细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌的抑制作用

李凡海　王桂清

摘要：采用生长速率法和孢子萌发法分别测定细辛精油和3种化学药剂（70%恶霉灵WP、500 g /L扑海因SC、30%嘧霉胺SC）对茄子枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑菌效果。结果表明：细辛精油对茄子枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发具有明显的抑制作用，EC50分别为1 009.72 mg/L和349.05 mg/L，且对孢子萌发的抑制作用明显优于菌丝生长，说明细辛精油对茄子枯萎病菌的主要作用方式为抑制孢子萌发；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵提高61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

关键词：细辛精油；枯萎病菌；生长速率法；孢子萌发

中图分类号：S482.2 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2014）07-0010-04

茄子（Solanum melongena L.）是一种重要的蔬菜，在我国栽种面积达20余万hm2。近年来，茄子病害日益严重，其中茄子枯萎病（Fusarium oxysporum f.sp.melongenae Matuo et lshigami Schlecht.）是一种常见的土传性病害，可引起维管束病变，造成植株死亡，使病田减产20%～30%，严重时高达50%～60%，甚至绝产。生产绿色有机蔬菜时，防治病害应主要采用生物防治方式，以减少农药对环境和人畜的危害，防止病原菌产生抗药性及再泛滥。细辛（Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var.Mandshuricum （Maxrm）Kitag.）属常用中草药，其活性物质主要为挥发油精油。王桂清等的研究表明，细辛精油具有广谱抑菌活性，对玉米、黄瓜、果树、棉花、木本花卉等多种植物病害致病菌具有抑制作用。以茄子枯萎病菌为靶标病原菌、细辛精油为研究对象、3种化学药剂为对照，研究细辛精油和化学药剂对茄子枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑菌效果，为将细辛精油开发成植物源杀菌剂提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试菌种

茄子枯萎病菌来源于聊城大学农学院病理实验室。该病原真菌病样采集于聊城市许营村蔬菜大棚，经分离、纯化、鉴定后保存备用。

1.2 供试制剂

细辛精油采用超临界CO2萃取法获得，密封保存于4 ℃冰箱中。

恶霉灵70%可湿性粉剂（WP）由山东烟台鑫润精细化工有限公司生产；扑海因500 g /L悬浮剂（SC，有效成分通用名称为异菌脲）由拜耳杭州作物科学有限公司生产；嘧霉胺30%悬浮剂（SC）由山东京博农化有限公司生产。

1.3 制剂配制

1） 菌丝生长抑制液：用少量二甲基亚砜溶解细辛精油（不超过总体积的2%），然后用无菌水配制成10 000 mg/L的母液，采用二倍稀释法配成10 000，

5 000，2 500，1 250，625 mg/L等5个浓度梯度；

3种化学药剂分别用无菌水配制成2 000，

1 000，500，250，125 mg/L等5个浓度梯度。

2） 孢子萌发抑制液：细辛精油的配制方法同1）；3种化学药剂的5个浓度梯度为1 000.0，500.0，

250.0，125.0，62.5 mg/L。

1.4 生物测定方法

1） 生长速率法。采用生长速率法测定细辛精油和3种化学药剂对茄子枯萎病菌菌丝生长的抑制作用，培养基为含药PDA，空白对照不加药，3次重复。细辛精油终浓度为1 000.0，500.0，250.0，125.0，62.5 mg/L，3种化学药剂终浓度分别为200.0，100.0，

50.0，25.0，12.5 mg/L。

2） 孢子萌发法。采用孢子萌发法测定细辛精油和3种化学药剂对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑制作用，3次重复。细辛精油终浓度为1 000.0，500.0，

250.0，125.0，62.5 mg/L，3种化学药剂终浓度分别为100.00，50.00，25.00，12.50，6.25 mg/L。

1.5 数据处理及毒力回归曲线建立

应用Microsoft Excel软件处理数据；采用SPSS 10.0软件建立毒力回归曲线，将抑菌的百分率转换成几率值，浓度转换成对数，进行几率值分析，分别求出细辛精油和3种化学药剂的抑制中浓度（EC50）；利用DPS v7.05专业版软件，依据Duncar新复极差法进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 细辛精油对菌丝生长的抑制作用

