非酒精性脂肪性肝病患者血清sICAM-1水平变化及意义
2014-12-02尹伟利王凤梅
叶 青，尹伟利，王凤梅，李 宁
(天津市第三中心医院，天津300170)
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一类以肝细胞脂肪变性和脂肪贮积为病理特征的临床综合征，包括非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及脂肪性肝硬化［1、2］。NAFLD 的发生是多因素作用的结果，涉及到多个相互关联的病理生理环节，肝细胞炎症及免疫损伤是其病理基础［3］。可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)是一类介导细胞间黏附的膜表面糖蛋白，在炎症反应、免疫应答等多种病理过程中发挥重要作用，研究发现sICAM-1在诸多肝脏疾病中如病毒性肝炎、肝衰竭、肝癌、酒精性肝炎等有明显升高，可能参与肝细胞炎症、免疫损伤［4～8］。目前，对于 NAFLD 患者sICAM-1水平的研究较少。2013年1～9月，我们观察了NAFL、NASH患者血清sICAM-1水平变化，现分析结果，探讨其在NAFLD发生发展中的作用。
1 材料与方法
1.1 临床资料 研究对象为天津市第三中心医院同期收治的100例NAFLD患者。其中NAFL50例(NAFL组)，男32例，女18例，年龄 35～60岁，平均42.3岁;NASH50例(NASH组)，男30例，女20例，年龄35～66岁，平均46.2岁;均符合中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组制定的NAFLD 诊断标准［9］;甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒血清标志物均阴性，否认饮酒史，并除外药物性肝病、肝豆状核变性、自身免疫性肝病等其他可导致脂肪肝的特定疾病。选择50例健康体检者为对照组，男29例，女21例，年龄48～65岁，平均54.7岁。各组年龄、性别比例等无显著差异。
1.2 观察项目 ①血清sICAM-1水平:采肘静脉血4 mL，静置，4 h内以 3 000 r/min离心20 min，吸取血清分装试管，避免溶血、高脂血标本，将血清标本置于-80℃冰箱冻存待检。采用双抗体夹心ELISA法测定sICAM-1水平。②体质量指数(BMI):于清晨空腹测量身高、体质量，计算 BMI。③血生化指标:采用微粒子化学发光免疫分析法检测空腹血胰岛素FINS;采用全自动生化仪检测空腹血糖(FPG)及血脂总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)。分析血清sICAM-1水平与BMI及血生化指标的相关性。
1.3 sICAM-1诊断NASH的价值 绘制sICAM-1诊断NASH的ROC曲线，计算ROC曲线下面积、面积的标准误，诊断NASH的敏感性、特异性等。
1.4 统计学方法 采用 SPSS13.0统计软件行数据处理，计量资料符合正态分布，以±s表示，各组间比较采用方差分析;相关性采用等级相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
各组相关指标检查结果见表1。血清sICAM-1与 TG、FINS、ALT 呈正相关(r=0.268，P ＜0.05;r=0.264，P ＜0.05;r=0.637，P ＜0.05);与TC、FPG 无相关性(r=0.134，P ＞0.05;r=0.067，P ＞0.05)。血清sICAM-1诊断NASH的ROC曲线下面积为0.79，面积的标准误为0.087，敏感性为97.1%，特异性为53.3%，面积的 95%可信区间为 0.619～0.962。
表1 三组BMI及血清sICAM-1水平、血生化指标比较(±s)
表1 三组BMI及血清sICAM-1水平、血生化指标比较(±s)
注:与对照组比较，*P ＜0.01;与 NAFL 组比较，▲P ＜0.01
