不同药物对关节炎大鼠模型的病理学形态及血液流变学影响的观察

张 海，吴勤丽，廖旭慧，陶勇玲，欧阳露

0 引言

关节炎是指发生在关节及其周围组织的炎性疾病，常见类型有类风湿关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎、感染性关节炎及创伤性关节炎等，不同关节炎的致病因素、临床表现、治疗及转归均不一样［1］，目前针对关节炎的防控仍以早发现早治疗为指导思想，治疗延误将会造成关节软骨和骨质破坏，最终导致关节畸形，严重患者甚至会导致残废;临床治疗关节炎尚无特效药物，常用的药物有非甾体类抗炎药物、糖皮质激素、改善病情慢作用抗风湿药物等［2］。本文观察不同药物治疗关节炎的临床疗效，将雷公藤多甙和白藜芦醇应用于关节炎大鼠模型的治疗中，通过观察大鼠的病理学形态及血液流变学参数，探讨雷公藤多甙和白藜芦醇在临床治疗中的应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料 选取健康Wistar大鼠40只，雌雄各半，大鼠体质量为150～200 g，实验大鼠购于中国医学科学院实验动物研究所，动物合格证号:2012A044，白藜芦醇购自西安清乐生物科技有限公司，批号:121106，雷公藤多甙片购自浙江普洛康裕天然药物有限公司，批号:1207125，硫酸氨基葡萄糖片购自新兴同仁药业有限公司，批号:015217，每组给药量根据成人用药量进行换算，大鼠给药剂量=大鼠体质量×(成人用药量/成人体重)［3］，计算白藜芦醇给药量为 30 mg/(kg·d)，雷公藤多甙给药量为12 mg/(kg·d)，硫酸氨基葡萄糖给药量为35 mg/(kg·d);采用血流变微循环仪检测高切和低切变率下的全血黏度，采用毛细玻管黏度计检测血浆黏度，相对黏度采用综合传感法检测，聚集指数采用比浊法检测。

1.2 造模与分组 Wistar大鼠50只适应性饲养1周后，随机选取其中的10只作为正常对照组，正常对照组大鼠仅注射0.1 mL的生理盐水，其余40只大鼠在双膝关节处注射木瓜蛋白酶生理盐水注射液［4］，每次注射量为0.1 mL，2次/周，连续注射3周后即成模，40只造模大鼠继续喂养1周后，随机将其分为模型组(生理盐水)、实验组(白藜芦醇)、对照组(雷公藤多甙)及阳性药物组(硫酸氨基葡萄糖)，每组均为10只;5组大鼠分别给予不同药物，给药方式均为灌胃，实验组给予白藜芦醇30 mg/(kg·d)，对照组给予雷公藤多甙12 mg/(kg·d)，阳性药物组给予硫酸氨基葡萄糖35 mg/(kg·d)，正常对照组和模型组均给予5 mL生理盐水灌胃，连续灌胃给药1周［5］。

1.3 关节肿胀度及关节炎指数观察 分别于造模前和造模后1、2、3周测量大鼠的左后足垫厚度，关节肿胀度(%)=(造模后测量值-造模前测量值)/造模前测量值［6］。采用关节炎分数评分法评价非致炎3只肢体关节的肿胀程度，并根据以上的评价情况计算关节炎指数(AI)。关节肿胀程度共分为5级，0级表示无红肿，计1分;Ⅰ级表示趾关节处有轻微红肿，计1分;Ⅱ级表示小趾和足趾关节有明显红肿，计2分;Ⅲ级表示踝关节以下具有不同程度红肿，计3分;Ⅳ级表示全部足爪部位均发生红肿，计4分。AI值为非致炎三只肢体关节肿胀等级评分和，总分为12分［7］。

1.4 观察血液流变学参数 给药3周后，取大鼠股动脉血3～5 mL置于加了肝素的抗凝管中，采用血流变微循环仪检测血液流变学参数，具体参数包括血液粘度、血浆粘度、红细胞压积、红细胞特性指数［8］。

1.5 统计学方法 采用SPSS 16.0统计学软件对实验资料进行统计分析，计数资料组间比较采用χ2检验，计量资料组间比较采用两独立样本t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血液流变学参数比较 各组之间的比较见表1。从表1中可见，实验组血液流变学参数与对照组和模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组与阳性药物组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

表1 两组各项指标变化情况比较(±s)

表1 两组各项指标变化情况比较(±s)

