新辅助化疗对乳腺癌激素受体ER、PR表达的影响

赵波涛 罗庆丰 高 玟 黄传生 涂 侃

应用免疫组化法检测新辅助化疗前后乳腺癌肿瘤患者标本的激素受体ER、PR表达情况，比较前后的结果是否一致，探索出手术后样本进行检测是否可行，是否可以解决活检样本的局限性，为乳腺癌手术后规范的辅助治疗作出有益的探索。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集我院2007年12月－2009年8月期间住院患者乳腺浸润性导管癌32例，患者均为女性，年龄33～68岁，平均年龄50.8岁。

1.2 方法

ER、PR表达检测采用MaxvisionTM免疫组化法，按照免疫组化试剂盒的操作说明进行。ER、PR均为工作液，具体步骤:①4 μm连续切片，裱于涂有APES的载玻片上，70℃烤片2h;② 二甲苯脱蜡，梯度酒精入水;③3%过氧化氢室温孵育30 min，消除内源性过氧化物酶;④ 抗原修复:切片浸于pH6.0柠檬酸溶液中，电饭锅中煮沸5 min，保温10 min，自然冷却;⑤PBS洗，3 min×2次;⑥ 加入ER、PR抗体，4℃冰箱12 h;⑦ 复温，PBS洗去一抗3 min×2次;⑧ 滴加Maxvision试剂，室温作用1 h;⑨ PBS洗3 min×2次;⑩DAB光镜下显色，苏木精复染，封片。光镜下观察ER、PR在乳腺癌组织中表达。阳性对照:ER、PR蛋白阳性组织片(购自中杉生物科技有限公司)，阴性对照:PBS代替一抗。

采用“FEC”(5-氟脲嘧啶，盐酸表柔比星，环磷酰胺)方案化疗1个周期，化疗结束1周内行手术治疗，确保资料的可比性。

1.3 结果判断

ER、PR阳性为细胞核有棕黄色颗粒沉着。根据着色强度及阳性细胞比例计分。①按切片中细胞染色深浅评分:无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。②根据细胞数记分:阳性细胞率＜5%为0分，5% ～25%为1分，26% ～50%为2分，51% ～75%为3分，＞76%为4分。每例积分=①×②。按积分高低分为:0分为阴性(－)，1～4分为弱阳性(+)，5～9分为中等阳性(++)，9～12分为强阳性(+++)。

1.4 统计学处理

应用SPSS 16.0统计软件进行配对资料χ2检验分析。

2 结果

32例乳腺浸润性导管癌患者新辅助化疗前、后ER、PR检测结果完全相同:5例不表达ER，8例ER+，12例ER++，7例 ER+++;6例不表达 PR，7例PR+，12例PR++，7例 PR+++。同时 ER、PR阳性表达具有良好一致性(kappa值=0.54)，新辅助化疗前后ER、PR阳性表达间具有显著相关性(χ2=39.1，P=0.000，P ＜0.01，γ =0.748)，见表 1。

表1 32例乳腺浸润性导管癌中ER、PR表达相关性/例

3 讨论

内分泌治疗依据是根据乳腺癌激素受体ER、PR表达状况，研究表明ER阳性患者有效率达到50% ～60%，而ER阴性患者的有效率仅为5% ～8%;ER、PR均为阳性者其内分泌治疗的有效率为70%［1］。由此可见，ER、PR状况对乳腺癌内分泌治疗的疗效有着重要影响，值得注意的是，在判断复乳腺癌患者ER、PR的表达状况时，主要依赖于它们在原发灶中的表达状况，以往常常应用手术后的病理标本作检测，患者检测前未接受任何辅助治疗，该方法获取的组织标本大，检测的结果代表性强，检测结果准确。随着新辅助化疗为近期研究热点，新辅助化疗的疗效已得到肯定，越来越广泛的应用于临床 ，新辅助化疗患者乳腺癌激素受体ER、PR表达检测准确性在手术后的辅助治疗中具有重要意义，但目前关于新辅助化疗对于乳腺癌激素受体ER、PR的影响的研究较少。一般在采用新辅助化疗前，患者常需要治疗前乳腺肿块均经空心针活检证实为癌，该组织可作为激素受体检测的标本，但空心针活检的组织标本较少，检测的难度很大，切片细胞数目有限且代表性较局限，常常影响阳性结果的判断，并不能准确反映患者乳腺癌激素受体ER、PR表达情况。同时检测ER、PR激素表达情况非常必要，随着越来越多的乳腺癌患者接受新辅助化疗，新辅助化疗后手术的标本是否能代表该肿瘤患者的激素受体ER、PR表达情况，新辅助化疗前后该肿瘤患者标本的激素受体ER、PR表达情况是否一致，是一个值得探讨的问题。

赵玉斌等［4］研究表明新辅助化疗对乳腺癌激素受体表达的没有影响，本研究32例乳腺浸润性导管癌接受新辅助治疗前后样本标记比较结果具有完全相同，同时研究表明ER、PR受体阳性表达具有良好一致性(kappa值=0.54)，ER、PR受体阳性表达率关联性较好，采用接受新辅助化疗后的手术标本进行乳腺癌激素受体ER、PR表达的检测可行，该方法取得样本细胞含量多，最能代表患者乳腺癌激素受体表达，同时进一步证明新辅助化疗是安全有效的，不会影响患者乳腺癌激素受体表达，本研究采用32例配对样本研究，有必要进一步加大样本含量，进一步检验结果的准确性。

［1］Jimil K，Kumar K，Fatima SH，et al.Clinical Studies on Hormonal Status in Breast Cancer and its Impact on Quality of Life QOL〔J〕.J Cancer Sci and Ther，2010，1(2):225-230.

［2］李永清，王永胜，刘延冰，等.新辅助化疗对乳腺癌bcl-2、bax基因表达影响的研究〔J〕.实用癌症杂志，2006，21(3):263-265.

［3］孙迪文.新辅助化疗后乳腺癌组织中survivin表达及其与Ki-67、AI的相关性研究〔J〕.实用癌症杂志，2010，25(2):126-129.

［4］赵玉斌，张少华，张积仁，等.新辅助化疗对乳腺癌ER、PR和EphA2表达的影响及意义〔J〕.肿瘤防治研究，2010，37(4):457-460.