安阳市无偿献血血液检测阳性结果分析

冀 慧 沙莹浩 河南安阳中心血站，河南省安阳市 455000； 河南安阳口腔医院

为保证受血者的安全，血站在选择ELISA试剂时一般都会选择灵敏度高的试剂，但提高灵敏度的同时也可影响到试剂的准确度。我站规定同一位献血者连续三次实验室检测为阳性则将被取消献血资格，同时血站在向献血者进行结果反馈时也是以实验室检测结果为准。其中因试剂原因导致的假阳性结果不仅影响到献血者的招募而且还增加了与献血者产生纠纷的可能。经统计我站因实验室阳性而报废的血制品占总报废率的73.5%。在血液资源有限的前提下如何从多方面减少实验室阳性结果产生的报废已成为我站近几年较为突出的一项工作。现将我站647例实验室阳性血液标本进行统计分析，为我站科学合理地开展献血工作提供一定的数据支持。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2013年8－12月安阳市中心血站无偿献血ALT、HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒阳性标本647例。双试剂灰区，单试剂阳性＋单试剂灰区，双试剂阳性，ALT单试剂阳性数值≥40U／L为检验科实验室阳性血液报告标准。154例HBsAg、抗－HCV实验室阳性血液标本PCR检测结果。

1.2 仪器与试剂 STAR全自动加样器，FAME24／20全自动酶免系统（瑞士Hamilton），AU400全自动生化分析仪（日本奥林巴斯），MX3000R荧光定量PCR仪（美国STRATAGENE）。ALT试剂（北京倍肯、上海科华），HBsAg试剂（上海科华、珠海丽珠），抗－HCV试剂（北京科卫、珠海丽珠），抗－HIV试剂（法国BIO－RAD），梅毒试剂（上海科华、珠海丽珠），乙肝病毒核酸扩增荧光定量试剂（深圳达安），丙肝病毒核酸扩增荧光定量试剂（深圳达安）。所用试剂均为中国生物制品鉴定所鉴定合格的产品，在有效期内使用。

1.3 检测方法 按《全血及成分血质量要求GB18469－2012》［1］进行实验室检查，ALT采用1种试剂（速率法）进行检测，HBsAg、抗－HCV、抗－HIV、梅毒采用2种不同生产厂家ELISA试剂检测，乙肝病毒、丙肝病毒采用1种试剂检测病毒核酸，所有试剂均按照使用说明书操作。

2 结果

647例无偿献血实验室阳性标本中ALT阳性率最高，占总阳性率的63.5%，HBsAg、抗－HCV阳性率是血液报废的第二大原因，占总阳性率的23.8%，梅毒报废率是血液报废的第三大原因，占总阳性率的9.0%，见表1。HBsAg、抗－HCV阳性血灰区报废率分别占57.5%、55.2%，见表2。HBsAg灰区标本核酸病毒检出率仅3.7%，抗－HCV灰区标本核酸病毒检出率仅3.2%，见表3。

表1 647例实验室阳性血液标本报废率

表2 ELISA实验室阳性血液标本检出率

表3 154例HBsAg、抗－HCV ELISA标本核酸阳性检出率

3 讨论

从表1可以看出因ALT高而报废的血液是我站目前血液报废的首要因素。随着无偿献血工作的深入开展，我站对ALT的检查已日趋规范，初筛统一采用干式生化法，实验室统一采用速率法，速率法复检阳性血液按报废处理。以上情况表明在初筛统一采用干式化学法的情况下速率法仍存在很高的淘汰率，因影响ALT升高的因素很多，笔者认为主要应控制以下几个环节：（1）在一些生理情况下如剧烈运动、通宵加班、情绪过度紧张等，也可引起一时性的轻度升高［2］，所以应首先将献血前的健康征询工作作为初筛工作的重点，要求体检人员在对献血者进行健康征询时要给予必要的指导和沟通。（2）时刻保持干式化学仪的灵敏度，尤其是随采血车配置的干式化学仪，要求工作人员完全掌握仪器及配套试剂的使用要求及注意事项，对仪器的维护、保养工作落实到人，切实保证仪器正确有效的使用。（3）因ALT在温度＞30℃时不合格率更高［3］，所以不仅要求采血时要注意采血环境温度的控制，而且对采血后标本的运输及实验室加样过程都应全程控制温度。

