姜茯组合物的抗癌止呕作用

李晓玲　綦素霞　张庆　华坚　周涛　张芳

【摘要】 目的：研究茯苓与生姜组合物的抗癌止呕作用。方法：通过顺铂、硫酸铜所致水貂呕吐模型观察茯苓与生姜组合物的止呕作用；观察茯苓与生姜组合物对小鼠S180肉瘤、小鼠肝癌H22、小鼠艾氏腹水瘤的抑制作用。结果：茯苓与生姜组合物对顺铂、硫酸铜所致水貂的呕吐反应均有对抗作用，对小鼠S180肉瘤、小鼠肝癌H22、小鼠艾氏腹水瘤有明显抑制作用（P<0.01）。结论：茯苓与生姜组合物可抗癌止呕，是天然、低毒的药物。

【关键词】 茯苓与生姜组合物； 呕吐； 癌症

癌症是威胁人类健康的重大疾病，目前多以放化疗为主。呕吐是癌症放化疗中常发生的副反应。呕吐可引起脱水、电解质紊乱及代谢性酸中毒等，严重影响患者生存质量，甚至中断治疗。目前临床常用的止吐药物如抗胆碱能药、抗组胺药、抑制5羟色胺（5-HT3）类药及NK1受体拮抗药等虽有良好的止吐效果，但副作用相对较大，某些药物价格昂贵，亟待天然抗癌止呕药物的研制[1-2]。

茯苓（Poria cocos wolf）为多孔菌科真菌，茯苓的干燥菌核有利水渗湿、健脾宁心等功能，茯苓是多种方剂及中成药的原料，有“十药九茯苓”之说。现代药理学研究表明，茯苓具有抗肿瘤、调节免疫功能、抗炎等生物活性[3]。生姜以其特有的“姜辣素”被誉为“呕吐圣药”，能够对抗硫酸铜、阿朴吗啡及顺铂导致的呕吐，抑制肠道嗜铬细胞释放致吐因子5-HT3及P物质[4-5]。本文探讨茯苓与生姜组合物（以下简称姜茯组合物）的抗癌止呕作用。

1 材料与方法

1.1 动物 （1）雄性成年水貂，体重1.3～1.6 kg，由青岛特种养殖动物饲养中心提供，每只水貂单独置于75 cm×50 cm×50 cm的铁笼中。实验前自由饮食，24 h自然光照射。（2）昆明种小鼠，体重（20±2）g，由青岛市药检所实验动物中心提供。实验前自由饮食，24 h自然光照射。

1.2 试剂 （1）生姜，购于山东平度；茯苓，购于青岛众生大药房。（2）盐酸昂丹司琼（ondansetron ）注射液，奥赛康制药。（3）顺铂（cisplatin），山东齐鲁制药厂。（4）硫酸铜（copper sulfate ），上海亨达化学制品公司。

1.3 方法

1.3.1 姜茯组合物对顺铂致呕作用的研究 将水貂随机分为四组，每组6只：A组为顺铂模型对照组，B组为昂丹司琼阳性药物组，C组为姜辣素组，D组为茯苓与姜辣素的天然药物组合物组。A组给予生理盐水预处理，B组给予昂丹司琼7.5 mg/kg预处理，C组给予姜辣素10 g/kg（相当于含生药量1 g）预处理，D组给予天然药物组合物10 g/kg（相当于含生药量1 g）预处理，各组均在给药30 min后给予顺铂7.5 mg/kg，ip，观察水貂在给药后6 h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期、干呕次数和呕吐次数。

1.3.2 姜茯组合物对硫酸铜致呕作用的研究 将水貂随机分为四组，每组6只：A组为硫酸铜模型对照组，B组为昂丹司琼阳性药物组，C组为姜辣素组，D组为茯苓与姜辣素的天然药物组合物组。A组给予生理盐水预处理，B组给予昂丹司琼7.5 mg/kg预处理，C组给予姜辣素10 g/kg（相当于含生药量1 g）预处理，D组给予天然药物组合物10 g/kg（相当于含生药量1 g）预处理，各组均在给药30 min后按40 mg/kg，ig给予硫酸铜，观察水貂在给药后2 h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期、干呕次数和呕吐次数。

1.3.3 对小鼠S180肉瘤生长的抑制试验 使用传代5～7 d生长良好的乳白色腹水，以适量无菌生理盐水稀释成瘤细胞悬液，细胞数为107个/mL，每组12只，每鼠右腋窝皮下接种0.2 mL（含瘤细胞2×106个）。接种次日随机分组，阴性对照组给予0.5 mL蒸馏水；阳性药物组给予环磷酰胺20 g/（kg·d）；实验组将姜茯组合物分为200、100 mg/mL两个剂量组，每鼠灌胃0.5 mL，连续给药10 d。常规饲养，自由饮食。停药次日，小鼠全部脱颈椎处死，剥取皮下实体瘤瘤块称重，按下列公式计算肿瘤抑制率（%）：肿瘤抑制率=[对照组平均瘤重（C）-实验组平均瘤重（T）]/对照组平均瘤重（C）。

1.3.4 对小鼠肝癌H22生长的抑制试验 分组、剂量、给药方式、实验时间与S180肉瘤株相同。

1.3.5 对小鼠艾氏腹水瘤（实体瘤EAC）的抑制试验 分组、剂量、给药方式、实验时间与S180肉瘤株相同。

1.3.6 姜茯组合物急性毒性试验 昆明种小鼠30只，雌雄各半，给予姜茯组合物胶囊剂1 g/mL，每只0.8 mL，即小鼠的最大灌胃体积，采用常规的最大耐受量试验，观察其急性毒性；用药后观察连续观察14 d，记录相关数据包括小鼠活动状态、饮食、粪便、呼吸、体重及死亡情况。