组别 n BMI(kg/m2) sICAM-1(ng/mL) FINS(uIU/mL) FPG(mmol/L)TC(mmol/L) TG(mmol/L) ALT(U/L)NAFL 组 50 27.90 ±2.16* 244.62 ±60.86 17.80 ±6.31* 6.92 ±2.40 5.57 ±1.29* 3.28 ±1.29* 38.54 ±11.37*NASH 组 50 29.98 ±3.33＊▲ 379.30 ±102.79＊▲ 18.66 ±8.62* 7.06 ±2.94 5.74 ±1.77* 3.53 ±1.85* 140.92 ±49.93＊▲对照组 50 22.50 ±1.75 226.04 ±44.13 8.60 ±3.69 6.86 ±2.52 4.60 ±0.73 1.30 ±0.47 17.72 ± 9.20
3 讨论
研究证实，NAFLD与肥胖、胰岛素抵抗、高脂血症等代谢综合征密切相关［10］。在发达国家，NAFLD已成为慢性肝损伤及血清氨基酸转移酶升高的首要原因［11，12］，在我国仅次于病毒性肝炎排第2位［13］。近年来研究发现胰岛素抵抗和脂质诱导的免疫损伤在脂肪肝发病机制中起重要作用［10，14，15］。
组织学检查是诊断NAFLD的金标准，也是区分NAFL 与 NASH 的唯一可靠手段［20、21］;但肝穿刺活检为有创性检查，患者接受度低。ICAM-1是免疫球蛋白超家族成员之一，是与免疫球蛋白结构相似的一种细胞表面单链糖蛋白，在细胞膜上分为细胞外段、疏水的跨膜区段和短的细胞内区段。细胞外区段有5个细胞外免疫球蛋白样结构区，其中第一个免疫球蛋白样结构区可与淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)配基相结合而发挥作用。在正常肝脏，肝细胞不表达ICAM-1，当受到外源性刺激或免疫功能异常时，ICAM-1则明显表达于肝细胞膜，增强白细胞与血管内皮细胞的黏附，促进肝细胞炎症、免疫损伤过程［16～18］。表达于肝脏血管内皮细胞上的ICAM-1可与中性粒细胞和淋巴细胞上的CD11a/CD18、CD11b/CD18互为配体，介导血管内皮表面的炎症发生、抗原递呈和免疫应答反应等;也可与表达在淋巴细胞上的LFA-1结合，介导淋巴细胞募集反应和向肝脏等靶组织的迁移，还可使抗原特异性T细胞活化及白细胞跨内皮游走等。患者肝脏内浸润的淋巴细胞通过LFA-1/ICAM-1通路与肝细胞黏附，刺激细胞增殖，并引起肝细胞毒性免疫反应和细胞免疫损伤。
本研究结果显示，NASH患者血清sICAM-1水平高于NAFL患者及健康人，与国外相关报道［8，19］一致，说明sICAM-1在NASH的发生中起重要作用;sICAM-1水平与 TG、FINS、ALT呈正相关，表明 sICAM-1升高程度可反映肝细胞损伤的严重程度，可作为NAFLD病情评估的一项指标［22］。本研究显示sICAM-1诊断NASH的敏感性达97.1%，说明血清sICAM-1水平越高，NASH的可能性越大。
综上所述，sICAM-1可能参与了NASH的免疫损伤机制，其升高程度与肝损害严重程度有密切关系，有望替代肝穿活检成为 NAFLD诊断、区分NAFL和NASH的无创性指标。
［1］ Farrell GC，Larter CZ.Nonalcoholic fatty liver disease:from steatosis to cirrhosis［J］.Hepatology，2006，43(2 Suppl 1):99-112.
［2］Harrison SA，Kadakia S，Lang KA，et al.Nonalcoholic steatohepatitis:what we know in the new millennium［J］.Am J Gastroentero1，2002，97(11):2714-2724.
［3］Younossi ZM，Diehl AM，Ong JP.Nonalcoholic fatty liver disease:an agenda for clinic research［J］.Hepatology，2002，35(4):746-752.
［4］Bruno CM，Sciacca C，Cilio D，et al.Circulating adhesion moleculars in patients with virus-related chronic diseases of the liver［J］.World J Gastroenterol，2005，11(9):4566-4569.
