咪唑斯汀治疗寻常型银屑病前后血清及皮损中可溶性细胞间粘附分子-1含量的变化

刘琬椿，熊心猜，段 茜，刘 婷，张 浩

(川北医院学院附属医院皮肤科，四川 南充 637000)

银屑病是以表皮角质形成细胞过度增殖，白细胞局部浸润为特征的慢性炎症性皮肤病。细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)是粘附分子免疫球蛋白超家族成员之一，在炎症反应部位的血管内皮有强表达，同时在角质形成细胞也有表达。已有较多研究对银屑病患者血清及皮损中ICAM-1进行了研究，显示其与银屑病的炎症、活动性及严重度有关，可作为判断药物治疗有效性的综合指标之一［1～5］。2012年3～7月，我们采用酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫组化染色检测了56例寻常型银屑病患者咪唑斯汀治疗前后血清sICAM-1及皮损中ICAM-1的变化情况，使用银屑病疾病活动严重指数(PASI)评价治疗效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年3～月在我科就诊的56例银屑病患者，男38例，女 18例，年龄17～60岁［(31.52±9.75)岁］，病程 10 月至 16 年［(10.18±2.27)年］。所有病例均符合寻常型银屑病(皮损面积占体表面积20% ～50%)诊断标准并知情同意，签署知情同意书，入选前1月未服用抗组胺药、免疫调节剂或糖皮质激素，排除患有扁平苔癣、慢性湿疹、变态反应性疾病及皮肤肿瘤。使用随机数字表法随机分为试验组和对照组各28例。两组年龄、性别、病情分级差异均无统计学意义(P＞0.05)。两组均给予卤米松软膏外擦，每日2次。试验组在此基础上给予咪唑斯汀10 mg，每日一次。疗程6周。使用PASI评价疗效。

1.2 标本采集及方法 分别在治疗前及治疗6周后抽取患者肘静脉血2 ml，离心收集血清，－80℃下保存。采用双抗体夹心ELISA法，严格按sICAM-1试剂盒(medgenix diagnostics，belgium)操作步骤进行。采用常规活检方法，对治疗前及治疗6周后的同一患者，选取皮损内缘进行取材，立即置于－80℃下保存，进行SP免疫组化染色。鼠抗人ICAM-1单克隆抗体及过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司(Zymed，USA)。恒冷箱切片机制成6～8 μm厚冰冻切片，冷丙酮固定后以5%山羊血清封闭10分钟，吸去血清，滴加ICAM-1一抗(每次均设阴性对照)，40 ℃过夜，滴加1%BSA-PBS 1︰300稀释的二抗，37℃孵育30分钟，37℃下DAB-H2O2显色15～30分钟，自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封片。以上各步骤间均用pH 7.4的PBS液冲片3次。置显微镜下观察，在胞浆或胞膜处有棕黄色或棕红色颗粒状物质沉积为阳性细胞。参照文献［1］的方法进行染色、判断。

1.3 统计学方法 所有数据应用SPSS 13.0软件包处理。计量数据检测结果呈正态分布，以均数±标准差表示，组间比较采用t检验;等级资料比较采用秩和检验;相关性分析采用Spearman秩相关。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后血清sICAM-1比较 治疗6周后，两组患者血清sICAM-1均有明显下降，且试验组下降幅度更明显，与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)，见表1。

表1 两组患者血清sICAM-1及皮损ICAM-1染色结果比较

2.2 治疗前后皮损ICAM-1比较 在真皮血管内皮细胞及角质形成细胞上均可见ICAM-1表达。治疗6周后，两组患者皮损处的ICAM-1原位表达均下调，且试验组下调更明显(试验组:Z=4.83，P＜0001;对照组:Z=3.29，P ＜0.001)，组间比较差异有统计学意义(Z=1.9，P＜0.05)，见表1。

2.3 血清sICAM-1及皮损ICAM-1与疾病活动指数(PASI)的相关性 血清 sICAM-1水平、皮损ICAM-1水平与PASI指数的相关系数分别为0.658和0.692(P＜0.05)，说明血清 sICAM-1及皮损ICAM-1均与PASI呈正相关。

2.4 不良反应 所有患者均未发生严重不良反应。可能与药物有关的不良事件:试验组出现3例嗜睡、1例口干，占14.29%;对照组出现3例皮肤红斑、瘙痒加重，均1周后消失。

3 讨论

ICAM-1又称CD54，是淋巴细胞功能相关抗原特异的配体，属于免疫球蛋白超家族的一种粘附分子，通过与淋巴细胞功能相关抗原(LFA-1)相结合，可介导一系列炎症反应，特别是起着相互间传递信息和调节细胞功能的作用，对炎症细胞向炎症部位的浸润起着非常重要的作用。它在很多疾病的发病及预后中均起重要作用，如肿瘤、自身免疫性疾病(甲亢、银屑病、皮肤黏膜淋巴结综合症、1型糖尿病、过敏性紫癜、系统性红斑狼疮等等)。咪唑斯汀是一种H1受体拮抗剂，为既有抗组织胺又有抗过敏性炎症作用的第二代新型抗组织胺药，其抗过敏机制包括［6～8］:①强效、高选择性组胺H1受体拮抗作用;②抑制活化的肥大细胞释放组胺及炎症细胞的趋化作用;③抑制变态反应时细胞间粘附分子的释放。目前已有观察咪唑斯汀治疗寻常型银屑病的报道［9，10］，但是罕有对其治疗银屑病的机制方面的研究。我们在已确定ICAM-1与银屑病炎症活动性和严重度有关的基础上，应用PASI评分对咪唑斯汀应用于银屑病治疗进行观察，并从血清和皮损中ICAM-1水平变化分析其可能作用机制。结果表明，口服咪唑斯汀配合外用卤米松软膏较单用外用制剂在减轻瘙痒、改善皮损红斑、浸润程度等方面更为有效，对应的反映炎症的指标(ICAM-1)也下降的更低，说明咪唑斯汀可用于寻常型银屑病的治疗，可降低PASI评分和缓解瘙痒等。其作用机制可能为降低血管内皮细胞及皮损处角质细胞中ICAM-1水平，进而或同时抑制白三烯、TNF-α以及中性粒细胞游走等，从而减轻炎症反应。

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