不同产地枸杞多糖含量的比较研究

陈丽丽+++张忠山

[摘要] 目的 比较不同产地枸杞多糖的含量。方法 采用热水浸提法分别提取宁夏、浙江和四川产枸杞中的多糖成分，苯酚-硫酸法测定枸杞多糖含量。结果 浙江产枸杞多糖含量0.830%，宁夏产枸杞多糖含量0.769%，四川产枸杞多糖含量0.590%。 结论 不同产地枸杞多糖含量不同，可能与环境、采摘时间及加工过程等有关。

[关键词] 枸杞多糖；不同产地；热水浸提法；苯酚-硫酸法

[中图分类号] R917 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）26-0071-03

枸杞（Lycium chinense Mill）是双子叶植物纲茄目枸杞属植物，药用部位为其成熟果实枸杞子。抗旱能力很强，其浆果枸杞子在《神农本草经》中引为上品，是我国传统名贵中药材。枸杞作为药食同源类植物，具有补肾养肝、清热凉血及益精明目等功效[1]。它既含有碳水化合物、蛋白质、脂肪、胡萝卜素、核黄素、钙、磷、铁、锌，还含有多种维生素及玉蜀黍黄素，因而一直受到中外医学与食疗专家的高度重视。枸杞主产宁夏、河北、浙江、四川等省。枸杞多糖是从枸杞中提取而得的一种水溶性多糖，经研究表明，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、控制肿瘤生长和细胞突变、延缓衰老等的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用[2，3]，枸杞多糖对人体免疫功能低下所致的各种疾病有显著的疗效，已成为保健食品的一种重要功能性添加剂，而且显示出良好的应用前景。但有关不同产地枸杞多糖含量比较方面的研究不多。本实验选取具有地域代表性的宁夏枸杞、浙江枸杞和四川枸杞，采用热水浸提法分别对枸杞多糖进行提取，并采用苯酚-硫酸法对枸杞多糖的含量进行测定。比较三种不同产地的枸杞中多糖含量的差异，为进一步开发枸杞资源及探讨其药用价值奠定基础。

1 仪器与试药

1.1仪器

DK-S22型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；旋转蒸发器（上海申胜生物技术有限公司）；SC-101型鼓风电热恒温干燥箱（浙江省嘉兴市新滕电器厂制造）；BP-Ⅱ型药物天平（上海医用激光仪器厂）；Spectrumlab 22PC可见分光光度计（上海楞光技术有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）。

1.2试剂

无水葡萄糖（中国药品生物制品检定所）；硫酸（天津化学试剂有限公司）；无水乙醇（天津化学试剂有限公司）；枸杞（宁夏、浙江和四川）经浙江中医药大学资源与鉴定教研室陈孔荣老师鉴定为枸杞Lycium chinense Mill。

2 方法与结果

2.1溶液的制备

2.1.1供试品溶液的制备[4-6] 分别取不同产地的阴干的枸杞各20 g，剪碎，精密称取5 g，加80%乙醇适量，加热回流提取2次，每次2 h，回收乙醇，药渣加蒸馏水100 mL，95℃水浴提取3次，每次2 h，合并滤液，浓缩至10 mL，加无水乙醇至溶液乙醇体积分数80%，放置24 h。过滤取沉淀，并离心滤液，取沉淀；合并沉淀，置25 mL容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.1.2对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品50 mg，置500 mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得浓度为0.1 mg/mL的对照品溶液。

2.2 最大吸收波长的确定

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1.0 mL，置试管中，补蒸馏水至2 mL，加入1 mL 5 %苯酚溶液，摇匀，迅速加入浓硫酸5 mL，混匀，室温静置30 min待其冷却，以蒸馏水同行试剂空白，在400～600 nm波长范围内对对照品和供试品溶液分别进行扫描，结果表明两者均在490 nm处有最大吸收，故确定490 nm为测定波长。

2.3标准曲线的绘制[7-9]

分别精密移取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置15 mL比色管中，按“2.2”项下方法操作，在490 nm波长下测定吸光度，以吸光度A为纵坐标，浓度C（mg/mL）为横坐标进行线性回归，回归方程为Y=7.4486X+0.0122，R2=0.9993。表明葡萄糖在（0～0.1） mg/mL浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系。

2.4 精密度试验

精密吸取对照品溶液1 mL，置于15 mL比色管中，其余操作按“2.2”项下方法进行，测定吸光度，平行测定6次，结果RSD为1.94%，表明仪器的精密度良好。

2.5 稳定性试验

取浙江产枸杞适量，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，精密吸取1 mL置15 mL比色管中，其余操作按“2.2”项下方法进行。分别于10、20、30、40、50、60 min后测定吸光度，结果RSD为0.16 %，表明枸杞多糖1 h内吸光度稳定，故含量测定应在显色后1 h内完成。

