罕见B（A）与CisAB亚型家系成员血型血清学及遗传规律分析

刘乐霞，冯丽娜，赵国宏，梁俊杰，刘建岭，肖 玮，张国霞，徐闻铂（河北省沧州市中心血站质量管理科 061001）

B（A）与CisAB亚型是ABO血型中最为特殊的亚型，二者均可在A或B等位基因中出现1个或2个碱基突变，导致编码的糖基转移酶具有双重功能活性，可同时发生2种特异性糖连接的酶促反应，可同时催化A及B抗原的形成［1－2］，遗传学表现为与O型者婚配生出AB型和O型子女，给血型鉴定和配血工作带来一定的困扰。笔者对1例B（A）亚型、1例Cis－AB亚型个体分别进行了家系调查，旨在分析中国人群中B（A）、CisAB个体及其家系成员血清学表型与分子遗传学背景。

1 资料与方法

1．1 一般资料 家系1：先证者，男，72岁，回族，胃癌，ABO正反定型不符，资料报道见文献［3］，调查对象为先证者及其家系成员共4代合计17例。家系2：先证者，无偿献血者，女，48岁，汉族，已婚，正定型为AB型，反定型检出抗－A，调查对象为先证者及其家系成员共4代合计10例。

1．2 试剂 单克隆抗－A、抗－B血型定型试剂及抗－H、抗－A1、抗人球蛋白、聚凝胺、谱细胞均购自上海血液生物医药有限责任公司，人源性抗－A、抗－B，Ac、Bc、Oc、A2c及自身红细胞由本实验室制备。

1．3 方法 （1）血型血清学试验：采用单克隆和人源性抗－A、抗－B，抗－A1及ABO试剂以试管法进行常规正反定型检测，采用抗－H试剂检测红细胞（Pc）表面H抗原，以Bc作为对照细胞。吸收放散试验、血型物质检测均参照文献［4］，应用筛选细胞和一组试剂谱细胞进行抗体筛选和抗体鉴定，明确有无不规则抗体的存在。（2）基因分型及序列测定：采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性检测技术对B（A）、CisAB亚型个体进行基因分型，序列测定由上海市血液中心国家血型参比室完成，方法参照文献［5］。

2 结 果

2．1 血型血清学检测结果 家系1中B（A）亚型个体红细胞与抗－A1不发生凝集，与单克隆抗及人源性抗－A发生不同程度的弱凝集，与抗－B发生较强凝集，A抗原较正常弱很多，B抗原接近正常，血清中含有较强的不规则抗－A，可以凝集A2细胞，红细胞与抗－H反应强度不一；吸收放散试验证明先证者B抗原比正常AB型中的B抗原吸收能力弱，放散能力强，具有亚型的特点；部分个体血型物质检测为分泌型，只检出H血型物质，未检出B（A）或B、A物质。家系2中Ⅱ2、Ⅱ3个体（Cis－AB亚型）红细胞与抗－A1不发生凝集，与单克隆及人源性抗－A发生弱凝集，与抗－B发生较强凝集，A抗原较正常弱很多，B抗原接近正常，血清中含有较强的不规则抗－A，可以凝集A2细胞，Ⅰ2、Ⅲ1、Ⅳ1个体（CisAB亚型）红细胞与抗－A1不发生凝集，与单克隆及人源性抗－A发生强凝集，与抗－B发生弱凝集，B抗原较正常弱很多，A抗原接近正常，血清中含有较强的不规则抗－B，红细胞与抗－H反应增强，A抗原比正常AB型中的A抗原吸收能力弱，放散能力强；部分个体血型物质检测为分泌型，只检出A、H血型物质。具体结果见表1～2。

表1 2个家系中B（A）、CisAB亚型个体血型血清学鉴定结果

续表1 2个家系中B（A）、CisAB亚型个体血型血清学鉴定结果

表2 2个家系中B（A）、CisAB亚型个体血清学、基因型及序列测序结果

2．2 基因分型及序列测定结果 家系1共确认10例B（A）亚型，男7例、女3例，测序结果均为B等位基因在第7外显子发生640A→G单碱基突变，形成B（A）04血型；家系2共确认5例CisAB亚型，男1例、女4例，测序结果均为A等位基因在第7外显子发生467C→T、803G→C突变，形成CisAB01血型。各家系血清型表型、基因型、序列检测结果见表2，家系亚型遗传图见图1～2。

