关键词] 五加生化；缓释片；释放度

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）11（b）-0013-03

五加生化缓释片源于产后圣方《生化汤》，经黑龙江省中医研究院省名中医王克勤、妇科专家王孝莹结合多年的临床经验，秉承中医药理论，化裁组方而成。其主要成分为刺五加浸膏、甘草、桃仁、当归、川芎、炮姜等药物，组成行气止痛、益气养血、活血化瘀功效，是治疗产后出血症的疗效独特的产品[1-3]。目前，五加生化的产品多以片剂和胶囊为主，均为普通制剂，生物半衰期短，血药浓度起伏大，服药次数多、剂量大，患者顺应性差。本实验以羟丙甲基纤维素（HPMC）作为主要骨架材料研制五加生化缓释制剂，减少了普通剂型给药所呈现血药浓度峰谷的现象，使血药浓度保持在比较平稳持久的有效范围内，提高了药物的安全性。

1 仪器与试药

DP12单冲压片机（上海天凡药机制造厂）；CJY-2A片剂脆碎、硬度两用测定仪（上海新诺仪器设备有限公司）；电子天平BP121S（赛多利斯公司）；ZX型高效液相色谱仪（美国戴安公司）；RC-6型智能溶出度测试仪（上海新诺仪器设备有限公司）；异嗪皮啶标准品（中国药品生物制品检定所，批号：110807-200374）；HPMC（金虎羟丙基纤维素公司）；微晶纤维素（药用，北京化工厂）；乳糖（药用，北京化工厂）；硬脂酸镁（药用，广州市天润药业有限公司）；淀粉（佳木斯市淀粉厂）；乙腈、甲醇（色谱纯，美国DIKMA公司）；超纯水（自制）；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 五加生化缓释片的制备

按处方量取甘草、川芎、当归、干姜、桃仁、刺五加浸膏，川芎、当归、干姜、桃仁挥发油β-环糊精饱和物，与HPMC、微晶纤维素（MCC）、淀粉按比例混合，混匀后加入一定比例乙醇制软材，过20目筛制粒，45℃干燥3 h，再加入3%的硬脂酸镁混匀后压片，即得。

2.2 标准曲线的制备

精密称取异嗪皮啶标准品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每毫升含异嗪皮啶215 μg的标准品溶液。精密吸标准品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成标准品溶液20 μl注入高效液相色谱仪，以峰面积（mAU×min）积分值为纵坐标，标准品浓度（mg/L）为横坐标绘制标准曲线，异嗪皮啶（λ=343 nm）Y=0.853X-1.0382（r=0.9995），线性范围5.10～30.60 mg/L[4-5]。

2.3 释放度试验

依据2010版中国药典（第二部）附录XD释放度测定方法以及XIXD缓释、控释制剂指导原则进行释放度试验。蒸馏水900 ml，转速100 r/min，温度（37±0.5）℃。依法操作，在2、4、6、8、10、12 h分别取样，并及时补充空白介质，使用0.45 μm微孔滤膜过滤处理后注入液相色谱仪，求算药物质量浓度，计算累计溶出释放。公式如下：Q（%）=（C×V×N/M）×100%，其中，V为溶出介质的体积，C为溶出液的质量浓度（μg/ml），N为测定时稀释的倍数，M为片剂标示量[6-7]。

2.4 正交试验

对影响释药速度的关键因素：不同种类的HPMC（A）、黏合剂浓度（B）、MCC的用量（C）及淀粉的用量（D）作4个因素，3水平的L9（34）正交试验。根据“2.1”项下进行五加生化缓释片的制备，测定各处方所制缓释片的体外释放度，依据《中国药典》（2010年版二部）附录XIXD缓释、控释制剂指导原则，取3个时间点评价缓释片的体外释放度。本试验以2、6、12 h的累积释放百分率作为评价指标，综合评分法对正交试验设计的结果进行分析，累积释放度Q2、Q6、Q12用参数P来表示。以综合评分P=|Q2-0.25|+|Q6-0.05|+|Q12-0.90|为指标，得分越低，说明与所定的标准越接近，因素的水平数越佳。结果见表1。

2.5 正交试验结果

A、B、C、D4因素在3个水平上的变化，影响因素主次为A>D>C>B，即HPMC的种类为最主要影响因素。因此，确定各因素最优水平组合为A3B3C1D2，即HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg（表2）。

2.6 最优处方的验证试验

按筛选出的最优处方制备五加生化缓释片3批，按照“2.3”项下方法测定缓释片的体外释放度，根据结果绘制三批样品的溶出曲线，结果如图1。结果表明，根据最优处方所制得的五加生化缓释片各时间点累积释放量与设定标准较为接近，重现性良好。

3 讨论

本研究结果表明，最优处方为HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg，该制备工艺简单易行，生产成本低，片剂外观及可压性良好。其中HPMC的规格是影响药物释放的最主要因素。HPMC为亲水凝胶骨架材料，吸水膨胀后可在片剂表面形成凝胶层，HPMC黏度越大，遇水形成凝胶层越厚，骨架溶蚀越慢，药物释放速度越慢[8-10]。MCC是填充剂，具有一定的阻滞作用，主要起到调整缓释片的释药速率的作用；淀粉起到稀释剂的作用。

释放度实验结果表明，五加生化缓释片2 h释放出标示量30%左右的药物，6 h释放出标示量60%左右的药物，12 h基本释放药物，各点累积释放量满足缓释制剂特征。

[参考文献]

[1] 何欣欣.五加生化胶囊的药理及临床应用[J].吉林医学，2014，35（1）：92-93.

