HPLC法测定复方呋喃西林滴鼻液中盐酸麻黄碱的含量

王逢春，王 敏，张瑞麟

0 引言

复方呋喃西林滴鼻液收载于2002年版《中国人民解放军医疗机构制剂规范》(下简称《规范》)，具有消炎、收缩血管的作用，主要用于急、慢性鼻炎，鼻窦炎等。按照《规范》质量标准，含量测定方法为分光光度法和旋光法，本品中盐酸麻黄碱应为标示量的0.90% ～1.10%(g/mL)［1］。但在实际工作中，不同批号制剂中的盐酸麻黄碱含量测定结果相差较大，考虑可能是制剂中其他物质对盐酸麻黄碱的紫外吸收有影响。本试验采用高效液相色谱法测定复方呋喃西林滴鼻液中盐酸麻黄碱的含量，可提高含量测定的准确度，方法简便快捷，为评价和控制复方呋喃西林滴鼻液的质量提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1200型高效液相色谱仪(包括四元泵，VWD检测器，自动进样器，ChemStation化学工作站);Mettler AE240电子天平(梅特勒公司)。

1.2 试药 盐酸麻黄碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号:171241-200506);复方呋喃西林滴鼻液(批号:130107、130108、130109)。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm);流动相:甲醇-0.05%磷酸(35∶65)(每100 mL加十二烷基磺酸钠0.1 g);流速:1.0 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:30℃。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取盐酸麻黄碱对照品10.00 mg，置于10 mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，即得对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 精密量取复方呋喃西林滴鼻液供试品1 mL，置于100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，测定，即得液相色谱图，见图1。

图1 复方呋喃西林滴鼻液HPLC色谱图

2.4 线性关系考察 精密量取混合对照品储备液0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0mL，置于10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得不同浓度的系列对照品溶液。按“2.1”项下色谱条件分别进样，测定峰面积。以盐酸麻黄碱的浓度(μg/mL)为横坐标(X)，以其峰面积积分值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。得回归方程为盐酸麻黄碱Y=6.287 X+0.735 8(r=0.999 9，n=6)。结果表明，盐酸麻黄碱在10.00～200.0 μg/mL范围内与其峰面积线性关系良好。

2.5 精密度试验 精密吸取100.0 μg/mL混合对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件，连续进样6次，测定峰面积。结果盐酸麻黄碱峰面积RSD为0.33%(n=6)，表明仪器的精密度良好。

2.6 稳定性试验 取批号为130107的供试品溶液，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件，分别在0、2、4、8、10、12 h 各进样1 次，测定峰面积。结果盐酸麻黄碱峰面积的RSD为0.75%(n=6)，表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。

2.7 重复性试验 取批号为130107的样品6份，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件，分别进样测定。结果盐酸麻黄碱的平均含量为0.96%，RSD为0.26%(n=6)，表明方法的重复性良好。

2.8 回收率试验 精密量取盐酸麻黄碱对照品，按复方呋喃西林滴鼻液处方配成80、100、120 μg/mL等3个浓度水平的样品溶液，每个浓度各分别制备3份供试品溶液，分别进样测定，记录峰面积，计算盐酸麻黄碱的含量回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=9)

2.9 样品含量测定 取批号为130107、130108、130109的3份样品，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件，分别进样测定，测定结果与《规范》中所采用的分光光度法比较，结果见表2。

表2 盐酸麻黄碱含量测定结果

3 讨论

通过比较《规范》中分光光度法与改进后的高效液相色谱法的测定结果，发现前者测定结果均偏高。分析其原因可能是因为盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱为同分异构体，紫外吸收接近，在《规范》的分光光度法测定中，很难使两者有效分离，造成盐酸麻黄碱检测含量较高。同时，其他可能存在的杂质也会使样品的吸收产生变化，从而影响分光光度法的测定结果。在高效液相色谱法中，因为盐酸麻黄碱的水溶性稍大于盐酸伪麻黄碱，故两者在保留时间上存在差异，可以达到分离检测的目的和效果。

通过对流动相的优化可以发现，采用甲醇-水或乙腈-水体系时，色谱图中盐酸麻黄碱拖尾严重，系统适应性较差。在体系中添加酸或磷酸盐缓冲液后，仍然无法得到令人满意的色谱峰型，无法进行准确的含量测定。最后通过添加离子对试剂十二烷基磺酸钠，改变色谱对化合物的分离机制后，可以克服盐酸麻黄碱色谱峰的拖尾现象，符合系统适应性的要求。

选用甲醇作为流动相体系中的有机相较乙腈更为经济，可以降低试验的运行成本。尽管甲醇的末端吸收在210 nm处，但通过在流动相中添加离子对试剂十二烷基磺酸钠后，可以显著延长盐酸麻黄碱的保留时间，避免溶剂峰对含量测定的影响。另外，通过采用流动相提前平衡色谱柱，可以减少基线的波动，保证含量测定的顺利进行。

本试验改进了样品含量测定的方法，方法简便，操作性强，能有效提高复方呋喃西林滴鼻液中盐酸麻黄碱含量测定结果的准确性。

［1］中国人民解放军总后勤部.中国人民解放军医疗机构制剂规范［M］.北京:人民军医出版社，2002:174-175.