供试条件下，细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌菌丝生长的抑制效果见表1和表2。

由表1和表2可以看出：细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌菌丝生长均有抑制作用，且随着制剂浓度的升高，抑制率逐渐增加；相同浓度条件下，不同药剂对菌丝生长的抑制效果不同；当浓度≤100 mg/L时，嘧霉胺、扑海因和恶霉灵三者的抑菌效果差异性显著，其中扑海因的效果最佳，当浓度为50 mg/L时，其抑菌率超过了50%；浓度为200 mg/L时，扑海因和嘧霉胺的抑菌效果差异性不显著，抑菌率分别为86.42%和88.01%；当细辛精油浓度为1 000 mg/L时，其对菌丝生长的抑制率达到61.48%。

由表2可以看出：细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌菌丝生长的抑制效果存在差异，3种化学农药中扑海因的抑制效果最佳，EC50和EC90分别为41.08 mg/L和155.76 mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分别为58.30 mg/L和216.25 mg/L；恶霉灵的效果较差，EC50为827.07 mg/L，EC90达到了18 146.34 mg/L；细辛精油的EC50为1 009.72 mg/L，而其EC90

（6 962.07 mg/L）低于恶霉灵的EC90（18 146.34 mg/L），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

2.2 细辛精油对孢子萌发的抑制作用

细辛精油和3种化学农药对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果如表3—5所示。

由表3和表4可以看出：细辛精油和3种化学农药对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果随着药剂浓度的升高而增强；相同浓度条件下，不同药剂对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果存在差异，当化学农药浓度≤25.0 mg/L时，扑海因、嘧霉胺和恶霉灵3种药剂之间抑菌效果差异不显著，但当浓度≥50.0 mg/L时，3者之间则差异极显著；3种化学农药之中扑海因的抑菌效果最佳，恶霉灵的抑菌效果最差，当浓度为100.0 mg/L时，前者的抑菌率（90.13 %）是后者（7.18 %）的12.55倍。细辛精油作为一种植物提取物，当浓度为500 mg/L时，其对孢子萌发的抑制率达到84.63%，抑菌效果非常显著。

由表5可以看出：细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑制效果差异较大：3种化学农药中扑海因的抑菌效果最佳，EC50和EC90分别为42.05 mg/L和133.50 mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分别为71.64 mg/L和221.47 mg/L；而恶霉灵的抑制效果较差，EC50和EC90分别为7 243.56 mg/L和

315 212.95 mg/L；细辛精油的EC50和EC90分别为348.99 mg/L和776.99 mg/L，与恶霉灵比较，EC50提高了95.18%，EC90提高了99.75%，说明细辛精油对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑菌效果明显，远优于恶霉灵。

总体而言，细辛精油对孢子萌发的抑制效果优于对菌丝生长的抑制效果，EC50分别为348.99 mg/L和1 009.72 mg/L；3种化学农药中扑海因对枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果最佳，EC50分别为41.08 mg/L和42.05 mg/L，恶霉灵的抑制效果较差，EC50分别为827.07 mg/L和7243.56 mg/L，分别为扑海因的20.13倍和172.26倍，为细辛精油的0.82倍和20.76倍；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵提高了61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发）。

3 结论与讨论

采用生长速率法和孢子萌发法分别测定细辛精油和3种化学农药（70%恶霉灵WP、扑海因SC、30%嘧霉胺SC）对茄子枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑菌效果。结果表明：细辛精油对菌丝生长和孢子萌发的EC50分别为1 009.72 mg/L和348.99 mg/L，其对孢子萌发的抑制效果明显优于对菌丝生长的抑制作用，说明细辛精油作为植物提取物对茄子枯萎病菌的主要作用方式为抑制孢子萌发，使其不能增殖，从根本上灭杀病原菌；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵高61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

