全麻手术对血小板CD154表达和AT-Ⅲ活性的影响

王 升，张 琰，赵继全

(安阳地区医院 临床实验室 河南 安阳 455000)

全麻手术对血小板CD154表达和AT-Ⅲ活性的影响

王 升，张 琰，赵继全

(安阳地区医院 临床实验室 河南 安阳 455000)

目的：观察全身麻醉手术前后血小板数量、血小板CD154的表达、抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)活性变化，研究全麻手术与易栓症危险因素的关系。方法：选取68例普外科及骨科患者，在术前、术毕、术后2 d用流式细胞术检测血小板CD154阳性表达率、免疫浊度法检测AT-Ⅲ活性。结果：患者血小板CD154术前、术毕、术后2 d的表达分别是(5.25%±2.44%)、(5.91%±2.23%)和(6.91%±2.15%)，术前与术毕比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，术前与术后2 d结果比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；患者AT-Ⅲ术前、术毕、术后2 d检测的结果分别是(263.26±92.02)U/L、(213.69±78.45)U/L和(227.36±67.34)U/L，术前与术毕比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；术前与术后2 d比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；患者血小板术前、术毕、术后2 d分别是(108±53)×109/L、(105±20)×109/L和(114±110)×109/L，经统计学分析，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：全麻手术对患者血小板CD154阳性表达和AT-Ⅲ活性有影响，影响患者的凝血系统，可能与围手术期血栓形成相关。

全身麻醉；易栓症；CD154；抗凝血酶-Ⅲ

在临床工作中发现，患者在手术时血压降低、血流缓慢与麻醉方式密切相关，并且麻醉方式可以影响血凝系统，诱发深静脉血栓形成，成为围手术期患者的危险因素之一。对2010年10月至2012年6月骨科、普外科68例患者全身麻醉手术前后血小板数量、血小板CD154的表达、AT-Ⅲ的变化进行了检测，研究全麻手术与易栓因素的关系。现分析报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料本组选取68例患者，其中普外科患者46例，骨科患者22例。胃癌结肠癌患者36例，胃癌19例，结肠癌17例；胃癌组19例中男性12例，女性7例，年龄45～69岁，平均年龄53.8岁；结肠癌组27例中男性17例，女性10例，年龄45～70岁，平均年龄58.3岁。乳腺癌患者10例，年龄32～74岁，平均年龄57.8岁；骨科患者22例，髋关节置换手术9例，膝关节置换手术6例，腰椎间盘手术7例；男15例，女7例，年龄42～76岁，平均年龄61.5岁。本组病例伴冠心病8例，高血压病18例，伴糖尿病5例。手术时间90～180 m in。

1.2 麻醉方式气管内插管静脉复合麻醉，麻醉药物选择咪哒唑仑、丙泊酚和舒芬太尼。局麻患者采用硬膜外麻醉，药物选用利多卡因、盐酸罗哌卡因等。

1.3 检测方法

1.3.1 CD154的检测:鼠抗人CD154-FITC、IgG1-FITC，由美国beckman coulter公司提供，流式细胞仪为Coulter EPICS XL(Beckman coulter公司)，EDTA-K2抗凝管为山东奥赛特公司生产。术前1周内未服用抗凝及纤溶药。分别于麻醉诱导前、手术结束和术后第2天，采集静脉血3 ml，EDTA抗凝离心，吸上层血浆500μl于干净试管中，加入等量的5%多聚甲醛500μl混匀，15 min后加磷酸盐缓冲液(PBS)2 ml，离心(1 500 r/min，10 min)洗涤3次，然后用PBS将其调节成血小板浓度为3×109/L的血小板悬液。取3支干净的塑料试管，各管加入血小板悬液100μl，再分别加入20μl CD154及鼠IgG1，避光反应15 min，然后各管加1 m l PBS，混匀待测。上机计数2×104个血小板，血小板CD154以其阳性细胞百分率表示。

1.3.2 AT-Ⅲ的检测:AT-Ⅲ试剂由上海太阳生物制品有限公司提供，取上述EDTA抗凝血浆按试剂说明采用KHB-800全自动生化仪进行检测。

1.3.3 血小板计数:取同日的标本计数血小板。

1.4 统计分析采用SPSS 19.0统计学软件进行数据处理分析，定量资料以(±s)表示，组间比较采用t检验，定性资料的组间比较采用 χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

患者血小板CD154术前、术毕、术后2 d的表达分别是(5.25%±2.44%)、(5.91%±2.23%)、(6.91%± 2.15%)，术前与术毕比较，差异无统计学意义 (P= 0.36)；术前与术后2 d结果比较，差异有统计学意义(P=0.016)。患者AT-Ⅲ术前、术毕、术后2 d检测的结果分别是(263.26±92.02)μ/L、(213.69±78.45)μ/L、(227.36±67.34)μ/L，术前与术毕比较，差异有统计学意义(P=0.045)；术前与术后2 d比较，差异无统计学意义(P=0.19)。患者血小板术前、术毕、术后2 d分别是(108±53)×109/L、(105±20)×109/L和(114±110)×109/L，经统计学分析，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 68例患者CD154、AT-Ⅲ、血小板检测结果(±s)