[2] 张凤，董玉国.五加生化胶囊药理作用及临床应用[J].今日科苑，2009，13（8）：290-291.

[3] 张颖智，路娟，宋婷.五加生化胶囊对气虚血瘀模型大鼠血液流变学和细胞内皮因子的影响[J].中成药，2013，35（7）：1535-1538.

[4] 耿放，朱魁元，王发善，等.HPLC同时测定五加生化胶囊中3种有效成分的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012， 18（9）：109-111.

[5] 耿放，朱魁元，王发善，等.五加生化胶囊的高效液相色谱指纹图谱研究[J].分析科学学报，2012，28（3）：408-410.

[6] 中华人民共和国药典第二部[M].北京：人民卫生出版社，2010，附录.

[7] 葛裕华，程路峰.释放度测定研究进展[J].新疆医科大学学报，2008，31（8）：757-758.

[8] 王博，张来华，李苑新，等.亲水凝胶骨架缓释片释药机制评价方法和研究进展[J].中国医药工业杂志，2009，40（10）：782-785.

[9] 陈挺，陈子晟，包泳初，等.国产HPMC作为盐酸普萘洛尔缓释骨架片基质的研究[J].中国医药工业杂志，1998， 29（1）：10-16.

[10] 徐济恒，马凤余，周亚球.缓释片剂的研究概况[J].安徽化工，2011，37（1）：27-30.

（收稿日期：2014-07-28 本文编辑：郭静娟）

[摘要] 目的 筛选五加生化缓释片的最佳制备工艺，并进行体外释放度研究。 方法 采用正交试验法筛选处方；以羟丙甲基纤维素（HPMC）为骨架材料，制备五加生化缓释片，并对优化的试验结果进行体外释放效果考察。 结果 最优处方为HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg，采用最佳工艺制备的五加生化缓释片体外释放性能较好，HPMC的规格对药物的释放影响最大。 结论 本法制备的缓释片比普通片具有明显的缓释作用。该制备工艺简单易行，生产成本低，片剂外观及可压性良好。

[关键词] 五加生化；缓释片；释放度

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）11（b）-0013-03

五加生化缓释片源于产后圣方《生化汤》，经黑龙江省中医研究院省名中医王克勤、妇科专家王孝莹结合多年的临床经验，秉承中医药理论，化裁组方而成。其主要成分为刺五加浸膏、甘草、桃仁、当归、川芎、炮姜等药物，组成行气止痛、益气养血、活血化瘀功效，是治疗产后出血症的疗效独特的产品[1-3]。目前，五加生化的产品多以片剂和胶囊为主，均为普通制剂，生物半衰期短，血药浓度起伏大，服药次数多、剂量大，患者顺应性差。本实验以羟丙甲基纤维素（HPMC）作为主要骨架材料研制五加生化缓释制剂，减少了普通剂型给药所呈现血药浓度峰谷的现象，使血药浓度保持在比较平稳持久的有效范围内，提高了药物的安全性。

1 仪器与试药

DP12单冲压片机（上海天凡药机制造厂）；CJY-2A片剂脆碎、硬度两用测定仪（上海新诺仪器设备有限公司）；电子天平BP121S（赛多利斯公司）；ZX型高效液相色谱仪（美国戴安公司）；RC-6型智能溶出度测试仪（上海新诺仪器设备有限公司）；异嗪皮啶标准品（中国药品生物制品检定所，批号：110807-200374）；HPMC（金虎羟丙基纤维素公司）；微晶纤维素（药用，北京化工厂）；乳糖（药用，北京化工厂）；硬脂酸镁（药用，广州市天润药业有限公司）；淀粉（佳木斯市淀粉厂）；乙腈、甲醇（色谱纯，美国DIKMA公司）；超纯水（自制）；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 五加生化缓释片的制备

按处方量取甘草、川芎、当归、干姜、桃仁、刺五加浸膏，川芎、当归、干姜、桃仁挥发油β-环糊精饱和物，与HPMC、微晶纤维素（MCC）、淀粉按比例混合，混匀后加入一定比例乙醇制软材，过20目筛制粒，45℃干燥3 h，再加入3%的硬脂酸镁混匀后压片，即得。