枯萎病是农作物、果蔬、花卉、苗木等的常见病害，使寄主植物长势减弱或死亡，导致减产甚至绝产。生物防治不仅能够有效控制病害的发生和危害，而且能够提高产品产量和质量，减少对环境的污染和对人畜的危害。开发新的生防农药尤其是植物源农药，已成为植保界和化工界的研究新热点。郭新春的研究发现，小茴香（Fructus Foeniculi）提取物对棉花枯萎病菌（F. oxysporum f. sp.）有较强的抑菌活性，当浓度为0.1 g/mL时抑菌率达到100%。王磊等的研究表明：木香（Aucklandia lappa Decne）、丁香（Syzygium aromaticum）、肉桂（Cinnamomum cassia）和大黄（Rheum palmatum）这4种植物的提取物对黄瓜枯萎病菌（F. oxysporium f. sp. cucumerinum）和西瓜枯萎病菌（F. oxysporum f. sp. Niveum）均有明显的抑制作用，当4种植物提取物浓度均为25 mg/mL时，木香、丁香和肉桂的提取物对黄瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌丝生长抑制率均达到90%左右，大黄提取物对两者菌丝生长的抑制率分别为54.5%和67.2%。范志宏等的研究表明，万寿菊（Tagetes erecta L.）精油杀菌素对西瓜枯萎病菌有较强的抑制作用，当其浓度达到1.5 μg/mL时，抑制率达到100%。王树桐等发现丁香等十几种中草药提取物对香蕉枯萎病菌（F. oxysporum f. sp.）有一定的抑制作用，其中丁香提取物抑菌效果最好，对菌株B1和菌株B2的抑制浓度分别为3.40 mg/mL和3.38 mg/mL。王桂清采用细辛精油处理黄瓜枯萎病菌，发现当细辛精油浓度为1 200 mg/L时，对黄瓜枯萎病菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为85%和75%，EC50分别为314.12 mg/L和860.43 mg/L。以上研究说明，利用植物提取物防治枯萎病是可行的。本研究结果也表明：细辛精油对茄子枯萎病菌有明显的抑制效果。在实践生产中，细辛精油可以作为一种植物源杀菌剂来替代化学农药防治茄子枯萎病的发生和危害。

参考文献

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[13] 范志宏，郭春绒，王金胜.万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌的抑菌作用及对西瓜幼苗的影响[J].北方园艺，2011（8）：9-14.

[14] 王树桐，黄惠琴，方哲，等.中草药提取物对香蕉镰刀菌枯萎病病原菌的抑制作用[J].热带作物学报，2008，29（1）：78-82.

（6 962.07 mg/L）低于恶霉灵的EC90（18 146.34 mg/L），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

2.2 细辛精油对孢子萌发的抑制作用

细辛精油和3种化学农药对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果如表3—5所示。

由表3和表4可以看出：细辛精油和3种化学农药对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果随着药剂浓度的升高而增强；相同浓度条件下，不同药剂对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果存在差异，当化学农药浓度≤25.0 mg/L时，扑海因、嘧霉胺和恶霉灵3种药剂之间抑菌效果差异不显著，但当浓度≥50.0 mg/L时，3者之间则差异极显著；3种化学农药之中扑海因的抑菌效果最佳，恶霉灵的抑菌效果最差，当浓度为100.0 mg/L时，前者的抑菌率（90.13 %）是后者（7.18 %）的12.55倍。细辛精油作为一种植物提取物，当浓度为500 mg/L时，其对孢子萌发的抑制率达到84.63%，抑菌效果非常显著。

由表5可以看出：细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑制效果差异较大：3种化学农药中扑海因的抑菌效果最佳，EC50和EC90分别为42.05 mg/L和133.50 mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分别为71.64 mg/L和221.47 mg/L；而恶霉灵的抑制效果较差，EC50和EC90分别为7 243.56 mg/L和

315 212.95 mg/L；细辛精油的EC50和EC90分别为348.99 mg/L和776.99 mg/L，与恶霉灵比较，EC50提高了95.18%，EC90提高了99.75%，说明细辛精油对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑菌效果明显，远优于恶霉灵。

总体而言，细辛精油对孢子萌发的抑制效果优于对菌丝生长的抑制效果，EC50分别为348.99 mg/L和1 009.72 mg/L；3种化学农药中扑海因对枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果最佳，EC50分别为41.08 mg/L和42.05 mg/L，恶霉灵的抑制效果较差，EC50分别为827.07 mg/L和7243.56 mg/L，分别为扑海因的20.13倍和172.26倍，为细辛精油的0.82倍和20.76倍；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵提高了61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发）。

