HPLC法测定金松止痒洗液中梣酮的含量

广西壮族自治区花红药业股份有限公司，广西 柳州 545007

HPLC法测定金松止痒洗液中梣酮的含量

陆晖刘春明黄秀花

广西壮族自治区花红药业股份有限公司，广西 柳州 545007

目的建立金松止痒洗液中梣酮的含量测定方法。方法采用HPLC法，以Zorbax XDB-C18为分析柱(4.6mm×150mm,5μm)，甲醇-水(60∶40)为流动相，流速1ml·min-1，检测波长为236nm。结果梣酮在0.02～0.25μg线性关系良好(R=0.9999),平均加样回收率为98.51%，RSD为0.91%(n=6)。结论本法准确、简便、重复性好，可作为金松止痒洗液的质量控制方法。

金松止痒洗液；梣酮；HPLC

Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for determining the content of fraxinellone in Jinsongzhiyang lotion.Methodsmethanol-water(60∶40)，the flow rate was 1.0 ml·min-1，and the deterring wavelength was 236nm.ResultsThe linear range of gaillic acid was from 0.02μg to 0.25μg(R=0.9999).The average recovery rate was 98.51%,RSD was 0.91%(n=6).ConlusionThe method was accurate and simple with high repeatablility,which can be used for the qualtity control of Jinsongzhiyang lotion.

Keywords:Jinsongzhiyang lotion；fraxinellone；HPLC

金松止痒洗液为我公司独家品种(国药准字B20020210)，由白鲜皮、千里光等9味中药组成，具有清热祛湿、杀虫止痒之功效，用于治疗成年女性外阴炎、湿热带下、外阴及皮肤瘙痒等症。白鲜皮为方中主药，梣酮为白鲜皮主要有效成分[1]，参考相关文献[1-3]白鲜皮及其制剂的含量测定方法，本文采用HPLC法测定金松止痒洗液中的梣酮。

1 仪器和试药

1.1 仪器 安捷伦1200高效液相色谱仪(美国Angilent公司)，含在线脱气机、自动进样器、四元梯度泵、UV检测器；AL104型电子分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；SB4200DT型超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。

1.2 试药 梣酮(批号：111700-200602，中国食品药品检定研究院)；甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为娃哈哈饮用纯净水；金松止痒洗液3批(批号：20140101、20140102、20140103，广西壮族自治区花红药业股份有限公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Zorbax XDB-C18色谱柱(4.6×150mm，5μm)；流动相：甲醇-水(60∶40)；检测波长：236nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样量10μl。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取梣酮对照品10.0mg，置于20ml量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，作为贮备液(梣酮浓度为0.500mg/ml)，精密量取贮备液1ml，置于50ml量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，即得梣酮浓度为0.010mg/ml的对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取本品适量，经0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.4 阴性对照品的制备 按规定制法制备缺白鲜皮的阴性样品，再按“2.3”项下制备方法制备阴性对照品溶液。

2.5 系统适应性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液按上述色谱条件进样，进样量为10μl。在本实验条件下，梣酮的保留时间约为10.0min，梣酮与其相邻峰的分离度>1.5，以梣酮计算理论塔板数不低于3000，供试品溶液与对照品溶液色谱在同一保留时间位置上有相应色谱峰，阴性对照品色谱图中无梣酮的色谱峰，阴性无干扰。

2.6 标准曲线的绘制 精密吸取梣酮对照品溶液(C=0.010mg/ml)2、5、10、15、20、25μl进样，按上述色谱条件测定色谱峰面积，以峰面积A对进样量(μg)进行线性回归计算，得线性回归方程为：A=2.878×103X-2.936，R=0.9999。梣酮在0.02～0.25μg，与峰面积线性关系良好。

2.7 精密度试验 精密吸取梣酮对照品溶液(C=0.010mg/ml)10μl，连续进样5次测定，梣酮峰面积的RSD为0.54%，表明仪器精密度良好。

2.8 稳定性试验 取供试品溶液(20140101批样品)，分别于0、4、8、24h进样10μl测定，梣酮峰面积值RSD为0.25%，表明供试品溶液在24h有良好的稳定性。

2.9 重复性试验 对同一批金松止痒洗液(20140101批)平行制备5份供试品溶液，分别进样测定，计算其梣酮含量，其RSD为1.70%，表明该方法的重复性良好。2.10 加样回收率试验 精密称取同一批金松止痒洗液(20140101批)(含梣酮10.20μg/ml)6份，各取约50ml，每份等量加入梣酮酸贮备液(C=0.500mg/ml)1.0ml，按“2.3”项下进行样品制备并测定，计算回收率。梣酮的平均回收率为98.51%，RSD为0.91%，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=6)

2.11 样品测定 对3批金松止痒洗液进行测定，每批平行测定两份，测定结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n=3)

3 讨论

金松止痒洗液为纯中药制剂，由9味中药组成，成分复杂，其对应白鲜皮的有效成分有梣酮、黄酮醇等，经预试验发现，黄酮醇含量测定杂质干扰严重，色谱分离度不理想，而梣酮含量较高，其色谱峰峰型、分离度都比较理想，故选定梣酮作为该制剂的含量测定成分。在流动相的选择方面，尝试过甲醇-水不同比例流动相，经过比较，按药典收载的白鲜皮药材梣酮含量测定方法甲醇-水(60∶40)，峰型尖锐，分离度理想，分析时间适宜，故予以采用。本文建立了金松止痒洗液中梣酮的含量测定方法，所建方法简便、准确、可行，重现性好，可用于该制剂的质量控制。

[1] 陈发奎．常用中草药有效成分含量测定[M]．北京：人民卫生出版社，1997：517．

[2] 原春兰，杨得锁．RP-HPLC测定白鲜皮中梣酮含量[J]．中国中药杂志，2006，31(12)：992-994．

[3] 国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[M]．北京：中国医药科技出版社，2010．

HPLCdeterminationoffraxinelloneinJinsongzhiyanglotion

LU Hui，LIU Chun-ming，HUANG Xiu-hua

Guangxi Huahong Pharmaceutical Co. Ltd., Liuzhou 545007,China

R927

A

1007-8517(2014)24-0013-02

2014.09.15)