影响CXCL12/CXCR4在NSCLC中表达的相关性研究

刘华 黄杰 郭家龙 罗湘玉 刘斌 罗玲 张军

影响CXCL12/CXCR4在NSCLC中表达的相关性研究

刘华 黄杰 郭家龙 罗湘玉 刘斌 罗玲 张军

目的 检测CXCL12、CXCR4在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及癌旁正常肺组织中的表达情况, 分析其阳性表达的意义及其阳性表达与NSCLC相关参数的联系。方法 采用免疫组织化学染色方法对临床确诊的NSCLC癌组织、离其最短径5 cm以上正常肺组织标本62例进行检测。结果 NSCLC细胞CXCL12、CXCR4与NSCLC癌旁正常肺组织阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.05)；与NSCLC的TNM分期、纵隔淋巴结转移等差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 CXCL12、CXCR4在NSCLC组织中表达能够促进NSCLC癌组织的浸润、发展及转移, 并且与纵隔淋巴结转移有关；其表达是专一性的,具有靶向性。

CXCL12；CXCR4；非小细胞肺癌；免疫组织化学

趋化因子(chemokines)是被最早发现与免疫细胞具有控制细胞向炎症定向迁移的一类细胞因子, 在调控免疫细胞分化、发育及定向迁移过程中起重要作用。科研证明CCL2、CCL3、CCL4、CXCL13等19种趋化因子在癌组织中有表达［1］。其中, CCL5激活CCR1、CCR3、CCR5, 并在患者的肿瘤细胞中表达, 且在Ⅰ期肺腺癌中与患者生存率有关；抗CXCR1抗体使细胞增殖明显降低, 但抗CXCR2抗体却没有此效应,在CXCL8促肺癌有丝分裂功能主要是由CXCR1受体介导的。

CXCL12和CXCR4结合后可能参与非小细胞肺癌转移的调节。趋化因子CXCL12与其特异性受体CXCR4相互作用而构成的一个与细胞间信息传递、细胞迁移有密切关系的偶联分子对［2］。其实质在于CXCR4对其配体CXCL12的高度亲和力和绝对特异性, 即CXCR4作CXCL12的专属受体而存在。

1 材料与方法

1.1 材料 收集本院胸心外科2011年9月～2013年2月临床确诊的NSCLC癌组织、离其最短径5 cm以上正常肺组织标本70例, 最终病理确诊及纳入本实验标本62例。标本均行S-P法免疫组织化学染色。每张切片在显微镜下观察10个高倍视野计数(×400), 阳性细胞数≥10%为阳性(+), 阳性数＜10%为阴性(-)。阳性为细胞染色呈不均匀棕黄色颗粒状、棕褐色块状、网状。

1.2 采用免疫组织化学染色方法对临床确诊的NSCLC癌组织、离其最短径5 cm以上正常肺组织标本62例进行检测。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计学分析。计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

CXCL12主要在NSCLC细胞胞浆中表达, 检测到胞浆中色呈不均匀棕黄色颗粒状、棕褐色块状、网状染色,而NSCLC癌旁正常肺组织中信号相对很弱。NSCLC细胞CXCL12的阳性表达率73.8%, NSCLC癌旁正常肺组织阳性表达率15.0%, 两者之间差异有统计学意义(χ2=8.135, P=0.027)。而CXCR4主要在NSCLC癌细胞中表达, 其余指标相同。NSCLC细胞CXCR4的阳性表达33例, NSCLC癌旁正常肺组织阳性表达2例, 两者之间差异有统计学意义(χ2=6.742, P=0.035)。CXCL12、CXCR4的表达与NSCLC的 TNM分期、纵隔淋巴结转移等有显著相关性, 与性别、发病年龄、吸烟史、家族史、文化程度、组织学病理类型等差异无统计学意义。两者表达阳性率随TNM分期的升高而升高,Ⅲa～Ⅲb期表达率(90.9%)明显高于Ⅱa～Ⅱb期(55.5%), 差异有统计学意义(P＜0.05)；CXCL12、CXCR4的阳性表达率在纵隔淋巴结转移阳性表达率(94.7%)显著高于纵隔淋巴结转移阴性表达率(56.5%), 表达差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

3.1 CXCL12阳性表达分析 CXCL12是CXC族趋化因子中的成员, 其特点是分子内无谷-亮-精氨酸(ELR)基序。由组成骨髓基质细胞分泌并发挥对造血细胞的归巢到骨髓的关键作用。CXCL12对T淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等均有趋化作用。NSCLC细胞CXCL12的阳性表达率73.8%, NSCLC癌旁正常肺组织阳性表达率15.0%, 两者之间差异有统计学意义(χ2=8.135, P=0.027)。这说明NSCLC癌巢中有CXCL12表达。

3.2 CXCR4阳性表达分析 趋化因子受体CXCR4属于G蛋白耦联7次跨膜受体, 广泛表达在许多细胞表面。同CXCR1、CXCR2、CXCR3一样, 在肿瘤组织中他们的表达直接或间接反应了肿瘤的生物学特性。但CXCR4的阳性表达是促癌还是抑癌效应, 则成为下一步将要进行的分析。

3.3 CXCL12 与CXCR4的阳性表达与NSCLC临床参数的分析 CXCL12、CXCR4在NSCLC组织中均一致性表达。纵隔淋巴结转移与CXCL12、CXCR4阳性表达有关, 但CXCL12、CXCR4阳性表达在淋巴结转移的机制所起的作用并不清楚。也就是说, 纵隔淋巴结发生转移也有其他机制参与其中。CXCL12、CXCR4的阳性表达是专一性的, 是一对一的关系,这使CXCL12与CXCR4结合后让研究者专注于他们的通道研究, 这更具有靶向性。

［1］ 耿华, 徐美林.趋化因子CXCL12/CXCR4在非小细胞肺癌中的表达.天津医药, 2012(3):74-76.

［2］ 周雯慧, 刘越.趋化因子受体CXCR7在人肺癌组织和肺癌细胞系的表达.中华临床医师杂志, 2013(17):45-50.

Relevant research of influence on expression of CXCL12/CXCR4 in NSCLC

LIU Hua, HUANG Jie, GUO Jia-long, et al.Department of Chest Heart Great Vessels Surgery, Hubei Shiyan City Taihe Hospital, Shiyan 442000, China

Objective To detect the expression of CXCL12 and CXCR4 in non small cell lung cancer (NSCLC) and adjacent normal tissue, and to analyze the significance of their positive expression, and the correlation between positive expression and related NSCLC parameters.Methods Immunohistochemical staining method was applied to detect 62 cases of clinically diagnosed NSCLC and the normal lung tissue samples above 5 cm of the shortest path.Results There were statistically significant difference between the positive expression of CXCL12, CXCR4 in NSCLC and NSCLC adjacent normal tissue (P＜0.05).The positive expression of CXCL12,CXCR4 in NSCLC also had statistically significant difference with TNM period of NSCLC and mediastinal lymph node metastasis (P＜0.05).Conclusion The expression of CXCL12 and CXCR4 in NSCLC tissue can promote the infiltration, development and metastasis of NSCLC cancer tissue, and it is correlated with mediastinal lymph node metastasis.The expression has specificity and targeting feature.

CXCL12; CXCR4; Non small cell lung cancer; Immunohistochemistry

2014-08-26］

442000 湖北省十堰市太和医院胸心大血管外科

张军