HBsAg、抗－HCV阳性率是血液报废的第二大原因，占实验室总阳性率的23.8%。HBsAg、抗－HCV阳性血灰区报废率分别占57.5%、55.2%，而HBsAg灰区标本核酸病毒检出率仅3.7%，抗－HCV灰区标本核酸病毒检出率仅3.2%。

从表2、表3可以看出HBsAg、抗－HCV灰区假阳性率很高。笔者分析引起假阳性的原因可能有以下几个方面的因素：如个体差异引起的试剂本身的非特异性反应，试剂本身因方法学原因导致的灵敏度高而特异性不高，标本脂血，检验人员的操作技术和判断误差等都可造成ELISA结果的假阳性。为保证受血者的安全，血站在选择ELISA试剂时一般都会选择灵敏度高的试剂，血制品的报废以实验室ELISA检测结果为准。同时血站在向献血者反馈结果时也是以实验室ELISA结果为准，献血者往往会重新再去医院进行抽血复查，不仅重复浪费资源，还引起很多不必要的纠纷，血站还要专门组织工作人员对其进行大量的解释工作；我站还规定同一位献血者如连续三次实验室检测为阳性则将被取消献血资格，从以上数据可以看出有很多假阳性结果的献血者被血站采血系统屏蔽，无法再次献血，也给无偿献血招募工作带来一定的负面影响。PCR技术因所检测对象是病原体核酸，所以准确率高、可大大降低假阳性结果的产生，但PCR技术试剂成本高、操作繁琐［4］。因此笔者认为有必要对HBsAg、抗－HCV阳性标本进行核酸检测，以核酸检测结果对献血者进行结果反馈，不仅可提高血站实验室结果报告准确度，而且还可以减少纠纷，降低负面影响。

梅毒ELISA试剂假阳性率也较高［5，6］，血站为了保证血液安全另外又增加了灰区设置，这些因素也使得梅毒ELISA检测非特异性反应大幅升高，不仅导致血液浪费，更给献血者管理和结果反馈带来了问题，易引起抱怨和投诉。TPPA法是美国疾病预防控制中心2002年推荐的梅毒检测确认方法，亦是中国卫生部颁布的性病诊疗规范和性病治疗推荐方案中的检测方法。TPPA法检测的是梅毒的特异性抗体，具有很高的敏感性和特异性。但TPPA需用肉眼判读结果，无法保留原始记录，且经济昂贵、操作繁琐，检测时需将标本做系列稀释不利于大批量样本的筛查［7］。血站对献血者梅毒结果的反馈，更是一敏感话题，应慎之又慎，笔者建议对梅毒ELISA阳性标本进行TPPA法确认试验，并以TPPA确认结果对献血者进行结果反馈，不仅可以减少献血者的流失，又给献血者一个客观准确的结果，还可提高血站实验室结果的准确度。

［1］中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB18469－2012全血及成分血质量要求〔S〕.北京：中国标准出版社，2012.

［2］汪小华，龙子渊，王英桃.献血者ALT检测的影响因素分析〔J〕.临床输血与检验，2005，7（1）：48.

［3］吴士定，鲍红日.气温对血液中转氨酶阳性等检出率的影响〔J〕.中国卫生杂志，2000，8（10）：478－479.

［4］余加宏，王南，刘林.ELISA法抗－HVC阳性献血者分片段试剂和RT－PCR法检测结果分析〔J〕.淮海医药，2008，9（26）：403－404.

［5］尚桂芳，聂冬梅，杨立新.两种梅毒检测试剂敏感性和特异性比较〔J〕.中国输血杂志，2003，16（5）：333－334.

［6］孙文利，张献清，穆士杰，等.ELISA与TRUST法在梅毒检测中的比较〔J〕.中国输血杂志，2002，15（3）：185.

［7］夏瑞，李殊英，陈苗水.TPPA、ELISA、TRUST 3种梅毒检测方法的比较〔J〕.现代预防医学，2008，35（24）：4864－4865.