广佛手配方颗粒的FT-IR鉴别研究

罗文汇 ，毕晓黎 ，李养学，彭丽诗 ，董玉娟

（1.广东省中医药工程技术研究院，广东 广州 510095；2.广州中医药大学，广东 广州 510405）

广佛手配方颗粒的FT-IR鉴别研究

罗文汇1，毕晓黎1，李养学1，彭丽诗2，董玉娟2

（1.广东省中医药工程技术研究院，广东 广州 510095；2.广州中医药大学，广东 广州 510405）

目的建立快速客观地鉴别广佛手配方颗粒的方法。方法对广佛手配方颗粒进行红外光谱扫描，分析、比较所得图谱，研究其共有的吸收峰峰位和峰强度。结果各批次的广佛手配方颗粒之间差异较小，都具有相同的特征吸收峰。结论利用红外光谱图分析可以直观、快速、准确地鉴别广佛手配方颗粒。

广佛手；配方颗粒；红外光谱；鉴别

广佛手为芸香科植物佛手Citrus medica L.var.sarcodactylisSwingle的干燥果实，主产于广东省德庆、高要等地，市场上主要流通品种有广佛手（产地广东）和川佛手（产地四川）。广佛手配方颗粒是以广佛手饮片为原料，采用现代制药工业的先进工艺和方法制成的颗粒，保持了原药材饮片的药性、药味和药效。具有疏肝理气、和胃止痛、燥湿化痰的功效，用于肝胃气滞、胸胁胀痛、胃脘痞满、食少呕吐、咳嗽痰多[1]。目前在佛手的研究中常用的分析方法除了传统的性状、显微、理化、薄层色谱鉴别[2-4]外，还有以橙皮苷作为指标成分定量分析[5]，并利用 HPLC[6-7]、GC-MS 等[8]方法建立指纹图谱，以及DNA测序的方法[9-10]。红外光谱法具有谱图特征性强、重现性好、需样品量小、操作简单等优点，在中药研究领域中已经获得较为广泛的应用，可以作为中药配方颗粒质量控制和真伪鉴别的依据。本文采用傅立叶变换红外光谱（FT-IR）对广佛手配方颗粒进行鉴别研究，为广佛手配方颗粒质量标准制定快速客观的鉴别方法奠定基础。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Nicolet 6700 FT-IR红外光谱仪、OMNIC8.0软件（美国Thermo Fisher公司）；YP-2压片机（上海山岳科学仪器有限公司）。

1.2 试药

广佛手配方颗粒 （批号：0603124、0703043、0707041、0711097、0801016），广佛手药材，川佛手药材由广东一方制药有限公司提供；佛手对照药材（批号：120933-200303）购于中国药品生物制品检定所；光谱纯KBr粉末（英国BDH公司）；水为Millipore超纯水；其他试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 丁酮提取物的制备

取广佛手配方颗粒1 g，加水10 mL，加热溶解，水溶液用丁酮振摇提取2次，每次15 mL，合并丁酮液，蒸干，于105℃干燥7 h，即可。

2.2 供试品的制备

分别取广佛手配方颗粒以及丙酮提取物、广佛手药材、川佛手药材等样品粉末约2 mg，加入约200 mg在120℃干燥4 h的KBr粉末，在研钵中研磨、混匀，转移至YP-2压片机模具中，30 MPa左右的压力，经1～2 min将样品压成透明的薄片[11]。压片的厚度约1～2 mm。

2.3 光谱测定

将上述样品置于FT-IR仪（DTGS检测器，分辨率4 cm-1、扫描次数32次，扫描时实时扣除水和CO2的干扰）中，测定光谱范围在4 000～400 cm-1之间的红外光谱图。

2.4 精密度试验

取同一份广佛手配方颗粒0603124的KBr片连续测定5次。采用OMNIC 8.0软件进行分析，谱图间的相关系数分别为：1.000 0、0.999 8、0.998 3、0.998 1、0.9974，RSD为0.11%，说明该仪器的精密度良好。

2.5 重复性试验

取同一份广佛手配方颗粒样品（0603124），分别精密称取6份样品，平行压片测量，采用OMNIC 8.0软件进行分析，谱图间的相关系数分别为1.000 0、0.999 4、0.998 5、0.997 8、0.997 3、0.996 7，RSD 为0.13%，说明所得红外谱图具有良好的重复性。