图1 家系1B（A）亚型遗传图

图2 家系2CisAB亚型遗传图

3 讨 论

CisAB亚型最早报道于1964年［6］，B（A）亚型最早报道于1985年，二者发生频率非常低，约为1／580 000～1／17 000［7］，遗传学表现为B型，血清学表现为AxB型，仅有少量A抗原和几乎正常的B抗原，血清中存在抗－A，可以和A1细胞和部分A2细胞发生凝集，H物质增多或未增多。家系1中B（A）亚型个体血型血清学检测结果基本与之相符。一般而言，Cis－AB亚型血型血清学表现为A2B3或A2BX，以A抗原为主，B抗原较弱，血清中存在较弱的抗－B，H物质增多［8］。家系2中CisAB亚型个体Ⅰ2、Ⅲ1、Ⅳ1血清学表现为A2BX，但Ⅱ2、Ⅱ3个体血清学表现为AxB型，A抗原较弱，B抗原凝集正常，血清中含有抗－A，符合B（A）亚型的血清学表现，不易与B（A）亚型鉴别，与报道不相符［8］，其中Ⅱ2、Ⅱ3个体A抗原较弱，推测是由于B基因对A基因存在抑制作用，导致血清学表现出同一家系中不同CisAB的异质性。由此可见，仅采用血型血清学检测不能区别B（A）与CisAB亚型，且二者血型血清学表现随个体、家系而异。部分ABO亚型，如AxB或ABx等，通常H抗原较弱，如果发现H抗原很强，则很可能是B（A）或Cis－AB亚型。

B（A）与CisAB血清学定型常由于正反定型结果不相符而需借助家系调查来确认，采用基因检测则可以在分子水平上提供一定的支持依据。2个家系调查结果显示，B（A）与CisAB亚型均存在一定的遗传特征：B型和A型基因位于同一条染色体上，而不是2个单独的等位基因，2个基因能同时遗传给后代，孩子可以从双亲同时遗传到A和B基因，从双亲的某一方遗传到O或B等位基因，从而导致孩子的血型血清学表现为AB型，即A和B抗原的传递呈稳定的AB顺式遗传方式，不分性别遗传，为常染色体共显性遗传。这种特殊的遗传方式导致AB型与O型个体婚配可生出AB型和O型子女，B（A）与CisAB亚型的出现补充了ABO血型经典的遗传规律，对于亲子关系鉴定具有重要的意义。B（A）血型共有B（A）01～06等位基因6种，国内已报道的有 B（A）02、B（A）04、B（A）05、B（A）06等位基因，以B（A）04和B（A）02等位基因为主［9］。迄今为止，从GenBank中可查询的CisAB亚型共有4种等位基因，分别为01～04型，其中CisAB01型为第7外显子467C→T、803G→C突变。家系1中10例B（A）亚型个体均为B等位基因发生nt640A→G单碱基突变所形成的B（A）04型，单碱基错义突变引起氨基酸的改变，导致214位甲硫氨酸（Met）被缬氨酸（Val）置换，这是此家系出现B（A）04亚型个体的分子遗传学基础。家系2中5例CisAB亚型个体为A等位基因第7外显子467C→T、803G→C突变，符合CisAB01型特征。临床常用的血型血清学检测方法不能有效鉴别上述2种特殊亚型，二者的鉴别依赖于基因分型及序列测定。

B（A）与CisAB亚型个体若作为献血者漏检A或B抗原，若作为受血者漏检不规则抗－A或抗－B，均将导致急性溶血性输血反应，危及患者生命。因此，作为受血者，因血清中存在不规则抗－A、抗－B，应输注O型洗涤红细胞或尽量实现家属同型互助献血，条件允许可采用自体输血。B（A）与CisAB亚型存在特殊性，在临床配血、定型、亲子鉴定中应引起高度的重视。

（致谢：感谢上海市血液中心国家血型参比室在分子生物学鉴定中给予技术支持和帮助！）

［1］ 邓志辉．复合型ABO糖基转移酶的分子生物学与酶动力学的研究［J］．中国输血杂志，2007，20（4）：352－355．

［2］ Seto NO，Palcic MM，Compston CA，et al．Sequential interchange of four amino acids from blood group B to blood group A glycosyltransferase boosts catalytic activity and progressively modifies substrate recognition in human recombinant enzymes［J］．J Bio Chem，1997，272（22）：14133－14138．

［3］ 刘建岭，刘乐霞，肖玮，等．一个回族家系中发现8例B（A）亚型报告［J］．中国输血杂志，2010，23（7）：553－554．

［4］ 叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程［M］．3版．南京：东南大学出版社，2006：246－257．

［5］ 郭忠慧，向东，朱自严，等．罕见的CisAB与B（A）血型的基因型研究［J］．中华医学遗传学杂志，2004，21（4）：321－324．

［6］ Yamamoto F，McNeill PD，Kominato Y，et al．Molecular genetic analysis of the ABO blood group system：2．cis－AB alleles［J］．Vox Sang，1993，64（2）：120－123．

［7］ Schenkel－Brunner H．ABO system．Human blood groups chemical and biochemical basis of antigen specificity［M］．2nd ed．New York，USA：Springer Wien，2000：145－147．

［8］ Daniels G．Human blood groups［M］．Oxford，England：Blackwell Scientific Publication，2002：236－256．

［9］ 田力，范文成，姚志强，等．罕见B（A）血型的分子遗传学研究［J］．中国输血杂志，2012，25（1）：33－35．