冠心病与巨细胞病毒活动性感染的相关性研究＊

李青峰，周锐峰，朱帆，钟晶，毕雷，尚鹏程，简玲，汪波，谭韬，旷喜

（1.成都市公共卫生医疗中心 610066；2.四川新健康成生物股份有限公司，成都 611731；3.四川大学华西药学院药理学系，成都 610041）

动脉粥样硬化是严重危害人类健康的常见病，其确切病因与发病机制尚未完全阐明。1985年Fabricant等用禽类疱疹病毒诱发火鸡冠状动脉粥样硬化成功后，人们逐渐开始关注巨细胞病毒与冠心病的关系。近年来国内外的研究提示，人类动脉粥样硬化发生过程中巨细胞病毒感染可能起到重要作用，但相关机制有待进一步研究。作者拟采用人血清中巨细胞病毒免疫球蛋白M 抗体HCMV－IgM 作为人巨细胞病毒活动性感染的指标，对冠心病患者、体检健康人群和其他疾病患者进行比较，探讨人巨细胞病毒活动性感染与冠心病发生发展的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2010年6月至2011年2月成都市第十人民医院、成都市传染病医院心血管内科住院和门诊患者中确诊为冠心病的患者61例（男36例，女25例）设为冠心病组，平均年龄（63.0±12.1）岁。冠心病诊断标准为典型临床表现、心电图及心肌酶谱变化或经冠状动脉造影证实冠状动脉狭窄大于50%者，排除心肌病、肝肾功能异常、各种感染性疾病及免疫性疾病。另选同期体检健康者44例（肝肾功能、血脂及心肌酶谱指标均正常）设为健康对照组，其中男22例，女22例；平均年龄（58.0±11.0）岁。选择除心血管疾病和糖尿病外的其他疾病患者48例（血糖、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶及乳酸脱氢酶指标均正常）设为其他疾病对照组，其中男30例，女18例；平均年龄（60.0±14.0）岁。各组间身高、体质量、性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 标本采集抽取患者清晨空腹静脉血3mL，其中急性心肌梗死患者在发病时立即抽血，心绞痛患者在胸痛发作期抽血。血液标本2000r／min，离心15min，然后分离血清样本置－80℃保存，当天和以后每15天均检测一批巨细胞病毒抗体。标本要求非溶血、非脂血、非污染和非黄疸。

1.3 HCMV－IgM 的检测方法采用捕获酶联免疫吸附法检测人血清中HCMV－IgM（试剂盒由德国维润赛润研发有限公司生产），严格按试剂盒说明书操作，加入类风湿因子吸附剂去除类风湿因子的干扰，酶标仪判断结果。结果判断：HCMVIgM 做定性分析，取阳性对照平均吸光度（A）值后，从评估表（厂家提供）中找到阳性对照值所属区间，从而得到阳性指标和阴性指标A值的判断范围；小于阴性指标A值为阴性，大于阳性指标A值为阳性；在大于阴性小于阳性指标A值范围区间内，除灰色区域内数值以外，其余区间内的A值均视为阴性；如检测血清A值落在灰色区间内，视为疑惑或不确定值，需要重新检测。

1.4 人员要求实验人员均为经过岗前培训且具有上岗证的专业技术人员。

1.5 统计学处理采用SPSS19.0统计学软件进行数据分析；计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验；以α＝0.05为检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

对人巨细胞病毒检测阳性率进行比较，HCMV－IgM 阳性率结果显示，冠心病组的HCMV－IgM 阳性率为8.20%，与健康对照组的阳性率（2.27%）以及其他疾病对照组的阳性率（4.17%）进行比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 冠心病组和对照组HCMV－IgM 检测结果

3 讨论

冠心病的危险因子包括了高血糖、高血脂、高血压、遗传因素、年龄及性别等［1］；但是目前这些传统的危险因子只能解释50%～70%左右的冠心病发病原因，其病因以及发病机制尚未完全明了［2］。近年来研究发现，病毒感染与动脉粥样硬化的发生关系密切，尤其是人巨细胞病毒感染越来越受到人们的重视。从Fabricant等在火鸡体内用禽类疱疹病毒诱发动脉粥样硬化模型成功以来，国内外学者针对巨细胞病毒感染与动脉粥样硬化的关系进行了大量研究。