3 结论与讨论

采用生长速率法和孢子萌发法分别测定细辛精油和3种化学农药（70%恶霉灵WP、扑海因SC、30%嘧霉胺SC）对茄子枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑菌效果。结果表明：细辛精油对菌丝生长和孢子萌发的EC50分别为1 009.72 mg/L和348.99 mg/L，其对孢子萌发的抑制效果明显优于对菌丝生长的抑制作用，说明细辛精油作为植物提取物对茄子枯萎病菌的主要作用方式为抑制孢子萌发，使其不能增殖，从根本上灭杀病原菌；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵高61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

枯萎病是农作物、果蔬、花卉、苗木等的常见病害，使寄主植物长势减弱或死亡，导致减产甚至绝产。生物防治不仅能够有效控制病害的发生和危害，而且能够提高产品产量和质量，减少对环境的污染和对人畜的危害。开发新的生防农药尤其是植物源农药，已成为植保界和化工界的研究新热点。郭新春的研究发现，小茴香（Fructus Foeniculi）提取物对棉花枯萎病菌（F. oxysporum f. sp.）有较强的抑菌活性，当浓度为0.1 g/mL时抑菌率达到100%。王磊等的研究表明：木香（Aucklandia lappa Decne）、丁香（Syzygium aromaticum）、肉桂（Cinnamomum cassia）和大黄（Rheum palmatum）这4种植物的提取物对黄瓜枯萎病菌（F. oxysporium f. sp. cucumerinum）和西瓜枯萎病菌（F. oxysporum f. sp. Niveum）均有明显的抑制作用，当4种植物提取物浓度均为25 mg/mL时，木香、丁香和肉桂的提取物对黄瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌丝生长抑制率均达到90%左右，大黄提取物对两者菌丝生长的抑制率分别为54.5%和67.2%。范志宏等的研究表明，万寿菊（Tagetes erecta L.）精油杀菌素对西瓜枯萎病菌有较强的抑制作用，当其浓度达到1.5 μg/mL时，抑制率达到100%。王树桐等发现丁香等十几种中草药提取物对香蕉枯萎病菌（F. oxysporum f. sp.）有一定的抑制作用，其中丁香提取物抑菌效果最好，对菌株B1和菌株B2的抑制浓度分别为3.40 mg/mL和3.38 mg/mL。王桂清采用细辛精油处理黄瓜枯萎病菌，发现当细辛精油浓度为1 200 mg/L时，对黄瓜枯萎病菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为85%和75%，EC50分别为314.12 mg/L和860.43 mg/L。以上研究说明，利用植物提取物防治枯萎病是可行的。本研究结果也表明：细辛精油对茄子枯萎病菌有明显的抑制效果。在实践生产中，细辛精油可以作为一种植物源杀菌剂来替代化学农药防治茄子枯萎病的发生和危害。

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[9] 王桂清.细辛精油对5种黄瓜病害致病菌的离体抑菌活性[J].长江蔬菜，2008（6）：44-46.

[10] 华南农业大学主编.植物化学保护[M].（第二版）.北京：农业出版社，1998.

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[13] 范志宏，郭春绒，王金胜.万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌的抑菌作用及对西瓜幼苗的影响[J].北方园艺，2011（8）：9-14.

[14] 王树桐，黄惠琴，方哲，等.中草药提取物对香蕉镰刀菌枯萎病病原菌的抑制作用[J].热带作物学报，2008，29（1）：78-82.

（6 962.07 mg/L）低于恶霉灵的EC90（18 146.34 mg/L），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

2.2 细辛精油对孢子萌发的抑制作用

细辛精油和3种化学农药对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果如表3—5所示。

由表3和表4可以看出：细辛精油和3种化学农药对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果随着药剂浓度的升高而增强；相同浓度条件下，不同药剂对枯萎病菌孢子萌发的抑制效果存在差异，当化学农药浓度≤25.0 mg/L时，扑海因、嘧霉胺和恶霉灵3种药剂之间抑菌效果差异不显著，但当浓度≥50.0 mg/L时，3者之间则差异极显著；3种化学农药之中扑海因的抑菌效果最佳，恶霉灵的抑菌效果最差，当浓度为100.0 mg/L时，前者的抑菌率（90.13 %）是后者（7.18 %）的12.55倍。细辛精油作为一种植物提取物，当浓度为500 mg/L时，其对孢子萌发的抑制率达到84.63%，抑菌效果非常显著。