注:与对照组和模型组比较，△P＜0.05;与实验组比较，*P＜0.05，#P＞0.05;与模型组和正常对照组比较，▲P＜0.05

组别 全血黏度(mPa·s)高切 低切血浆黏度(mPa·s)相对黏度(mPa·s)红细胞压积 红细胞聚集指数正常对照组 12.13±0.79* 4.95±0.54* 1.37±0.19* 1.65±0.25* 45.68±0.45* 2.59±0.14*模型组 20.65±0.63 7.33±0.26 1.91±0.15 2.92±0.17 57.49±0.38 3.96±0.18实验组 15.24±0.81△ 5.87±0.46△ 1.54±0.13△ 1.89±0.16△ 49.43±0.29△ 2.98±0.17△对照组 18.07±0.32▲ 6.51±0.27▲ 1.77±0.11▲ 2.48±0.21▲ 53.74±0.33▲ 3.42±0.24阳性药物组 14.93±0.48# 5.62±0.38# 1.52±0.16# 1.92±0.13# 48.97±0.52# 2.88±0.27#

2.2 关节肿胀度及关节炎指数比较 各组之间比较见表2。从表2中可见，实验组关节肿胀度及关节炎指数与对照组和模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组与阳性药物组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

表2 两组关节肿胀度及关节炎指数比较

3 讨论

中医理论认为，关节炎属“骨痹”、“历节病”的范畴，认为其致病因素是由于气血不足、风寒湿邪等侵入骨骼，导致血瘀经络［9］、气血运行不畅，终而使风寒湿邪毒杂至、合而为痹，中医通常将关节炎分为肝肾不足型、气血虚寒型、湿热下注型及风寒湿痹型四类［10］，并根据不同证型给予不同治疗药物。现代中医学家认为，此病的根本致病因素是正虚与外邪双重作用的结果［11］，此病的治疗关键要从综合治疗的方向出发，正虚为脾胃虚弱、气血不足，外邪为挟湿挟瘀。人体四肢关节是脾脏和阳明经所主，临床治疗要注重健脾运湿、益气养血。这些治疗方法对于改善病理学形态和血流动力学有积极意义，但对于急性发作时临床症状的改善则有一定的局限性，这也是中西医结合治疗的理论基础［12］。现代医学研究发现，关节炎患者多存在血液循环障碍的症状，这些症状可从血液流变学参数中明显观察到。正常情况下，人体血液在体内运行畅通，能够满足身体组织供氧和养分的需求，但如果血液黏度过高，身体各部位的微循环受到限制，则不能满足身体组织供氧和养分的需求，此时可能导致机体的损害。其中关节部位的血液微循环障碍在关节炎发病中扮演着重要的角色，因此通过观察血液流变学参数的变化，可得知关节供氧和养分供给情况，血液流变学参数可作为判断关节炎转归的重要指标［13］。

本文将不同药物应用于关节炎大鼠模型的治疗中，实验结果显示，白藜芦醇组与雷公藤多甙组和模型组比较，血液流变学参数改善更明显，但与正常对照组比较，其改善效果仍不足，但与阳性药物组比较差异无统计学意义，由此说明，白藜芦醇能显著降低模型大鼠的全血黏度、血浆黏度、聚集指数等指标，这一作用可增加红细胞的流动性，从而起到改善关节微循环的作用，对于改善关节软骨的营养状况、修复退变软骨等具有积极意义［14］。关节炎的发病基础是炎性反应，典型的病理特征为粒细胞、淋巴细胞和单核巨噬细胞等增高，这些炎性反应会诱发血管翳形成，破坏关节软骨和关节滑膜，最终导致关节不可逆的损伤，因此，无论是西医还是中医治疗关节炎均以抗炎性反应为治疗基础。现代药理学研究显示，白藜芦醇表现出良好的抗炎、抗菌作用，其可通过减少血小板的黏附和活性，从而达到抗炎作用，同时其还具有提高机体免疫力的功效，这些功效对于治疗关节炎均具有重要临床价值。

本文观察模型大鼠的关节肿胀度和关节炎指数的实验结果显示，白藜芦醇组大鼠与雷公藤多甙组和模型组比较，关节肿胀度改善情况及关节炎指数均更优，但与阳性药物组比较差异无统计学意义，由此说明，白藜芦醇能显著缓解关节炎的充血、肿胀等临床症状，这对于减轻患者痛苦和炎性细胞浸润具有积极意义，特别是减轻炎性细胞浸润，对于提高临床疗效和改善预后有重要作用。

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