表1 68例患者CD154、AT-Ⅲ、血小板检测结果(±s)

注:与术前比较，*P＞0.05；与术前比较，※P＜0.05；与术前比较，#P＜0.05；与术前比较，◇P＞0.05；与术前比较，△P＞0.05；与术前比较，▲P＞0.05。

指标 术前 手术毕 术后2 d CD154/% 5.25±2.44 5.91±2.23* 6.91±2.15※AT-Ⅲ/ (U/L) 263.26±92.02 213.69±78.45#227.36±67.34◇Platelet/ (×109/L) 108±53 105±20△ 114±110▲

3 讨论

CD154(又叫CD40配体，CD40-L、gp39或者TRAP)是Ⅱ型细胞表面膜分子，是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子超家族中的细胞因子。人CD154主要表达在CD4+T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞、单核-巨噬细胞、血小板及内皮细胞上，研究显示CD154(CD40L)可促进平滑肌细胞表达和分泌具有促凝作用的组织因子，CD154(CD40L)和CD40的相互作用可促进组织因子的表达，还可直接调节内皮的促凝活性[1]，增加了发生各种血栓病的危险性。国外学者应用流式细胞仪研究发现，急性缺血性脑血管病和脑卒中患者，血小板、T细胞、单核细胞CD154表达显著增加，血清CD154浓度明显升高[2]；CD154(CD40L)作为血小板活化的标记物，参与血栓性疾病的病理生理过程。血小板活化是血栓形成的基础，因此研究全麻手术患者围手术期的血小板活化状态，对预防围手术期全麻患者的血栓形成有重要意义。本实验对68例患者术前、术毕和术后2 d CD154检测发现，术毕血小板计数并没有增加，由于消耗的原因血小板略有减少，而血小板CD154阳性率则已经有所上升(5.25± 2.44 vs 5.91±2.23)，说明手术创伤可能是血小板激活的一个诱因。比较24例阑尾炎患者，血小板计数和CD154阳性率变化均不明显。术后2 d，血小板计数和CD154阳性率均明显升高，并且血小板CD154阳性率和术前比较有显著统计学意义，而对照组无明显变化。结果说明，全麻手术患者手术结束后，血液是处在高凝状态的；有些患者全麻手术后并发深静脉血栓或脑梗塞，与麻醉方式和手术创伤激活血小板有一定关系。

AT-Ⅲ是通过抑制凝血酶(FⅡa)、FXa等活化凝血因子的活性来调节凝血活性，维持血凝平衡。健康人体的凝血与抗凝血系统处于动态平衡状态，而血液内凝血因子及血液成分的改变，如抗凝血酶活性的高低，均会影响这种平衡，失衡后则容易出血或形成血栓。AT-Ⅲ不仅可以抑制凝血酶，而且还能抑制凝血系统中的其他蛋白酶，是血液中最重要的抗凝物质，其抗凝作用占体内总抗凝作用的50%～60%，是体内处于高凝状态的重要指标[3]。在脓毒血症、妊娠后期、肝脏疾病、DIC等患者，AT-Ⅲ缺乏，容易有血栓形成[4]。国内有实验证明血浆AT-Ⅲ活性降低是深静脉形成的危险因素。本文检测了68例患者，发现全麻手术前后AT-Ⅲ活性明显变化，术毕AT-Ⅲ活性降低，和术前比较有统计学意义；术后2 d AT-Ⅲ活性有一定程度恢复(213.69±78.45 vs 227.36±67.34)，和术前比较(263.26±92.02 vs 227.36±67.34)已无统计学意义；由此可见，术后AT-Ⅲ活性减低，术后2 d AT-Ⅲ就开始恢复，AT-Ⅲ活性变化与手术创伤有一定相关性，可能与全麻方式也有关；AT-Ⅲ活性高低与机体血凝系统的平衡密切相关，与围手术期深静脉血栓的形成相关，部分患者术后AT-Ⅲ活性持续减低，就要警惕围手术期深静脉血栓的形成。检测围手术期患者AT-Ⅲ活性，及时补充AT-Ⅲ或血浆，可以有效预防围手术期患者深静脉形成。

本文对68例全麻手术患者术前及围手术期血小板计数、血小板CD154表达和AT-Ⅲ活性进行了检测，发现全麻手术对患者血小板CD154表达和AT-Ⅲ活性有影响，这种麻醉方式可能影响患者的血凝系统，与围手术期患者的深静脉血栓形成有相关性；检测血小板CD154表达和AT-Ⅲ活性的变化，及时给予相应的活血、抗凝治疗，对预防围手术期患者因深静脉栓塞而造成的伤残具有重要的意义。

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R 446.11

10.3969/j.issn.1004-437X2014.12.013

2014-09-10)