苓桂术甘汤对急性心梗后心室重构模型大鼠心功能及血清BNP的影响*

龚晓燕，王 靓，黄金玲，施 慧，王桐生，洪星辉，华明柳

（安徽中医药大学，安徽合肥 230038）

苓桂术甘汤（linggui zhu-gan decoction，LGZGD）为仲景名方，是温阳益气、健脾化饮的代表方。在前期的研究中我们发现该方能够有效地干预心梗后6周模型大鼠的心脏舒缩性[1-2]。为进一步探明苓桂术甘汤干预心梗后心室重构（ventricular remodeling，VR）的作用和机制，本实验拟通过观察苓桂术甘汤对急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）后心室重构2周模型大鼠心功能的影响及各组大鼠血清B型钠尿肽（B-type natriuretic peptide，BNP）含量的变化，进一步为苓桂术甘汤早期预防心衰的临床应用提供实验依据。

1 实验材料

1.1 动物

清洁级SD大鼠80只，雄性（♂），体质量（200±20）g，由安徽医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（皖）2011-002。实验前适应性喂养5d。

1.2 药品与试剂

苓桂术甘汤参考文献[3]方法，由安徽省亳州市兴和药业有限公司制成干浸膏粉末，含生药量4.8g/g（其中桂皮醛含量9.945mg/g，甘草酸含量：14.71mg/g），4℃冰箱密封保存备用；卡托普利：中美上海施贵宝制药有限公司，批号009031；BNP试剂盒：上海森雄科技实业有限公司。

1.3 主要仪器

Power Lab数据采集分析系统：澳大利亚埃德公司；HX-300S型小型动物呼吸机：成都泰盟科技有限公司；Multiskan MK2型酶标仪：芬兰Labsystem公司。

2 方法

2.1 动物模型复制、分组及给药

取SD大鼠70只，参照参考文献[1-2]用冠状动脉结扎法复制急性心肌梗死模型。以心电图S-T段抬高伴肢体导联R波高尖，作为结扎成功的标准。另取10只SD大鼠只穿线但不结扎冠状动脉作为假手术组。手术过程按照无菌操作要求进行。造模2周后除假手术组（蒸馏水10mL/kg灌胃）外，其余存活模型大鼠随机分为5组（每组12只）：模型组，苓桂术甘汤小、中、大剂量组（2.1g/kg，4.2g/kg，8.4g/kg，按体表面积法换算，相当于成人日常用量的1、2、4倍），卡托普利组（4.375mg/kg）。灌胃（ig）给药（容积为10mL/kg体质量），模型组与假手术组灌胃等容积蒸馏水，连续处理4周。

2.2 血流动力学指标测定

于最后第二次药后禁食12h，2%戊巴比妥钠25mg/kg腹腔麻醉后进行血流动力学检测。参考文献[1]方法分离右颈总动脉，用Power Lab数据采集分析记录仪测定左心室收缩末压力（LVSP）、左心室舒张期末压（LVEDP）、左室内压最大收缩率（+dp/dtmax）、左室内压最大舒张率（-dp/dtmax）。

2.3 采用ELISA法检测血清BNP含量

末次给药后30min，采用腹腔注射20%乌拉坦（5mL/kg）的方法麻醉各组大鼠，腹主动脉采血。血液常温下静置30min后，离心分离血清，用酶标仪检测BNP含量。

3 统计方法

采用统计分析软件SPSS 17.0进行统计学处理。连续型变量用（±s）表示，多样本均数比较用one-way ANOVA法，多个均数比较采用LSD法。

4 结果

4.1 对心室重构模型大鼠血流动力学的影响

由表1可见，行冠状动脉结扎术后模型组大鼠与假手术组相比，LVSP与+dp/dtmax、-dp/dtmax均明显下降（P＜0.01），LVEDP 明显升高（P＜0.01）；造模2周后连续给予苓桂术甘汤和卡托普利干预4周后，各组大鼠血流动力学指标均有显著改善：苓桂术甘汤小、中、大剂量组大鼠LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax均显著上升，LVEDP显著下降，与模型组比较差异均具有统计学意义（P＜0.01）。

