樱桃CBF基因的克隆及序列分析

张建朋　陈新　徐丽　等

摘要：CBF（CRT/DRE-binding factor）基因是一种低温响应转录因子基因，CBF蛋白能够与很多低温相关基因的启动子结合，使其表达，从而增强植物抗冷能力。本研究利用已经公布的CBF序列的保守区设计特异引物，对樱桃砧木吉塞拉6号的cDNA进行扩增，成功获得CBF的全长序列。序列分析结果表明，其开放阅读框为723 bp，编码240个氨基酸，具有典型的AP2结构域及CBF特有的两段短肽序列。氨基酸序列同源性分析表明，该CBF与蔷薇科植物同源性较高，与其他科属植物同源性较差。

关键词：樱桃；CBF基因；克隆；序列分析

中图分类号：S662.503.4文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）10-0012-04

3结论

植物CBF/DREB类基因在非生物逆境响应

过程中具有重要功能。本研究成功克隆了樱桃砧木吉塞拉6号CBF基因的全长，并对其进行序列和遗传进化分析。该试验结果为进一步研究樱桃CBF基因的功能及冷诱导途径奠定了基础，也为该种樱桃的抗寒能力研究和抗冷系育种提供了理论依据。

参考文献：

[1]孔旭.中国果树栽培学[M]. 北京： 农业出版社，1987： 558-559.

[2]俞德浚.落叶果树分类学[M].上海：上海科学技术出版社，1984：114-125.

[3]于亚军，代汉萍，李宝江，等. 世界樱桃育种进展[J]. 果树学报，2003，20（2）：135-139.

[4]王洋， 胡吉吉， 王崇英. 拟南芥CBF/DREB 途径的研究进展及其在植物基因工程中的应用[J]. 生物物理学报， 2007，23（2）： 101-108.

[5]郭喜英，韦正乙，邢少辰，等.转录激活因子CBF与植物的抗胁迫能力[J].分子植物育种，2006，4（3）：419-424.

[6]陈新，王贵禧，梁丽松，等. 平榛冷适应相关基因CBF的克隆及时空表达特性分析[J]. 林业科学，2012，48（1）：167-172.

[7]张建朋，张士刚，陈新，等.麻核桃CBF基因的克隆与生物信息学分析[J].山东农业科学，2013，45（11）：7-11.

[8]Champ K I，Febres V J，Moore B D. The role of CBF transcriptional activators in two Citrus species （Poncirus and Citrus） with contrasting levels of freezing tolerance[J]. Physiologia Plantarum，2007，129（3）：529-541.

[9]Benedict C，Skinner J S，Meng R，et al. The CBF1-dependent low temperature signalling pathway，regulon and increase in freeze tolerance are conserved in Populus spp. [J]. Plant Cell Environ.， 2006，29（7）：1259-1272.

[10]Gilmour S J，Zarka D G，Stockinger E J，et al. Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold-induced COR gene expression[J]. The Plant Journal，1998，16（4）：433-442.

[11]Okamuo J K，Caster B，Villarroel R，et al. The AP2 domain of APETALA2 defines a large new family of DNA binding proteins in Arabidopsis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1997，94（13）：7076-7081.

[12]李利斌，刘立锋，王殿峰，等.大白菜CBF4基因的克隆和遗传进化分析[J]. 山东农业科学，2009（4）：1-4.

[13]Jaglo-Ottosen K R，Kleff S，Amundsen K L，et al. Components of the Arabidopsis C-repeat /dehydration -responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in Brassica napus and other plant species[J]. Plant Physiology，2001，127（3）：910-917.

摘要：CBF（CRT/DRE-binding factor）基因是一种低温响应转录因子基因，CBF蛋白能够与很多低温相关基因的启动子结合，使其表达，从而增强植物抗冷能力。本研究利用已经公布的CBF序列的保守区设计特异引物，对樱桃砧木吉塞拉6号的cDNA进行扩增，成功获得CBF的全长序列。序列分析结果表明，其开放阅读框为723 bp，编码240个氨基酸，具有典型的AP2结构域及CBF特有的两段短肽序列。氨基酸序列同源性分析表明，该CBF与蔷薇科植物同源性较高，与其他科属植物同源性较差。

关键词：樱桃；CBF基因；克隆；序列分析

中图分类号：S662.503.4文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）10-0012-04

3结论

植物CBF/DREB类基因在非生物逆境响应

过程中具有重要功能。本研究成功克隆了樱桃砧木吉塞拉6号CBF基因的全长，并对其进行序列和遗传进化分析。该试验结果为进一步研究樱桃CBF基因的功能及冷诱导途径奠定了基础，也为该种樱桃的抗寒能力研究和抗冷系育种提供了理论依据。

参考文献：

[1]孔旭.中国果树栽培学[M]. 北京： 农业出版社，1987： 558-559.

[2]俞德浚.落叶果树分类学[M].上海：上海科学技术出版社，1984：114-125.

[3]于亚军，代汉萍，李宝江，等. 世界樱桃育种进展[J]. 果树学报，2003，20（2）：135-139.

[4]王洋， 胡吉吉， 王崇英. 拟南芥CBF/DREB 途径的研究进展及其在植物基因工程中的应用[J]. 生物物理学报， 2007，23（2）： 101-108.

