淋巴细胞主动免疫联合地屈孕酮治疗封闭抗体阴性所致复发性流产的临床观察

杨章莉，周春慧，李新蓉，王敏，谭艳

（湖南省株洲市妇幼保健院生殖科，株洲 412008）

复发性流产（RSA）是指自然流产连续发生2次或2次以上者。RSA是妇产科常见并发症，发病率约占自然流产率的3%～5%［1］。其病因复杂，除了染色体、子宫解剖、内分泌异常以及生殖道感染等因素外，约50%以上患者为不明原因流产。近年研究表明：因免疫异常所致的RSA约占50%～60%，可分为自身免疫异常所致RSA和同种免疫异常所致RSA两大类［2］。而临床中对于封闭抗体阴性所致的RSA患者，采用父方或无关第三方个体淋巴细胞进行主动免疫治疗，人为地强化妊娠的免疫学维持机制，抑制母胎间的细胞性免疫排斥反应，达到降低流产率的目的［3］。

本研究就同种免疫异常所致RSA中的患者进行临床观察治疗。将收治封闭抗体阴性所致RSA患者接受与未接受淋巴细胞主动免疫治疗后的临床结局进行探讨。

资料和方法

一、患者一般资料及分组

选择2011年4月至2012年12月在我院生殖科诊治的封闭抗体阴性所致RSA患者55例，随机分成两组：治疗组30例，年龄22～40岁，平均年龄（28.30±4.65）岁，流产次数2～4次；对照组25例，年龄23～41岁，平均年龄（29.28±4.12）岁，流产次数2～4次。两组一般资料比较无统计学差异（P＞0.05）。

治疗组采用丈夫或无关第三方个体淋巴细胞进行主动免疫治疗，妊娠后辅以常规“地屈孕酮（雅培，荷兰苏威制药）10mg bid”保胎治疗。对照组未行淋巴细胞主动免疫治疗，妊娠后仅以常规“地屈孕酮10mg bid”保胎治疗。

二、封闭抗体阴性所致RSA诊断标准

RSA的诊断要点为［4］：连续2次或2次以上反复自然流产患者；B超及宫腔镜检查：排除女方生殖道畸形；男女双方染色体核型分析正常；内分泌激素检查、甲状腺功能检测及空腹血糖均正常；自身抗体检查：包括 AsAb、EmAb、AcAb、ANA、AoAb等检测均阴性；双方行围产四项检查均阴性，女方支原体、衣原体检查均阴性；女方封闭抗体检查阴性；男方精液常规检查正常及抗精子抗体（AsAb）、支原体、衣原体及淋球菌均阴性。另外男女双方无其他内科合并症。

三、淋巴细胞主动免疫治疗

治疗前丈夫或无关第三方供体血液检查肝肾功能、血脂、乙肝、丙肝、梅毒、抗人类免疫缺限病毒（HIV）检测均正常。治疗时抽取供体肘静脉血20ml，用适量乙二胺甲四酸（EDTA）抗凝，无菌条件下用淋巴细胞分离液（天津灏洋生物有限公司）提取淋巴细胞，生理盐水洗涤3次，加1ml生理盐水稀释，于患者前臂内侧皮内注射，注射6个点，活细胞数为20～29×106个／ml，30min后观察局部有无红肿水泡、血肿等反应。每3周注射1次，4次为一个疗程，1疗程后2周复查封闭抗体。如果转阳性，可以计划妊娠；如未转阳，则需继续第二疗程治疗，疗程结束后2周再次复查封闭抗体，如果转阳性，嘱尽早妊娠。所有确诊妊娠者，孕5周后又开始进行巩固加强治疗，每2周一次，持续治疗至孕16周。

四、辅助治疗

确诊妊娠者，予以“地屈孕酮10mg bid”保胎治疗至12周，每10d监测血β－人绒毛膜促性腺激素（β－HCG）及孕酮（P），如P＜95.4nmol／L，改“地屈孕酮20mg bid”保胎治疗。