人巨细胞病毒在成人及幼儿感染十分常见，多呈慢性持续性及潜在感染状态。大多数个体免疫功能不能彻底消灭病毒，病毒通过单核细胞和淋巴细胞播散到全身，循环系统是其主要入侵对象，造成平滑肌细胞和血液细胞感染，过度劳累和免疫低下都能使潜在的感染复发［3］。目前，大多数学者认为巨细胞病毒与动脉粥样硬化有着密切的关系。Melnick 等［4］利用聚合酶链式反应（PCR）技术检测了135例动脉粥样硬化患者的动脉活检组织中的人巨细胞病毒，阳性率为76%。陈跃峰等［5］采用PCR 检测了56例冠心病患者外周血人巨细胞病毒，结果发现冠心病组血人巨细胞病毒阳性率为58.93%，显著高于对照组（28.57%）（P＜0.01）。Eryol等［6］对179例疑似冠心患者进行人巨细胞病毒免疫球蛋白G（HCMV－IgG）的检测，仅6例无抗巨细胞病毒抗体，认为高抗体水平（≥8U／mL）的HCMV－IgG 是冠心病的危险因子（P＝0.04）。Timoteo等［7］对急性冠状动脉综合征及稳定型冠心病患者进行了HCMVIgG 检测，结果急性冠状动脉综合征患者抗体阳性率为95%，而稳定型冠心病患者为81%。这些研究都从某种程度上表明，巨细胞病毒的感染可能引发冠心病。但也有不少国内外学者持反对观点，邢美园等［2］通过meta分析方法来确定巨细胞病毒感染是否为冠心病的危险因素，共检索国内外相关文献170篇，其中符合其纳入标准的文献33篇，均为已发表文献，其结果为17篇文献表明冠心病组的巨细胞病毒阳性率高于对照组，而其他16篇文献则表明差异无统计学意义。虽然不少研究都表明巨细胞病毒感染与冠心病可能存在相关性，但基本都是从DNA 或者IgG 方向进行研究。血清HCMV－IgG 是人巨细胞病毒既往感染的标志，而HCMV－IgM 是原发性或活动性感染的标志，一般在病毒感染后3d特异免疫球蛋白M 即可开始上升，90d后消失，检测免疫球蛋白M 对原发性或活动性感染所致冠心病较免疫球蛋白G 可能具有更为重要的意义［8］。然而，从巨细胞病毒原发性或活动性感染方向出发研究其与冠心病的相关性的文章较少，标本数量也较少，并且缺乏前瞻性的研究。因此，本文从巨细胞病毒近期活动性感染的角度来研究冠心病的发生发展，对冠心病的临床研究起一个补充的作用。

本研究设置了冠心病组，健康对照组及其他疾病对照组（除外心血管疾病和糖尿病），结果表明，冠心病组HCMV－Ig阳性率略高于其他两个对照组，但是分别与其他两个对照组比较HCMV－Ig阳性率，差异均无统计学意义（P＞0.05），尚不能认为巨细胞病毒原发性或活动性感染可引起冠心病，分析其原因可能有：（1）巨细胞病毒活动性感染确实未能引起冠心病。（2）所纳入的冠心病患者在本院确诊之前就已经感染了巨细胞病毒，且由于感染时间长，体内免疫球蛋白M 已经消失或者效价很低，导致检测结果阳性率很低［9］。（3）血清HCMV－IgG 是人巨细胞病毒既往感染的标志，而HCMV－IgM 是原发性或活动性感染的标志，一般人巨细胞病毒感染后3d特异免疫球蛋白M 即可开始上升，90d后消失。而在巨细胞病毒感染初期，可能不引起冠心病的相关症状或者病理改变，所以可能较难在冠心病患者血液中检测到HCMV－IgM。（4）由于条件的限制，本研究的样本量较小，且只单独做了HCMV－IgM 的检测。从实验结果来看，虽然冠心病组与健康对照组及其他疾病对照组之间差异均没有统计学意义，但是冠心病组的HCMV－IgM 阳性率仍略高于两个对照组，如在条件允许的情况下，扩大样本量，可能会得出有统计学意义的结果。此外，如结合免疫球蛋白M 及DNA 检测，可进一步提高结果的说服力。

综上所述，通过对人巨细胞病毒阳性率进行比较，本实验尚不能认为冠心病与巨细胞病毒活动性感染有关，需要进一步扩大样本或采用结合其他检测方法进行验证。

［1］卓志娟，汤兰桂.冠心病患者血清同型半胱氨酸和N 端前体脑钠肽检测及意义［J］.检验医学与临床，2011，8（18）：2199－2200.

［2］邢美园，沈毅，苏开颜，等.巨细胞病毒感染与冠心病关系的汇总分析［J］.中华心血管病杂志，2004，32（4）：336－340.

［3］吴爱成.1535例育龄妇女巨细胞病毒IgG 和IgM 抗体检测分析［J］.临床和实验医学杂志，2011，10（13）：996－997.

［4］Melnick JL，Hu CZ，Burek J，et al.Cytomegalovirus DNA in arterial walls of patients with atherosclerosis［J］.J Med Virol，1994，42（2）：170－174.

［5］陈跃峰，蔡元元.冠心病患者巨细胞病毒检测结果及临床意义［J］.中国动脉硬化杂志，2000，8（2）：154－156.

［6］Eryol NK，Kilic H，Gul A，et al.Are the high levels of cytomegalovirus antibodies a determinant in the development of coronary artery disease［J］.Int Heart J，2005，46（2）：205－209.

［7］Timoteo A，Ferreira J，Paixao P，et al.Serologic markers for cytomegalovirus in acute coronary syndromes［J］.Rev Port Cardiol，2003，22（5）：619－631.

［8］陈志刚，孙海燕，岳兵，等.人巨细胞病毒感染与冠心病的相关性研究［J］.中华医院感染学杂志，2013，23（12）：2831－2833.

［9］韩卫红，李国良，王强，等.人巨细胞病毒感染与急性冠脉综合征发生的关系［J］.山东医药，2010，50（33）：13－15.