[5]郭喜英，韦正乙，邢少辰，等.转录激活因子CBF与植物的抗胁迫能力[J].分子植物育种，2006，4（3）：419-424.

[6]陈新，王贵禧，梁丽松，等. 平榛冷适应相关基因CBF的克隆及时空表达特性分析[J]. 林业科学，2012，48（1）：167-172.

[7]张建朋，张士刚，陈新，等.麻核桃CBF基因的克隆与生物信息学分析[J].山东农业科学，2013，45（11）：7-11.

[8]Champ K I，Febres V J，Moore B D. The role of CBF transcriptional activators in two Citrus species （Poncirus and Citrus） with contrasting levels of freezing tolerance[J]. Physiologia Plantarum，2007，129（3）：529-541.

[9]Benedict C，Skinner J S，Meng R，et al. The CBF1-dependent low temperature signalling pathway，regulon and increase in freeze tolerance are conserved in Populus spp. [J]. Plant Cell Environ.， 2006，29（7）：1259-1272.

[10]Gilmour S J，Zarka D G，Stockinger E J，et al. Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold-induced COR gene expression[J]. The Plant Journal，1998，16（4）：433-442.

[11]Okamuo J K，Caster B，Villarroel R，et al. The AP2 domain of APETALA2 defines a large new family of DNA binding proteins in Arabidopsis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1997，94（13）：7076-7081.

[12]李利斌，刘立锋，王殿峰，等.大白菜CBF4基因的克隆和遗传进化分析[J]. 山东农业科学，2009（4）：1-4.

[13]Jaglo-Ottosen K R，Kleff S，Amundsen K L，et al. Components of the Arabidopsis C-repeat /dehydration -responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in Brassica napus and other plant species[J]. Plant Physiology，2001，127（3）：910-917.

摘要：CBF（CRT/DRE-binding factor）基因是一种低温响应转录因子基因，CBF蛋白能够与很多低温相关基因的启动子结合，使其表达，从而增强植物抗冷能力。本研究利用已经公布的CBF序列的保守区设计特异引物，对樱桃砧木吉塞拉6号的cDNA进行扩增，成功获得CBF的全长序列。序列分析结果表明，其开放阅读框为723 bp，编码240个氨基酸，具有典型的AP2结构域及CBF特有的两段短肽序列。氨基酸序列同源性分析表明，该CBF与蔷薇科植物同源性较高，与其他科属植物同源性较差。

关键词：樱桃；CBF基因；克隆；序列分析

中图分类号：S662.503.4文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）10-0012-04

3结论

植物CBF/DREB类基因在非生物逆境响应

过程中具有重要功能。本研究成功克隆了樱桃砧木吉塞拉6号CBF基因的全长，并对其进行序列和遗传进化分析。该试验结果为进一步研究樱桃CBF基因的功能及冷诱导途径奠定了基础，也为该种樱桃的抗寒能力研究和抗冷系育种提供了理论依据。

参考文献：

[1]孔旭.中国果树栽培学[M]. 北京： 农业出版社，1987： 558-559.

[2]俞德浚.落叶果树分类学[M].上海：上海科学技术出版社，1984：114-125.

[3]于亚军，代汉萍，李宝江，等. 世界樱桃育种进展[J]. 果树学报，2003，20（2）：135-139.

[4]王洋， 胡吉吉， 王崇英. 拟南芥CBF/DREB 途径的研究进展及其在植物基因工程中的应用[J]. 生物物理学报， 2007，23（2）： 101-108.

[5]郭喜英，韦正乙，邢少辰，等.转录激活因子CBF与植物的抗胁迫能力[J].分子植物育种，2006，4（3）：419-424.

[6]陈新，王贵禧，梁丽松，等. 平榛冷适应相关基因CBF的克隆及时空表达特性分析[J]. 林业科学，2012，48（1）：167-172.

[7]张建朋，张士刚，陈新，等.麻核桃CBF基因的克隆与生物信息学分析[J].山东农业科学，2013，45（11）：7-11.

[8]Champ K I，Febres V J，Moore B D. The role of CBF transcriptional activators in two Citrus species （Poncirus and Citrus） with contrasting levels of freezing tolerance[J]. Physiologia Plantarum，2007，129（3）：529-541.

[9]Benedict C，Skinner J S，Meng R，et al. The CBF1-dependent low temperature signalling pathway，regulon and increase in freeze tolerance are conserved in Populus spp. [J]. Plant Cell Environ.， 2006，29（7）：1259-1272.

[10]Gilmour S J，Zarka D G，Stockinger E J，et al. Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold-induced COR gene expression[J]. The Plant Journal，1998，16（4）：433-442.

[11]Okamuo J K，Caster B，Villarroel R，et al. The AP2 domain of APETALA2 defines a large new family of DNA binding proteins in Arabidopsis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1997，94（13）：7076-7081.

[12]李利斌，刘立锋，王殿峰，等.大白菜CBF4基因的克隆和遗传进化分析[J]. 山东农业科学，2009（4）：1-4.

[13]Jaglo-Ottosen K R，Kleff S，Amundsen K L，et al. Components of the Arabidopsis C-repeat /dehydration -responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in Brassica napus and other plant species[J]. Plant Physiology，2001，127（3）：910-917.