2.2 标准曲线的制备

精密称取异嗪皮啶标准品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每毫升含异嗪皮啶215 μg的标准品溶液。精密吸标准品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成标准品溶液20 μl注入高效液相色谱仪，以峰面积（mAU×min）积分值为纵坐标，标准品浓度（mg/L）为横坐标绘制标准曲线，异嗪皮啶（λ=343 nm）Y=0.853X-1.0382（r=0.9995），线性范围5.10～30.60 mg/L[4-5]。

2.3 释放度试验

依据2010版中国药典（第二部）附录XD释放度测定方法以及XIXD缓释、控释制剂指导原则进行释放度试验。蒸馏水900 ml，转速100 r/min，温度（37±0.5）℃。依法操作，在2、4、6、8、10、12 h分别取样，并及时补充空白介质，使用0.45 μm微孔滤膜过滤处理后注入液相色谱仪，求算药物质量浓度，计算累计溶出释放。公式如下：Q（%）=（C×V×N/M）×100%，其中，V为溶出介质的体积，C为溶出液的质量浓度（μg/ml），N为测定时稀释的倍数，M为片剂标示量[6-7]。

2.4 正交试验

对影响释药速度的关键因素：不同种类的HPMC（A）、黏合剂浓度（B）、MCC的用量（C）及淀粉的用量（D）作4个因素，3水平的L9（34）正交试验。根据“2.1”项下进行五加生化缓释片的制备，测定各处方所制缓释片的体外释放度，依据《中国药典》（2010年版二部）附录XIXD缓释、控释制剂指导原则，取3个时间点评价缓释片的体外释放度。本试验以2、6、12 h的累积释放百分率作为评价指标，综合评分法对正交试验设计的结果进行分析，累积释放度Q2、Q6、Q12用参数P来表示。以综合评分P=|Q2-0.25|+|Q6-0.05|+|Q12-0.90|为指标，得分越低，说明与所定的标准越接近，因素的水平数越佳。结果见表1。

2.5 正交试验结果

A、B、C、D4因素在3个水平上的变化，影响因素主次为A>D>C>B，即HPMC的种类为最主要影响因素。因此，确定各因素最优水平组合为A3B3C1D2，即HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg（表2）。

2.6 最优处方的验证试验

按筛选出的最优处方制备五加生化缓释片3批，按照“2.3”项下方法测定缓释片的体外释放度，根据结果绘制三批样品的溶出曲线，结果如图1。结果表明，根据最优处方所制得的五加生化缓释片各时间点累积释放量与设定标准较为接近，重现性良好。

3 讨论

本研究结果表明，最优处方为HPMC K100M为骨架材料，70%乙醇为黏合剂，MCC为填充剂用量40 mg，淀粉为填充剂用量50 mg，该制备工艺简单易行，生产成本低，片剂外观及可压性良好。其中HPMC的规格是影响药物释放的最主要因素。HPMC为亲水凝胶骨架材料，吸水膨胀后可在片剂表面形成凝胶层，HPMC黏度越大，遇水形成凝胶层越厚，骨架溶蚀越慢，药物释放速度越慢[8-10]。MCC是填充剂，具有一定的阻滞作用，主要起到调整缓释片的释药速率的作用；淀粉起到稀释剂的作用。

释放度实验结果表明，五加生化缓释片2 h释放出标示量30%左右的药物，6 h释放出标示量60%左右的药物，12 h基本释放药物，各点累积释放量满足缓释制剂特征。

[参考文献]

[1] 何欣欣.五加生化胶囊的药理及临床应用[J].吉林医学，2014，35（1）：92-93.

[2] 张凤，董玉国.五加生化胶囊药理作用及临床应用[J].今日科苑，2009，13（8）：290-291.

[3] 张颖智，路娟，宋婷.五加生化胶囊对气虚血瘀模型大鼠血液流变学和细胞内皮因子的影响[J].中成药，2013，35（7）：1535-1538.

[4] 耿放，朱魁元，王发善，等.HPLC同时测定五加生化胶囊中3种有效成分的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012， 18（9）：109-111.

[5] 耿放，朱魁元，王发善，等.五加生化胶囊的高效液相色谱指纹图谱研究[J].分析科学学报，2012，28（3）：408-410.

[6] 中华人民共和国药典第二部[M].北京：人民卫生出版社，2010，附录.

[7] 葛裕华，程路峰.释放度测定研究进展[J].新疆医科大学学报，2008，31（8）：757-758.

[8] 王博，张来华，李苑新，等.亲水凝胶骨架缓释片释药机制评价方法和研究进展[J].中国医药工业杂志，2009，40（10）：782-785.

[9] 陈挺，陈子晟，包泳初，等.国产HPMC作为盐酸普萘洛尔缓释骨架片基质的研究[J].中国医药工业杂志，1998， 29（1）：10-16.

[10] 徐济恒，马凤余，周亚球.缓释片剂的研究概况[J].安徽化工，2011，37（1）：27-30.

（收稿日期：2014-07-28 本文编辑：郭静娟）