清开灵胶囊抑菌作用的实验研究

安徽省第二人民医院药学部，安徽 合肥 230061

清开灵胶囊抑菌作用的实验研究

魏瑜

安徽省第二人民医院药学部，安徽 合肥 230061

目的分析清开灵胶囊的抑菌作用，为临床合理用药提供数据参考。方法采用体外与体内两种抑菌试验方法对清开灵胶囊抑菌的作用进行分析。结果清开灵胶囊内容物对标准菌株大肠杆菌44102、金黄色葡萄球菌26003以及分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌等均具有一定的体外抑菌作用；口服清开灵胶囊0.5、1.0、2.0g/kg，能对被金黄色葡萄球菌与肺炎克雷伯氏菌所感染的小鼠具有良好的保护作用。结论清开灵胶囊能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌等菌种，具有良好的抑菌效果。

清开灵胶囊；抑菌效果；试验研究

清开灵胶囊具有抗菌、退热、消炎、退黄、镇静及提高机体免疫力等作用，常用于外感风热引起的发热、咽喉肿痛、病毒性感冒及上呼吸道感染等病症[1]。清开灵胶囊的主要成分包括胆酸、猪去氧胆酸、板蓝根、珍珠母、黄芩苷等[2-3]。为了进一步探讨清开灵胶囊的抑菌作用，本试验根据清开灵胶囊的功能主治进行抑菌实验研究。

1 材料和仪器

1.1 药物 清开灵胶囊(广州白云山明兴制药有限公司提供，国药准字Z10950087，规格：2.5g/粒，用法：3次/d、2～4粒/次)，实验样品配制方法为：称取一定的清开灵胶囊内容物，置入乳钵内，并添加少量蒸馏水进行磨细，一边加水，一边研磨，配制成实验所需的各种浓度。

1.2 菌种

1.2.1 标准菌株 标准菌株为大肠杆菌44102、金黄色葡萄球菌26003，均由黑龙江省药品检验所提供，并由中国药品生物制品检定所鉴定。

1.2.2 临床分离菌株 临床分离菌株主要包括大肠杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌及乙型溶血性链球菌，均由广东南方医科大学微生物教研室提供。

1.3 试剂 伤寒、副伤寒甲、乙三联菌苗(批号：040102-1-3，长春生物制品研究所)；胃膜素(国药准字H13023865，唐山葵花药业集团生物制药有限公司)；营养肉汤培养基(批号040214，黑龙江省药品检验所)。

1.4 仪器 千分之一电子天平，由上海奕宇电子科技有限公司提供。

1.5 实验动物 昆明种小白鼠，由黑龙江省药品检验所动物室提供，合格证号为SYXK(黑)20130014。

1.6 统计学分析 本次实验研究数据用SPSS19.0统计学软件进行统计，计量资料采用t检验，计数资料用χ2检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 方法和结果

2.1 体外抑菌效果 取30g营养肉汤置于1500ml的蒸馏水进行溶解，每个试管中分别装入10ml，放在高压灭菌锅中灭菌20min，即配置成液体营养肉汤培养基，放在4℃的冰箱保存；取5g清开灵胶囊内容物加入到10ml生理盐水中，将药物的pH值调至7.4，放在高压灭菌锅中20min备用；采用接种环沾取菌种，并转移到液体培养基中，并在37℃的恒温培养箱中进行培养18h，采用标准细菌浊度计对细菌密度进行定量测定。在实验当天，必须要用生理盐水进行各个菌种10-3稀释，以作备用；取144支试管分成16组，各9支，分别添加1ml无菌培养基，在无菌状态下吸收1ml的待测药液，置于第1管中混匀，并吸出1ml加到第2管，如此类推，一直稀释到第8 管，于第8管中吸取1ml去除，第9管无添加无菌培养基作对照管。除了第8管，向其余管加入0.1ml、10-3的待测菌液并混匀，并在37℃的恒温培养箱中进行培养18h。以浊度作为指标，以不显示混浊的最高药物稀释度与无细菌生长的试管药液稀释度作为最低抑菌浓度(MIC)。结果如表1、2所示。

表1 清开灵胶囊的抑菌效果

注：“+”为有细菌生长，“-”为无细菌生长。

表2 清开灵胶囊的抑菌效果

2.2 内抑菌效果分析 制备5%胃膜素，先取10g胃膜素放在乳钵，加入生理盐水研磨，研细后加入200ml生理盐水，放在高压灭菌锅20min；于实验前1d，采用接种环沾取菌种，并转移到液体培养基中，并在37℃的恒温培养箱中进行培养18h，采用标准细菌浊度计对细菌密度进行定量测定。在实验当天，必须要用生理盐水进行各个菌种10-3稀释，以作备用；实验当天采用5% 胃膜素将金黄色葡萄球菌进行10-2稀释，并将肺炎克雷伯氏杆菌10-3稀释；最后是实验∶取小鼠160只，雌雄80只，分成8组，各20只。前4组注入10-2稀释金黄色葡萄球菌，后4组注入10-3稀释肺炎克雷伯氏杆菌，并采用5%胃膜素进行菌液稀释，并向各白鼠注射0.5ml。4组包括空白对照组、2.0g/kg组、1.0g/kg组、0.5g/kg组，给小鼠灌胃给药，剂量为20ml/kg。在小鼠腹腔感染前2d给药，连续5d。结果如表3、4所示。

表3 清开灵对两种菌种小鼠死亡率的影响

注：比较对照组，*P<0.05

表4 清开灵对两种菌种小鼠生存时间的影响

注：比较对照组，*P<0.05。

3 讨论

从本研究的表1、表2结果中可以看出，一定浓度清开灵胶囊对标准菌株大肠杆菌44102、金黄色葡萄球菌26003以及分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌等均具有一定的体外抑菌作用；而口服清开灵胶囊0.5、1.0、2.0g/kg，能对被金黄色葡萄球菌与肺炎克雷伯氏菌所感染的小鼠具有显著的抗感染效果，能有效提高小白鼠的存活率与延长其生存时间。通过综合4个表格中的结果可以得出：清开灵胶囊具有非常显著的抑菌效果。

[1] 王璐，戴敬，牛小莲．清开灵软胶囊中胆酸和猪去氧胆酸的含量测定[J]．中国药业，2013，2(12)：79-80．

[2] 笔雪艳，刘晓凤，胡畔，等．清开灵片中胆酸及栀子苷含量的高效液相色谱测定[J]．时珍国医国药，2012，23(3)：663-665．

[3] 杨立伟，刘潇潇，巩珺，等．清开灵系列品种中胆酸和猪去氧胆酸的通用检测定方法研究[J]．中国药房，2012，41(35)：3340-3342．

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1007-8517(2014)24-0008-02

2014.09.17)