Microtest 1自动血沉仪性能评价及生物参考区间调查＊

张 云，杨 明，高 兴，刘诺涵，白巨明，李世红，赵强元（中国人民解放军海军总医院检验科，北京 100048）

红细胞沉降率（ESR）简称血沉，指在规定条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。ESR是恶性肿瘤、组织损伤、自身免疫疾病、高球蛋白血症、高胆固醇血症、炎症急性反应阶段等可靠的间接指标，具有动态观察病情疗效的实用价值，操作简便，但缺乏疾病特异性［1］。近年来，各种自动化血沉仪不断涌现，为实验室测定ESR自动化、微量化、快速化、标准化提供了基础。本文对意大利Alifax公司生产的Microtest 1全自动血沉仪性能进行评估，与国际血液标准化委员会（ICSH）推荐的魏氏法进行比较，并通过调查健康体检人群ESR值建立正常参考区间。

1 材料与方法

1.1 材料 意大利Alifax公司生产的Microtest 1自动血沉仪、国产标准化血沉管及血沉架、美国BD公司生产的乙二胺四乙酸二钾（EDTA－K2）真空抗凝采血管。

1.2 调查人群 源自本院健康体检中心，共894例，其中男486例；年龄21～75岁，平均45岁；女408例，年龄21～75岁，平均44岁。

1.3 方法

1.3.1 量值溯源性 国际血液学标准委员会（ICSH）推荐检测ESR使用魏氏法，首先根据Microtest 1血沉仪与ICSH推荐的魏氏法比对结果调整仪器参数，校准血沉仪，再用30例标本对两种方法检测结果进行相关性分析。

1.3.2 试验操作 魏氏法取全血1.6mL加入0.4mL浓度为109mmol／L的枸橼酸钠抗凝剂，使抗凝剂与全血的比例为1∶4，具体操作参考文献［2］，自动血沉仪按照仪器标准操作规程进行操作，所有标本于4h内完成检测。

1.3.3 精密度 选取高、中、低3份标本，分别重复测定10次，计算均值、标准差和变异系数（CV）。

1.3.4 生物参考区间分组的建立 894例标本按性别分为男、女两组，按年龄段分为21～30岁、＞30～40岁、＞40～50岁、＞50～60岁和大于60岁组。

1.4 统计学处理 应用SPSS16.0统计学软件和Excel 2007数据处理软件，方法学比较采用线性回归分析，配对样本采用均数t检验，生物参考区间正态分布采用计算，非正态分布使用百分位数分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 量值溯源性 30例标本检测结果经线性回归分析，Microtest 1法与魏氏法具有良好的相关性（r2＝0.985），回归方程为Y＝0.987 X＋0.682，见图1。

图1 Microtest 1与魏氏法检测结果的相关性

2.2 精密度 3份标本经重复测定10次，计算得出CV为2.83%～5.02%，见表1。

表1 Microtest 1检测ESR精密度

2.3 建立生物参考区间 用Microtest 1血沉仪检测894例表面健康人群ESR检测结果见表2。不同性别组分别经F和q检验，男组F检验总体均数方差不齐（P＜0.05），其中21～30岁、＞30～40岁、＞40～50岁组间比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；＞50～60岁组与大于60岁组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；≤50岁的前三组和大于50岁的后二组之间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。女组F检验总体方差齐（P＞0.05），各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。因此，将生物参考区间分为男21～50岁、男大于50岁、女组三组，各组ESR检测数据呈偏态分布，采用百分位数法统计生物参考区间。见表3。

表2 894例表面健康人群ESR检测结果（mm／h）

表3 Microtest 1血沉仪ESR生物参考区间（mm／h）

3 讨 论

魏氏法检测ESR受抗凝剂稀释、血沉管内径、长度、垂直度、温度、红细胞压积和不易标准化等潜在因素影响，临床应用价值存在争议。Microtest 1血沉仪采用光学毛细管停留法，将EDTA抗凝血180r／min充分混匀3min后吸入毛细管内，37℃条件下运用红外线光度计（950nm）进行检测，光电二极管将光信号转变为毛细管内红细胞的浓度相关电信号，单位时间（1 000 次／20秒）扫描得到的若干电信号描绘出一个沉降曲线，通过线性回归，将每个单位时间检测得到信号下降的均值称为“中位信号”，将这些信号积分后（“积分信号”）的平方根即可换算成与魏氏法相应值。第1个标本检测时间需3min 20 s，以后20秒检测1个样本，每个标本用血量约150μL，适宜于标本量较大的实验室。其核心要点是对毛细管中红细胞缗钱状结构形成过程进行动态分析，在20s内收集1 000 个光密度数据，在红细胞沉降过程中缗钱状形成起关键性作用［3］。

Microtest 1自动血沉仪没有相应具有溯源性校准品，依据CNAS要求应用ICSH推荐的参考方法魏氏法进行校准，试验结果显示Microtest 1自动血沉仪检测ESR与参考方法魏氏法有良好的相关性（r2＝0.985，P＞0.05），其检测不精密度（CV介于2.83%～5.02%）能够达到实验室要求，与文献［4］报道结果相似。建立正常参考区间时抽取表面健康人群894例，按照性别和年龄进行分组，结果呈偏态分布，因此，以第95%点作为正常参考区间上限，男组与女组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），女性高于男性。男21～50岁组与大于50组之间差异有统计学意义（P＜0.05），可能与年龄因素相关。本研究结果显示，男性大于50岁时，ESR随年龄增长加快，有待进一步研究。

综上所述，Microtest 1自动血沉仪与魏氏法有良好的相关性，精密度高，用血量少，生物安全危害低，操作简便，检测速度快，值得临床推广。通过建立本实验室生物参考区间可为临床提供参考依据，更好地发挥其临床诊断和疗效监测的价值。

［1］丛玉隆，尹一兵，陈瑜.检验医学高等教程［M］.人民军医出版社，2012：110－112.

［2］De Jonge N，Sewkaransing I，Slinger J，et al.Erythrocyte sedimentation rate by test－1analyzer［J］.Clin Chem，2000，46（6）：881－882.

［3］Plebani M，De Toni S，Sanzari MC，et al.The TEST 1 Automated System：A new method for measuring the erythrocyte sedimentation rate ［J］.Am J Clin Pathol，1998，110（3）：334－340.

［4］Plebani M，Piva E.Erythrocyte Sedimentation Rate：Use of Fresh Blood for Quality Control ［J］.Am J Clin Pathol，2002，117（4）：621－626.