2.6 数据处理

平均图谱及二阶导数光谱的获得均采用美国Thermo Fisher公司OMNIC 8.0操作软件，平滑点数为13。

3 结果

3.1 各批次广佛手配方颗粒和佛手药材红外扫描图谱（见图1-14）

3.2 各批次广佛手配方颗粒和佛手药材IR主要吸收峰峰位（灵敏度：80）。见表1-2。

3.3 结果分析

3.3.1 一维红外光谱分析 通过对广佛手药材、川佛手药材、广佛手配方颗粒和广佛手配方颗粒丁酮提取物红外光谱图各峰峰形及强度进行比较，如图1-14，所列出的是不同批次颗粒的IR图谱，通过这些IR图谱，可以发现各批次均有一定的相似性。川佛手药材在2 854 cm-1上有吸收，而广佛手药材在657 cm-1上有吸收，这是区别于两种佛手的特征吸收峰，见表1。配方颗粒和药材的红外光谱图在 3 400、2 928、1 625、1 415、1 240、773、530 cm-1附近均出现共同吸收峰可以做为广佛手配方颗粒的鉴别峰；丁酮提取物红外光谱图在3 432、2 928、1 718、1 625、1 512、1 384、1 075、875 cm-1附近出现吸收峰，见表2。3 432、3 400 cm-1附近为佛手黄酮和多糖中υO-H的吸收峰；2 928 cm-1附近为亚甲基C-H反对称伸缩振动吸收峰；1 718、1 625 cm-1附近为羰基特征峰；1 512、1 415 cm-1附近为苯环C=C伸缩振动吸收峰；1 384 cm-1附近为-CH3基团面内弯曲振动产生的特征峰；1 240 cm-1附近为黄酮类成分C-O伸缩振动吸收峰；1 075 cm-1附近为糖苷类成分的吸收峰；875、773 cm-1的吸收峰为佛手化学成分所含苯环面外弯曲振动与环弯曲振动引起的吸收峰。

3.3.2 二阶导数光谱分析 图15为广佛手药材、川佛手药材和广佛手配方颗粒的二阶导数光谱图（全波段）。从整体上看，广佛手配方颗粒的二阶导数光谱图，其峰强度较小。其中3 200～2 500 cm-1波段，广佛手药材和广佛手配方颗粒峰形相似，而与川佛手药材峰形差别较大。另外，还进一步选取了1 800～500 cm-1波段进行了分析，如图16所示，在1 750、1 260、1 157、1 024、985、894、818、711、578 cm-1附近，广佛手药材、川佛手药材和广佛手配方颗粒有相似的谱峰，其中1 104 cm-1，1 024 cm-1附近的谱峰，川佛手药材的相对峰强度均增强，其余均减弱。广佛手药材相对于广佛手配方颗粒，在615 cm-1附近出现一个谱峰。 另外在 1 193、1 101、949、894、832、657、605、581、563 cm-1附近的谱峰， 广佛手配方颗粒的相对峰强度均减弱；而在1 402、695 cm-1的谱峰，其相对峰面积强度增加。

表1 各批次广佛手配方颗粒和佛手药材IR主要吸收峰峰位（cm-1）

表2各批次广佛手配方颗粒丁酮提取物IR主要吸收峰峰位（cm-1）

图15 药材与配方颗粒二阶导数光谱图

3.3.3 匹配度分析 采用OMNIC 8.0软件的谱库建立与检索对广佛手药材、川佛手药材及广佛手配方颗粒进行匹配度分析，广佛手配方颗粒与广佛手药材红外光谱的匹配度为98%以上，而广佛手配方颗粒与川佛手药材红外光谱的匹配度为85%～93%，说明红外光谱法可用于广佛手配方颗粒的鉴别。

图16 药材与配方颗粒1 800～500cm-1二阶导数光谱图

4 讨论

红外光谱法应用在中药配方颗粒方面主要根据红外光谱的峰数、峰位、峰形和峰的强度，以及某一波数吸收峰的有无，指纹区的面貌等进行判断，总的原则是比较红外光谱的全貌。本研究还对广佛手配方颗粒的丁酮提取物进行了红外光谱研究，发现丁酮能有效地除去辅料的影响，可以获得准确的检测结果，在控制广佛手配方颗粒方面有良好的效果。

红外光谱运用二阶导数谱，使一些不明显的信息突出，并可从重叠谱带中获得隐含信息，从而使数据分析和处理变得容易。红外光谱分析操作简便、快速，所需样品量较少。通过比较一维红外光谱中657 cm-1处的特征吸收峰，以及二阶导数光谱1 800～500 cm-1区域的谱峰，可以准确、快速地鉴别广佛手配方颗粒，为中药配方颗粒在不具备饮片形态情况下的真伪鉴别提供了示范性研究。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2010：167.

[2]陈 剑，张成川，赵颖飞.佛手与伪品佛手瓜的鉴别[J].海峡药学，2009，21(8)：87.

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（本文编辑 杨 瑛）

Identification of Fructus Citri Sarcodactylis Formula Granule by FT-IR

LUO Wenhui1,BI Xiaoli1,LI Yangxue1,PENG Lishi2,DONG Yujuan2
(1.Guangdong Province Engineering Technology Research Institute of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou,Gangdong 510095,China;2.Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou,Guangdong 510405,China)

ObjectiveTo establish a new identification and analysis method of Fructus Citri sarcodactylis formula granule(FCSFG).MethodsThe FCSFG was scanned by FT-IR spectra.The peak place and the strength of FCSFG were analyzed and compared.ResultsThe FT-IR spectra of the same batch FCSFG had no obvious difference,they exhibited same absorption characteristies.ConclusionsFT-IR spectra can identify Citrisarcodactylisfructusformula granule intuitively,quickly and accurately.

fructus Citri sarcodactylis formula granule;FT-IR spectra;identification

R284.1；O657.33

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2014.08.007.024.05

2013－10－16

广东省自然科学基金项目（S2011010005926）；广东省科学技术厅课题（2012A03010017）；广东省教育部科技部产学研结合项目（2012B091100183）。

罗文汇，男，硕士，副主任中药师，主要从事中药质量评价研究工作。