生物型人工硬脑膜在硬脑膜缺损中的实验研究

钟宝，周波，罗赤星 全中平，罗心凯，张铭

（荆门市第二人民医院神经外科，湖北 荆门 448000）

硬脑膜修补术是神经外科手术中维护人体解剖学完整及保护脑组织的主要手段，其修补过程中使用的材料主要为人工硬脑膜及自体膜，但由于人工硬脑膜材料均存在一定程度的缺点，临床上探索新型修补材料方面的研究从未停止［1］。目前，有研究分析指出，一种新型的生物型人工硬脑膜在修复硬脑膜中有着极为显著的疗效［2］，为分析该种生物型人工硬脑膜与自体膜在硬脑膜修复术中的优越性，本文选取实验犬为研究对象，均给予上述两种修复材料行硬脑膜修复，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象

选取的实验犬12只均统一由研究机构提供，雌雄不限，依据实验犬生长时间将其分成四组，每组3只，A组1月龄，B组4月龄，C组12月龄，D组24月龄；4组实验犬均预先饲养2周，记录生活习性、健康状况、发育情况等一般资料后进行实验。

1.2 方法

对4组实验犬均行硫喷妥钠静脉复合麻醉，将犬头顶毛剃光，于动物手术台上，对手术操作区域行常规消毒、铺巾，于头顶正中线位取纵向方向切开，充分暴露颅骨，随后用高速电钻对冠状缝后中线两侧进行钻磨处理，制造一个直径约12mm的骨窗，促使硬脑膜充分暴露，并在双侧剪出一个1cm×1.5cm的矩形硬脑膜，创造硬脑膜缺损，随后将生物型人工硬脑膜修剪成相应形状的修补材料，对缺损处进行修补，保持光滑面朝向脑表面，并缝合周边肌肉；另外，取右侧手术操作区的颅骨骨膜，其大小较右侧硬脑膜缺损面积稍大，将取出膜泡于生理盐水中备用，应用时同样保持其光滑面朝向脑表面，其余步骤同生物型人工硬脑膜修补操作相同。

1.3 术后处理及标本取样

术后均给予青霉素预防感染处理，并行常规饲养；各组实验犬达到饲养设定时间（8个月）后，处死，并取样修补部位组织，观察修补材料内外表面及与周边组织的关系，查看是否存在囊肿、硬结。同时，对取样标本行常规福尔马林液处理，固定7d后，行石蜡包埋和HE染色。

1.4 统计学分析

采用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析，计量资料以（±s）表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 动物观察结果

4组动物手术均成功完成，术后均表现正常，未出现明显的运动障碍。行常规血常规白细胞计数检测发现，术前及处死前四组动物白细胞检测结果对比差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 术前及处死前白细胞计数对比 ×109／L

2.2 取样标本观察

肉眼观察发现，生物型人工硬脑膜外表面与头皮组织粘连程度较轻，仅存在少许血丝，较易剥离；切割取出标本后，发现硬脑膜与修补材料之间愈合较为平整，可观察部分缝合丝线；而自体膜和头皮组织粘连程度较生物型人工硬脑膜重，且在界面可观察到供血组织，较易分离，但渗血严重。

对各组实验犬取出的标本进行观察发现，生物型人工硬脑膜与硬脑膜的生长极为接近，可在其内表面上观察到明显新生上皮组织，且几乎未与脑表面发生粘连迹象；而对自体膜内表面观察发现，其与脑表面之间有明显的粘连迹象，且存在柱状粘连。

2.3 组织学观察

对各组实验犬解剖后取样材料行组织学检测发现，生物型人工硬脑膜材料和犬本身硬脑膜之间排异反应不明显，无明显的出血、供血等症状，HE染色结果显示，生物型人工硬脑膜内侧表面出现大量的上皮细胞组织，可观察到胶原蛋白增多及纤维母细胞增生，且在修补材料整体减少，被降解且内部长出细胞组织夹层。见图1。

图1 各组术后HE染色后组织观察结果

3 讨论

硬脑膜缺损主要由创伤、手术操作、肿瘤侵蚀等因素造成，是神经外科常常需要面对和解决的难题，而硬脑膜修补术能有效修补缺损部位，降低癫痫、颅内感染、脑脊液漏等并发症发生率。

临床上，对于修复硬脑膜时应用的修补材料要求较高，不仅需要其具备优良的机械特性，还需要和受体组织有着较为优良的组织相容性；同时还要具备允许组织细胞能在其内部生长、代谢，并逐渐对修补材料产生降解和可代谢作用，使得新生成的组织能有效替代修补材料，完成实际意义上的硬脑膜重建［3］。

本研究显示，实验犬在应用生物型人工硬脑膜材料行修补术后，该材料与脑组织的相容性明显较自体膜优良，且产生的上皮细胞组织表明其能有效被犬自身组织降解、蚕食和代替，并且该材料光滑面不会与脑皮层组成产生粘连，且未发现明显排异反应，这说明该修补材料不仅效果优良性高，且安全性好，能在各年龄组有效达到硬脑膜重建的治疗效果，是一种安全性的修补材料。

［1］李文辉，吴日乐，岑莲.人工硬脑膜修补材料的研究及其临床应用［J］.组织工程与重建外科杂志，2013，9（2）：113－115.

［2］陈振军.硬脑膜替代材料的研究与应用［J］.中国组织工程研究与临床康复，2008，12（14）：2697－2700.

［3］陶小虎.人工硬脑膜修补材料在神经外科的应用［J］.中国组织工程研究，2012，16（12）：2217－2220.