1.4 统计学处理 采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以（x±s）表示，比较采用应用t检验及单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 姜茯组合物对顺铂致呕作用的影响 与对照组比较，各治疗组均能减少干呕次数和呕吐次数，延长呕吐潜伏期（P<0.01），其中姜茯组合物能够有效降低致呕率，见表1。

2.2 姜茯组合物对硫酸铜致呕作用的影响 与对照组比较，各治疗组均能减少干呕次数及呕吐次数，延长呕吐潜伏期（P<0.01），姜茯组合物组抗呕吐效果优于姜辣素组，见表2。

表1 姜茯组合物对顺铂致呕作用的影响

组别 致吐率（%） 潜伏期

（min） 干呕次数（次） 呕吐次数（次）

对照组（n=6） 100 58.3±11.3 21.2±7.8 12.1±2.3

昂丹司琼组（n=6） 33.3 124.1±11.4* 5.6±4.9* 3.6±2.1*endprint

姜辣素组（n=6） 50.0 97.3±9.1* 7.9±3.6* 6.0±2.1*

组合物组（n=6） 33.3 107.4±23.3* 5.8±2.5* 3.8±2.5*

*与对照组比较，P<0.01

表2 姜茯组合物对硫酸铜致呕作用的影响

组别 致吐率（%） 潜伏期

（min） 干呕次数（次） 呕吐次数（次）

对照组（n=6） 100 10.3±10.2 35.2±7.9 35.7±3.5

昂丹司琼组（n=6） 33.3 35.0±7.9* 11.2±6.1* 13.0±6.2*

姜辣素组（n=6） 50.0 27.9±8.9* 15.8±3.3* 16.2±6.8*

组合物组（n=6） 33.3 54.1±13.4* 12.9±5.5* 13.8±8.8*

*与对照组比较，P<0.01

2.3 姜茯组合物对S180小鼠的肿瘤抑制作用 与对照组比较，其他组均有不同程度抑制，且高剂量组对肿瘤的抑制率较高（P<0.01），见表3。

2.4 姜茯组合物对H22小鼠的肿瘤抑制作用 与对照组比较，其他组均有不同程度抑制，高剂量组对肿瘤的抑制率较高（P<0.01），见表4。

2.5 姜茯组合物对EAC小鼠的肿瘤抑制作用 与对照组比较，其他组均有不同程度抑制，高剂量组对肿瘤的抑制率较高（P<0.01），见表5。

2.6 姜茯组合物急性毒性试验 小鼠灌胃给药后行为正常，生长良好，体重增加，未见明显反应及死亡。将小鼠处死后肉眼观察各主要脏器未见异常。结果表明姜茯组合物最大剂量口服对动物无明显损害，未发现对机体产生毒性反应，安全可靠。

3 讨论

目前全球著名制药业已广泛应用雪貂模型进行催吐剂和止吐剂的研究[6]。本研究采用的国内同科动物水貂（mink）具有与人类相似的呕吐行为，免疫组化结果与雪貂的测定结果一致，对顺铂等致吐剂的反应良好，且价格便宜[7-9]。

近年来对茯苓的化学成分进行了广泛研究，发现其主要成分为茯苓多糖和三萜类化合物，其具有渗湿利尿、和胃健脾、宁心安神的功效[10]。临床应用茯苓治疗鼻咽癌、胃癌、肝癌时取得良好效果。目前普遍认为其抗肿瘤机理复杂多样，抗肿瘤作用的靶点和途径广泛，并且不同的抗肿瘤作用机制之间相互影响。主要是通过提高巨噬细胞的吞噬功能，促进免疫球蛋白形成等免疫增强作用，激活免疫监视系统来实现的。除此之外，茯苓还能直接抑制肿瘤细胞的生长。研究发现茯苓多糖有很好的抗白血病作用，与化疗药物环磷酰胺（CTX）合用后可产生协同抗癌作用[11]。仲兆金等[12]发现三萜类成分可明显抑制K562细胞（人慢性髓样白血病细胞），影响小鼠T淋巴细胞增殖。Kwonm等[13]发现茯苓三萜对肺癌、卵巢癌、皮肤癌、中枢神经癌和直肠癌等具有明显抑制活性。许津等[14]研究发现，茯苓三萜显著抑制肉瘤S180、艾氏腹水癌和白血病L1210细胞，对小鼠Lewis肺癌的转移有一定的抑制作用。于滨等[15]观察茯苓多糖与多种抗癌药物合用对小鼠移植性肿瘤的作用，发现茯苓多糖显著增强了环磷酰胺、5-FU、M25、丝裂霉素、平阳霉素、更生霉素对小鼠S180的抑制作用及平阳霉素对食管癌SGA-73的抑制作用，提高了环磷酰胺对白血病小鼠L615、L1210和长春新碱对L615的生命延长率，表明其与抗癌药合用有增效作用。徐榕等[16]发现茯苓三萜类化合物与抗癌药物合用，能促进小鼠巨噬细胞产生集落刺激因子，明显促进粒细胞增殖，引起造血细胞再生，提高由γ线照射小鼠所致的白细胞减少症的外周血白细胞水平和血小板的数量，表明茯苓可提高放、化疗的疗效。

生姜中止吐活性主要成分姜辣素可作用于5-HT3和NK1等受体，抑制肠道嗜铬细胞释放致吐因子5-HT和P物质，可对抗硫酸铜和顺铂等所致呕吐[17-18]。

本研究结果发现生姜与厚朴组合物有明显的抗癌止呕作用，为进一步研究天然、低毒、多靶点的抗呕中药提供了实验基础。

参考文献

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（收稿日期：2014-06-26） （本文编辑：蔡元元）endprint

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