由表5可以看出：细辛精油和3种化学农药对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑制效果差异较大：3种化学农药中扑海因的抑菌效果最佳，EC50和EC90分别为42.05 mg/L和133.50 mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分别为71.64 mg/L和221.47 mg/L；而恶霉灵的抑制效果较差，EC50和EC90分别为7 243.56 mg/L和

315 212.95 mg/L；细辛精油的EC50和EC90分别为348.99 mg/L和776.99 mg/L，与恶霉灵比较，EC50提高了95.18%，EC90提高了99.75%，说明细辛精油对茄子枯萎病菌孢子萌发的抑菌效果明显，远优于恶霉灵。

总体而言，细辛精油对孢子萌发的抑制效果优于对菌丝生长的抑制效果，EC50分别为348.99 mg/L和1 009.72 mg/L；3种化学农药中扑海因对枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果最佳，EC50分别为41.08 mg/L和42.05 mg/L，恶霉灵的抑制效果较差，EC50分别为827.07 mg/L和7243.56 mg/L，分别为扑海因的20.13倍和172.26倍，为细辛精油的0.82倍和20.76倍；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵提高了61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发）。

3 结论与讨论

采用生长速率法和孢子萌发法分别测定细辛精油和3种化学农药（70%恶霉灵WP、扑海因SC、30%嘧霉胺SC）对茄子枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的抑菌效果。结果表明：细辛精油对菌丝生长和孢子萌发的EC50分别为1 009.72 mg/L和348.99 mg/L，其对孢子萌发的抑制效果明显优于对菌丝生长的抑制作用，说明细辛精油作为植物提取物对茄子枯萎病菌的主要作用方式为抑制孢子萌发，使其不能增殖，从根本上灭杀病原菌；从EC90上看，细辛精油的抑菌效果比恶霉灵高61.63%（菌丝生长）和99.75 %（孢子萌发），说明细辛精油在较高浓度时的抑菌效果优于恶霉灵。

枯萎病是农作物、果蔬、花卉、苗木等的常见病害，使寄主植物长势减弱或死亡，导致减产甚至绝产。生物防治不仅能够有效控制病害的发生和危害，而且能够提高产品产量和质量，减少对环境的污染和对人畜的危害。开发新的生防农药尤其是植物源农药，已成为植保界和化工界的研究新热点。郭新春的研究发现，小茴香（Fructus Foeniculi）提取物对棉花枯萎病菌（F. oxysporum f. sp.）有较强的抑菌活性，当浓度为0.1 g/mL时抑菌率达到100%。王磊等的研究表明：木香（Aucklandia lappa Decne）、丁香（Syzygium aromaticum）、肉桂（Cinnamomum cassia）和大黄（Rheum palmatum）这4种植物的提取物对黄瓜枯萎病菌（F. oxysporium f. sp. cucumerinum）和西瓜枯萎病菌（F. oxysporum f. sp. Niveum）均有明显的抑制作用，当4种植物提取物浓度均为25 mg/mL时，木香、丁香和肉桂的提取物对黄瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌丝生长抑制率均达到90%左右，大黄提取物对两者菌丝生长的抑制率分别为54.5%和67.2%。范志宏等的研究表明，万寿菊（Tagetes erecta L.）精油杀菌素对西瓜枯萎病菌有较强的抑制作用，当其浓度达到1.5 μg/mL时，抑制率达到100%。王树桐等发现丁香等十几种中草药提取物对香蕉枯萎病菌（F. oxysporum f. sp.）有一定的抑制作用，其中丁香提取物抑菌效果最好，对菌株B1和菌株B2的抑制浓度分别为3.40 mg/mL和3.38 mg/mL。王桂清采用细辛精油处理黄瓜枯萎病菌，发现当细辛精油浓度为1 200 mg/L时，对黄瓜枯萎病菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为85%和75%，EC50分别为314.12 mg/L和860.43 mg/L。以上研究说明，利用植物提取物防治枯萎病是可行的。本研究结果也表明：细辛精油对茄子枯萎病菌有明显的抑制效果。在实践生产中，细辛精油可以作为一种植物源杀菌剂来替代化学农药防治茄子枯萎病的发生和危害。

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