2.6 加样回收试验

取已知多糖含量的供试品溶液6份，分别加入适量的葡萄糖对照品溶液，定容于25 mL容量瓶中，精密移取1 mL置15 mL比色管中，其余操作按“2.2”项下方法进行，测定吸光度，计算加样回收率，得回收率平均值为99.98%，RSD为4.14%。

2.7多糖的含量测定[10，11]

分别精密移取三个产地溶液各1.0 mL，蒸馏水定容于25 mL容量瓶，摇匀后各取1 mL，置于15 mL比色管中，其余操作按“2.2”项中方法进行，并在490 nm波长处于分光光度计上测定吸光度，由回归方程计算多糖含量。

3讨论

枸杞多糖是一种易溶于热水、稀酸和稀碱溶液并能被乙醇、丙酮等有机溶剂析出的蛋白多糖，其提取的方法有热水浸提、酸浸提和碱浸提等[12]，但酸性或碱性条件易引起糖苷键断裂，因此，大多采用热水浸提法。水是强极性溶剂，对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全，且此方法提取设备简单、成本低、易操作。endprint

枸杞多糖因其强大的功能活性备受国内外学者的关注，其提取技术已成为中医药、保健食品等领域的研究热点。枸杞多糖的提取也由传统的提取技术发展为超声波、微波、生物酶、发酵等辅助提取技术，但各自仍存在一些问题。此外，枸杞多糖的提取新技术主要停留在实验室研究阶段，尚需加大研究力度扩大规模到工业化生产。随着问题的提出与新技术的不断成熟以及多学科的交叉发展，相信枸杞多糖的提取技术必将取得长足的发展。

苯酚-硫酸法是测定多糖的常用方法，利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。此方法简单、灵敏度高，重复性好，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定时间长。但影响该法显色的因素较多，对不同多糖物质，其最佳显色条件不同。苯酚-硫酸法测定结果更为准确合理，可考虑作为枸杞子中多糖含量测定的首选方法。

现代药理研究表明，枸杞多糖是枸杞的主要有效成分之一，因此通过枸杞多糖含量检测可以对枸杞质量进行评价。本实验结果表明，药用植物有效成分的形成、转化与积累，受着环境条件的影响。不同产地枸杞中所含多糖含量略有差异，其中浙江枸杞多糖含量为0.830%，宁夏枸杞多糖含量为0.769%，四川枸杞多糖含量为0.590%。其原因可能与收获时间、干燥方法、贮藏方法、温度、光照、地理条件、土壤条件、湿度、地貌、水质等[10]有关。环境是药用植物生长发育和产品质量形成的物质能量基础，研究环境与药用植物生产的关系，是调整药用植物生产、控制生药质量的理论基础。浙江枸杞的多糖含量最高，高于药典收载的宁夏枸杞多糖含量，从而显示浙江枸杞有较高的药用价值，但其是否优于宁夏枸杞还有待进一步研究。另一方面，药用植物体内有效成分的形成和积累，是植物代谢过程的结果，并与其生长、发育有关。因此，中药材采收季节是影响中药材质量的关键因素，如果不进行适时的采收，势必导致中药材质差效低。

[参考文献]

[1] 刘锡建，肖稳发，曹俭，等. 枸杞多糖的研究进展[J]. 上海工程技术大学学报，2008，22（4）：299-302.

[2] 田昕. 枸杞多糖的药理作用及其抗疲劳作用综述[J]. 甘肃科技，2009，25（24）：139-141.

[3] 朱彩平，张民，张声华，等. 枸杞多糖的组成及结构分析[J]. 中草药，2006，37（6）：872-874.

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[7] 赵永红，刘华. 枸杞多糖的提取工艺研究[J]. 中国食品添加剂，2008，（4）：73-78.

[8] 高洪霞，刘军海，广录，等. 枸杞多糖提取工艺的研究[J]. 食品与机械，2008，24（5）：60-62.

[9] 董琳，马小元，何志梅，等. 不同地域和采收期宁夏枸杞多糖含量比较[J]. 宁夏医学杂志，2010，32（4）：323-324.

[10] 叶玉娣. 不同等级枸杞中枸杞多糖的含量测定与比较[J]. 浙江中医杂志，2009，44（12）：921-922.

[11] 吴涛，庞坤宇，候杰，等. 枸杞多糖含量种间差异比较[J]. 北华大学学报，2013，14（5）：594-596.