表1 苓桂术甘汤急性心梗后2周干预对心室重构模型大鼠血流动力学的影响（x±s）

4.2 苓桂术甘汤对心室重构模型大鼠血清BNP含量的影响

由表2可见，行冠状动脉结扎术后模型大鼠与假手术组比血清BNP含量明显升高（P＜0.01）；而分别在造模2周后，连续给予苓桂术甘汤干预4周后的各组大鼠血清BNP含量明显降低，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05，或P＜0.01）。

表2 苓桂术甘汤对急性心梗2周后模型大鼠血清BNP 的影响（±s）

表2 苓桂术甘汤对急性心梗2周后模型大鼠血清BNP 的影响（±s）

注：与假手术组比，△P＜0.05，△△P＜0.01；与模型组比，*P＜0.05，**P＜0.01；与卡托普利组比，#P＜0.05，##P＜0.01

组别 剂量/g·kg-1 动物数/n BNP/ng·L-1假手术组 - 10 183.416±14.081模型组 - 8 295.822±24.856△△卡托普利组 0.004 10 238.708±12.467**小量组 2.100 9 245.028±20.347**中量组 4.200 10 221.858±13.908**#大量组 8.400 10 217.356±18.155**##

5 讨论

急性心肌梗死可激活神经内分泌调节机制和细胞内相关信号转导机制，导致左心室的进行性扩张和外形的改变，即为心室重构。目前认为心室重构是AMI后发生慢性心衰的重要病理基础。

BNP是一种心血管肽类激素，主要由心室分泌，能敏感而特异地反映左心室功能变化。引起BNP分泌增加的主要因素是心室扩张或心室压力增高，当心脏容量负荷或压力负荷增加时，心脏合成和分泌BNP并释放入血，使血中BNP浓度增高[4-5]。韩玲等[6]对慢性心力衰竭（CHF）患者BNP与中医辨证分型的关系进行了临床研究，发现阳虚病人的BNP含量明显高于其他证型的病人，他们认为心阳是心脏泵血功能的决定因素，与本课题组“心阳气虚是心衰之本、贯穿心衰病机始终”的观点具有一致性。

苓桂术甘汤方出自张仲景《伤寒杂病论》，是温阳化饮的代表方，方中茯苓养心益脾，淡渗利水；桂枝辛温通阳，两药相配通阳化气、利水渗湿。本实验在既往研究基础上[1-2]，观察苓桂术甘汤对急性心肌梗死后早期干预的作用。本研究结果显示，对急性心肌梗死后2周模型大鼠用苓桂术甘汤连续干预4周，与模型组相比，血流动力学各项指标显著改善，同时我们发现血浆BNP水平与LVEDP呈正相关性。苓桂术甘汤小、中、大剂量组大鼠LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax均显著上升，LVEDP显著下降，大鼠血清BNP含量明显降低，均与模型组比有显著性差异（P＜0.01或P＜0.05）。实验表明苓桂术甘汤对AMI大鼠心脏舒缩性能具有显著的改善作用，其作用与降低大鼠血清BNP含量密切相关。

综上所述，我们认为苓桂术甘汤可以显著改善AMI后心室重构模型大鼠心功能，降低大鼠血清BNP含量，有效发挥阻抑心室重构的作用。结合本课题组前期研究基础，我们认为苓桂术甘汤可以有效阻抑心室重构，防治CHF，下一步课题组将进一步就其干预心室重构的机制做深入探讨。

[1]黄金玲，桑方方，王桐生，等.苓桂术甘汤对充血性心衰竭大鼠心脏指数与血流动力学的影响 [J].安徽中医学院学报，2009，28（5）：58-60.

[2]方海雁，黄金玲，桑方方，等.苓桂术甘汤对慢性心衰大鼠AngⅡ、ET-1、TNF-α 和IL-β 的影响[J].安徽中医学院学报，2010，29（2）：53-55.

[3]黄金玲，王慧慧，陈慧芳，等.正交试验法优选苓桂术甘汤的提取工艺[J].安徽中医学院学报，2011，30（6）：65-67.

[4]刘恩华.急性心肌梗死患者心肌损伤标志物动态监测价值的比较[J].标记免疫分析与临床，2010（2）：65-67.

[5]龚厚文.BNP，NT-proBNP检测在心力衰竭中的应用进展[J].西南军医，2010（1）：99-101.

[6]韩玲.心力衰竭患者脑钠肽、左室射血分数与中医辨证分型关系的临床研究[J].新疆中医药，2009（2）：18-20.