［5］Ohnishi A，Miyake Y，Matsushita H，et al.Serum levels of soluble adhesion molecules as prognostic factors for acult liver failure［J］.Digestion，2012，86(2):122-128.
［6］Jung CW，Song TJ，Lee KO，et al.Characterization of hepatocellular carcinoma cell lines based on cell adhesion molecules［J］.Int Mol Med，2012，29(6):1158-1164.
［7］Tortorella C，Sacco R，Orlando P，et al.sICAM-1，sCD95and sCD95L levels in chronic liver diseases of different etiology［J］ .Immunopharmacol lmmunotoxicol，2000，22(1):19-33.
［8］Shuji Ito，Toyokazu Yukawa，Shinichiro Uetake，et al.Serum intercellular adhesion molecule-1 in patients with nonalcoholic steatohepatitis:comparison with alcoholic hepatitis［J］.Alcohol Clin Exp Res，2007，31(S1):83-87.
［9］中华医学会肝脏病学会脂肪肝和酒精性肝病学组.非酒精性脂肪肝病诊断标准［J］.中华肝脏病杂志，2003，11(2):71-72.
［10］Choudhury J，Sanyal AJ.Insulin resistance and the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease［J］.Clin liver Dis，2004，8(3):575-594.
［11］Friis-Liby I，Aldenborg F，Jerlstad P，et al.High prevalence of metabolic complications in patients with nonalcoholic fatty liver disease［J］.Scand J Gastroenterol，2004，39(9):864-869.
［12］Ekstedt M，Franzen LE，Mathiesen UL，et al.Long-term follow-up of patients with NAFLD and elevated liver enzymes［J］.Hepatology，2006，44(4):865-873.
［13］Fan JG，Farrell GC.Epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease in China［J］.J Hepatol，2009，50(1):204-210.
［14］Federico A，D'Aiuto，Borrieuo F，et al.Fat:A matter of disturb-ance for the immune system［J］.World J Gastroenterol，2010，16(38):4762-4772.
［15］Zhan YT，A W.Roles of liver innate immune cells in nonalcoholic fatty liver disease［J］.World J Gastroenterol，2010，16(37):4652-4660.
［16］Wasa wa K，Kameyama T，Ishikawa H，et al.Induction of ICAM-1 and VCAM-1 on the Mouse Lingual Lymphatic Endothelium with TNF-α［J］.Acta histochem Cytochem，2008，41(5):115-120.
［17］Abdalla A，Sheesha AA，Shokeir M，et al.Serum intercellular adhesion molecule-I in children with chronic liver disease:relationship to disease activity［J］.Dig Dis Sci，2002，47(6):1206-1208.
［18］Tortorella C，Sacco R，Orlando P，et al.sICAM-1，sCD95 and sCD95L levels in chronic liver diseases of different etiology［J］.immunopharmacol lmmunotoxicol，2000，22(1):19-33.
［19］ Sookoian S，Castano GO，Burgueno AL，et al.Circulating levels and hepatic expression of molecular mediators of atherosclerosis in nonalcoholic fatty liver disease［J］.Atherosclerosis，2010，209(2):585-591.
［20］Vuppalanchi R，Chalasani N.Non-alcoho lic fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis:Selected practical issues in their evaluation and management［J］.Hepatology，2009，49(1):306-317.
［21］Merriman RB，Ferrell LD，Patti MG，et al.Correlation of paired liver biopsies in morbidly obese patients with suspected nonalcoholic fatty liver disease［J］.Hepatology，2006，44(4):874-880.
［22］Söderberg C，Marmur J，Eckes K，et al.Microvesicular fat，inter cellular adhesion molecule-1 and regulatory T-lymphocytes are of importance for the inflammatory process in livers with nonalcoholic steatohepatitis［J］.APMIS，2011，119(7):412-420.