五、疗效评定

治疗期间严密观察淋巴细胞主动免疫治疗有无副反应；如合并妊娠者，加强孕期监测，严密观察腹痛及阴道流血情况，超过12周，B超检查提示宫内活胎，视为治疗成功。自然流产或B超诊断胚胎停止发育视为治疗失败。

六、统计学分析

采用SPSS11.0统计分析软件，进行统计学分析，组间样本比较采用χ2检验，P＜0.05有统计学意义。

结 果

一、两组患者治疗结局比较

治疗组30例经淋巴细胞主动免疫治疗后，25例妊娠成功，另5例妊娠后于12周内再次发生自然流产或胚胎停止发育，治疗妊娠成功率为83.3%（25／30）；对照组25例有11例妊娠成功，另14例妊娠后于12周内再次发生自然流产或胚胎停止发育，治疗妊娠成功率为44.0%（11／25）。两组治疗成功率有显著差异（P＜0.05）（表1）。

二、患者经免疫治疗后封闭抗体阳性组与阴性组妊娠结局比较

免疫治疗后，封闭抗体阳性者成功妊娠率91.7%，封闭抗体阴性者成功妊娠率50.0%，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表1 治疗组与对照组妊娠结局比较

表2 经免疫治疗后封闭抗体阳性组与阴性组妊娠结局比较

三、不良反应

所有淋巴细胞主动免疫治疗病例均未发生不良副反应。

讨 论

正常妊娠是一个极其复杂的生理过程，是一种半同种移植过程。母胎界面的免疫活化与抑制之间的平衡调控对胚胎及胎儿的生长发育起着至关重要的作用。各种免疫因素通过有机协调形成网络，达到母胎间免疫关系的平衡，产生封闭抗体，阻断母儿之间的免疫识别和免疫反应，从而使妊娠得以维X持［5－6］。孕妇对胚胎半同种抗原反应低下，孕期将无法产生封闭抗体，这种免疫平衡遭到破坏，则导致胚胎遭受母体排斥而流产，即同种免疫所致RSA。而淋巴细胞主动免疫治疗，就是通过采用健康供方的淋巴细胞注射后，抑制母胎间的免疫排斥反应、诱导封闭抗体生成，从而保护胎儿不受母体免疫系统排斥，有效地阻止一部分患者的反复流产，保证孕妇顺利渡过既往流产孕周，使胚胎得到保护并生长发育［7－11］。

地屈孕酮是一种口服孕激素，可用于内源性孕激素不足的各种疾病，具有无雌激素、雄激素及肾上腺皮质激素作用，且具有不会导致女胎男性化的特点。地屈孕酮不产热，且对脂代谢无影响，并且无口服黄体酮胶囊保胎药物所引起的明显头晕、头痛等不适，是因黄体功能不足保胎治疗的首选药物。

本研究中治疗组利用淋巴细胞主动免疫联合地屈孕酮保胎治疗后，妊娠成功率为83.3%，未发现母儿不良反应；而对照组妊娠成功率为44.0%。两组妊娠成功率差异显著（P＜0.05），说明主动免疫治疗能提高封闭抗体阴性所致复发性流产患者的妊娠率，与文献报道相符［12，13］。并且淋巴细胞主动免疫联合地屈孕酮保胎治疗，提高了RSA的保胎成功率。本研究中还发现治疗后封闭抗体阳性者妊娠成功率为91.7%，显著高于阴性组的妊娠成功率（50.0%），说明免疫治疗后封闭抗体产生增加，妊娠成功率明显提高。

总之，临床上对于原因不明RSA患者进行封闭抗体的检查是很有必要的。对于封闭抗体阴性的RSA患者，接受淋巴细胞主动免疫治疗能提高妊娠成功机率，且无明显副作用，是一种可靠、经济的治疗方法。

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