2012～2013年杭州市萧山区手足口病病原谱及临床特征分析＊

陈亮，李仪（浙江省杭州市萧山区第一人民医院检验科 311200）

手足口病（HFMD）是由多种肠道病毒（EV）引起的常见传染病，好发于婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹等症状，严重时可导致心肌炎、无菌性脑膜脑炎等并发症［1］。HFMD 常见病原体包括EV71及柯萨奇病毒（Cox）A4、A5、A16、B1、B3等，其中以EV71和CoxA16最为常见［2－3］。EV71能够引起中枢神经系统病变，在亚太地区的流行呈上升趋势；CoxA16则极易导致心肌炎、心包炎等疾病［4－6］。本研究对208例HFMD 疑似患儿实验室指标检测结果和各类临床资料进行了回顾性分析，旨在了解杭州地区HFDM 病原谱及临床特征。

1 资料与方法

1.1 一般资料2012年5月至2013年7月本院就诊的HFDM 疑似患儿208例，男116例、女92例，年龄10个月至7岁，平均（2.65±1.56）岁。

1.2 试剂和仪器 Qiagen公司QIAamp病毒RNA 小量提取试剂盒，江苏默乐生物科技有限公司荧光定量反转录聚合酶链反应法（RT－PCR）EV71、CA16及通用型EV 核酸检测试剂盒；美国ABI公司7500型PCR 扩增仪。

1.3 方法

1.3.1 标本采集208例患儿共采集标本253份，包括咽拭子标本45份、粪便标本208份。

1.3.2 RNA 提取按照试剂盒说明书的要求提取标本RNA。RNA 提取液终体积为50μL，－80℃保存备用。

1.3.3 荧光定量RT－PCR 检测荧光定量RT－PCR 反应体系：RT－PCR缓冲液12.5μL，Taq 酶0.5μL，反转录酶0.5μL，引物和探针各6.5μL，RNA 核酸提取液5μL。反应条件：45℃15min，95℃2min，94℃10s、60℃10s循环40次。每批临床标本检测的同时检测试剂盒自带质控品，质控品检测结果均在控制范围内。

1.4 统计学处理采用SPSS13.0软件进行数据处理和统计学分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为比较差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同性别和年龄患儿病原体检测结果分析病原体检测结果显示，EV 检出率为83.17%（173／208），其中EV71所占比例最高［55.49%（96／173）］，其他EV 亚型及CoxA16分别占31.21%（54／173）和13.29%（23／173）。男、女性患儿EV检出率分别为81.03%（94／116）和85.87%（79／92），EV71所占比例分别为58.51%（55／94）和51.90%（41／79），CoxA16所占比例分别为11.70%（11／94）和15.19%（12／79），其他EV亚型所占比例分别为29.79%（28／94）和32.91%（26／79）；男、女性患儿EV 检出率比较差异无统计学意义（P＞0.05），但CoxA16在不同性别患儿中的所占比例均最低（P＜0.05）。5岁及其以下和5岁以上患儿EV 检出率分别为86.81%（158／182）和57.69%（15／26），EV71所占比例分别为55.70%（88／158）和33.33%（5／15），其他EV 亚型所占比例分别为30.38%（48／158）和60.00%（9／15），CoxA16所占比例分别为13.92%（22／158）和6.67%（1／15）；CoxA16在不同年龄患儿中的所占比例均最低（P＜0.05）。

2.2 不同临床症状患儿病原体检测结果分析208例EV 阳性患儿中，多数患儿出现发热症状，包括发热伴疱疹112例、发热伴呕吐36例、发热伴神经系统症状26例，其他症状34例。不同临床症状患儿RT－PCR检测结果见表1。

表1 不同临床症状患儿RT－PCR检测结果（n）

2.3 不同类型标本病原体检测结果分析208份粪便标本中，EV 检出率为72.12%（150／208），EV71所占比例最高［54.00%（81／150），P＜0.05］，CoxA16和其他EV 亚型所占比例分别为14.00%（21／150）和32.00%（48／150）。45份咽拭子标本中，EV 检出率为51.11%（23／45），EV71所占比例最高［65.22%（15／23），P＜0.05］，其他EV 亚型和CoxA16所占比例分别为26.09%（6／23）和8.70%（2／23）。粪便标本EV 检出率高于咽拭子标本（P＜0.05）。

3 讨论

HFMD 是由多种EV 引起的小儿常见传染病，常见病原体包括Cox、EV68～71型、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒等，其中以EV71和CoxA16最为常见［2－3，7］。本研究结果显示，208例HFMD 疑似患儿以EV71感染为主，其他EV 亚型（即非EV71和非CoxA16）感染所占比例高于CoxA16，并与国内其他地区的报道基本一致［8－9］，表明EV71仍是杭州地区HFMD患儿的最主要病原体，其他EV 亚型感染率则有所升高，值得密切关注。本研究结果还显示，HFMD 疑似患儿以5岁及其以下儿童为主；5岁及其以下患儿EV71检出率高于CoxA16和其他EV 亚型，而5岁以上患儿其他EV 亚型检出百分比最高；本研究中其他EV 亚型检出率高于文献［10］报道，但与文献［11］报道基本一致。

HFMD 的临床诊断主要依赖于疾病的临床症状。本研究结果表明，发热伴疱疹是HFMD 最为主要的临床症状，而EV71是引起发热伴疱疹的主要病原体，CoxA16相对较少。HFMD 病原体主要通过粪－口和（或）密切接触传播，患者咽拭子和粪便标本中均可检出EV71、CoxA16和其他EV 亚型。Ooi等［12］的研究表明，HFMD 患者不同类型临床标本EV 检出率有着一定的差异。本研究中，HFMD 患儿咽拭子和粪便标本均检出EV，粪便标本EV71检出率高于咽拭子标本，但咽拭子和粪便标本CoxA16和其他EV 亚型检出率比较差异无统计学意义（P＞0.05），表明杭州地区HFMD 患儿EV71感染率较高，与国内相关报道存在一定差异［9－11］。

不同地区及同一地区不同年份间HFMD 发病率存在一定的差异，不同年龄HFMD 患儿、不同类型标本各种HFMD 相关病原体的检测结果也存在一定的差异。因此，需要根据HFMD 患儿的病情，采集合适类型的标本类型进行相关病毒的检测和分型。

目前尚没有可用于HFMD 治疗的特效抗病毒药物。因此，加强对HFMD 病原体的检测和分型，实现疾病的早发现、早诊断、早治疗，对于预防和控制HFMD 的流行至关重要。

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