[12] 李新虎. 土壤地球化学环境对宁夏枸杞品质的制约影响研究[D]. 中国地质大学，2007.

（收稿日期：2014-01-14）endprint

枸杞多糖因其强大的功能活性备受国内外学者的关注，其提取技术已成为中医药、保健食品等领域的研究热点。枸杞多糖的提取也由传统的提取技术发展为超声波、微波、生物酶、发酵等辅助提取技术，但各自仍存在一些问题。此外，枸杞多糖的提取新技术主要停留在实验室研究阶段，尚需加大研究力度扩大规模到工业化生产。随着问题的提出与新技术的不断成熟以及多学科的交叉发展，相信枸杞多糖的提取技术必将取得长足的发展。

苯酚-硫酸法是测定多糖的常用方法，利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。此方法简单、灵敏度高，重复性好，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定时间长。但影响该法显色的因素较多，对不同多糖物质，其最佳显色条件不同。苯酚-硫酸法测定结果更为准确合理，可考虑作为枸杞子中多糖含量测定的首选方法。

现代药理研究表明，枸杞多糖是枸杞的主要有效成分之一，因此通过枸杞多糖含量检测可以对枸杞质量进行评价。本实验结果表明，药用植物有效成分的形成、转化与积累，受着环境条件的影响。不同产地枸杞中所含多糖含量略有差异，其中浙江枸杞多糖含量为0.830%，宁夏枸杞多糖含量为0.769%，四川枸杞多糖含量为0.590%。其原因可能与收获时间、干燥方法、贮藏方法、温度、光照、地理条件、土壤条件、湿度、地貌、水质等[10]有关。环境是药用植物生长发育和产品质量形成的物质能量基础，研究环境与药用植物生产的关系，是调整药用植物生产、控制生药质量的理论基础。浙江枸杞的多糖含量最高，高于药典收载的宁夏枸杞多糖含量，从而显示浙江枸杞有较高的药用价值，但其是否优于宁夏枸杞还有待进一步研究。另一方面，药用植物体内有效成分的形成和积累，是植物代谢过程的结果，并与其生长、发育有关。因此，中药材采收季节是影响中药材质量的关键因素，如果不进行适时的采收，势必导致中药材质差效低。

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[12] 李新虎. 土壤地球化学环境对宁夏枸杞品质的制约影响研究[D]. 中国地质大学，2007.

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枸杞多糖因其强大的功能活性备受国内外学者的关注，其提取技术已成为中医药、保健食品等领域的研究热点。枸杞多糖的提取也由传统的提取技术发展为超声波、微波、生物酶、发酵等辅助提取技术，但各自仍存在一些问题。此外，枸杞多糖的提取新技术主要停留在实验室研究阶段，尚需加大研究力度扩大规模到工业化生产。随着问题的提出与新技术的不断成熟以及多学科的交叉发展，相信枸杞多糖的提取技术必将取得长足的发展。

苯酚-硫酸法是测定多糖的常用方法，利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。此方法简单、灵敏度高，重复性好，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定时间长。但影响该法显色的因素较多，对不同多糖物质，其最佳显色条件不同。苯酚-硫酸法测定结果更为准确合理，可考虑作为枸杞子中多糖含量测定的首选方法。

现代药理研究表明，枸杞多糖是枸杞的主要有效成分之一，因此通过枸杞多糖含量检测可以对枸杞质量进行评价。本实验结果表明，药用植物有效成分的形成、转化与积累，受着环境条件的影响。不同产地枸杞中所含多糖含量略有差异，其中浙江枸杞多糖含量为0.830%，宁夏枸杞多糖含量为0.769%，四川枸杞多糖含量为0.590%。其原因可能与收获时间、干燥方法、贮藏方法、温度、光照、地理条件、土壤条件、湿度、地貌、水质等[10]有关。环境是药用植物生长发育和产品质量形成的物质能量基础，研究环境与药用植物生产的关系，是调整药用植物生产、控制生药质量的理论基础。浙江枸杞的多糖含量最高，高于药典收载的宁夏枸杞多糖含量，从而显示浙江枸杞有较高的药用价值，但其是否优于宁夏枸杞还有待进一步研究。另一方面，药用植物体内有效成分的形成和积累，是植物代谢过程的结果，并与其生长、发育有关。因此，中药材采收季节是影响中药材质量的关键因素，如果不进行适时的采收，势必导致中药材质差效低。

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[12] 李新虎. 土壤地球化学环境对宁夏枸杞品质的制约影响研究[D]. 中国地质大学，2007.

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