老年胃癌组织HER2和AKT2的表达及其与临床病理特征的关系

谭莉莉 魏亚宁 甄江涛 王娅南 贾友超

(河北大学附属医院贵宾病房,河北 保定 071000)

近年来，分子生物学的发展使基因靶向治疗成为肿瘤治疗的新方向，现有研究结果显示，人表皮生长因子罗体2(HER2)在多种肿瘤组织中均高表达，与胃癌的发生、发展相关〔1〕，且针对HER2的靶向治疗已取得了突破性进展，HER2已经成为胃癌治疗的靶点〔2〕。丝/苏氨酸激酶2(AKT2)与多种恶性肿瘤发生、发展、生物学行为以及预后相关〔3〕。本研究采用免疫组化(IHC)法检测胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜中HER2和AKT2的表达，探讨二者与胃癌临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选用2010年8月至2012年11月我院病理科胃癌术后石蜡标本135例，其中胃癌组织102例作为胃癌组，癌旁组织33例作为癌旁组，另外选用50例正常组织作为对照组。胃癌组中，肿瘤直径≥5 cm的患者55例，<5 cm的47例；根据Lauren分型〔4〕：肠型43例，弥漫型51例，混合型8例；根据WHO国际组织学分型〔5〕：高分化癌22例，中分化17例，低分化腺癌63例；浸润程度：T1/T2级37例，T3/T4级65例；淋巴结转移65例，无转移37例；根据国际抗癌联盟(UICC)临床TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期38例，Ⅲ～Ⅳ期64例。胃癌标本来源患者活检前均未接受过放化疗与其他针对性的治疗，且标本经HE染色评判无坏死。

1.2检测试剂与方法

1.2.1检测试剂 鼠抗人HER2单克隆抗体、鼠抗人AKT2多克隆抗体SP试剂盒及AEC显色剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.2.2免疫组化染色 采用免疫组织化学SP法，取样本0.4 μm厚切片，对其实施的常规脱蜡、梯度酒精脱水等步骤遵照试剂说明书进行〔6〕。阳性对照选用已知阳性胃癌组织，以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗为阴性对照〔7〕。样本切片由两位资深病理医师采用双盲法判读。

1.3免疫组织化学染色结果判定 免疫组织化学染色阳性结果为淡黄色或者棕黄色、棕褐色颗粒，HER2阳性出现在细胞膜〔8〕，AKT2出现在细胞质和(或)细胞核。两名病理医师按半定量评分方法独立评分：先根据细胞染色强度评分，细胞无变色计0分，细胞显浅黄色计1分，细胞棕黄色计2分，细胞黄褐色计3分。再随机选取10个视野在显微镜下观察阳性细胞的百分比，取算术平均数，阳性细胞的百分比<10%计0分，10%～20%计1分，21%～50% 计2分，>50% 计 3分。两个乘积作为每例标本的积分，积分<3分为阴性，≥3分为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行χ2检验。采用Pearson进行相关性分析。

2 结 果

2.1三种组织中HER2和AKT2的表达 胃癌组、癌旁组及对照组HER2表达分别为17.65%、0.00%和0.00%，胃癌组与癌旁组、对照组相比，差异显著(χ2=9.835、6.871，均P<0.05)；三组的AKT2表达分别为74.51%、12.12%和12.00%，胃癌组与癌旁组、对照组相比，差异亦显著(χ2=12.647、8.734，均P<0.05)。癌旁组HER2、AKT2表达与对照组比较均无统计学意义(χ2=1.237、0.952，均P>0.05)。

2.2老年胃癌组织HER2、AKT2的表达与临床病理特征的关系 表1可见，在老年胃癌组织中，HER2、AKT2的表达与Lauren分型、组织分化程度、浆膜浸润深度、淋巴结转移、TNM分型均相关(P<0.05)，且AKT2的表达与肿瘤直径相关(P<0.05)。

表1 老年胃癌组织HER2、AKT2的阳性表达与临床病理特征的关系〔n(%)〕

2.3老年胃癌组织中HER2和AKT2表达的相关性分析 采用Pearson进行相关性分析，HER2和AKT2的表达正相关(r=0.762，P<0.05)。

3 讨 论

胃癌是全球死亡率仅次于肺癌的恶性肿瘤之一，严重威胁着人类的身体健康。在我国，胃癌的死亡率居于恶性肿瘤之首，但手术治疗的效果不甚理想，患者术后五年的生存率还不到30%。胃癌的发生和发展是一个多阶段、多因素的发展过程，其发生、发展与多种癌基因被激活或者抑癌基因的失活等因素相关。不少研究表明，HER2和AKT2在胃癌中均有表达〔9，10〕，且对HER2高表达的胃癌患者应用曲妥珠单抗能够使生存期延长40个月以上〔11〕，HER2有望成为一个新的基因治疗靶点〔12，13〕。HER2是一种磷酸化受体蛋白，高表达能够活化细胞信号传输系统，实现细胞转化与增殖，最终导致肿瘤细胞的增殖、分化、浸润以及转移〔14〕。AKT2是丝氨酸/苏氨酸激酶的一个亚型，主要介导人体内PI3K/AKT2信号传导通路，通过上调MMP-2，MMP-9等蛋白表达来增强肿瘤细胞的侵袭和转移，在细胞增殖与凋亡中有重要的功能〔15〕。

目前的研究成果中HER2与胃癌关系的居多，但是HER2在胃癌组织中的表达难以统一，阳性率从6%～35%，跨度非常大，而且与胃癌的临床病理特征的关系尚无定论。梁秀菊等〔16〕认为HER2的高表达与胃癌的部位、分化、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均有关。AKT2与胃癌的研究较少，但也结论相左。谈晓红等〔3〕的研究显示：AKT2在胃癌中的表达与分化程度、淋巴结转移及临床分期TNM相关；而邹绍静等〔6〕的研究表明AKT2表达与肿瘤大小、淋巴结转移、浸润深度、分化程度、Lauren分型均有关。目前研究成果的差异性可能由于样本量的抽取、检测方法及评分标准差异造成。有研究认为，HER2参与的PI3K/AKT信号通路与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制等密切相关〔13〕，二者联合检测有临床意义。

本研究这与多数文献资料研究一致，说明胃癌与HER2、AKT2表达相关。另外，本研究与众多研究成果一致，说明HER2、AKT2的表达可能与胃癌Lauren分型、组织分化程度、浆膜浸润深度、淋巴结转移、TNM分型均相关。

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14肖隆斌，杨世斌，吴文辉，等.HER2基因扩增与胃癌患者临床病理及预后相关性分析〔J〕.中华普通外科学文献，2011;5(6)：480-3.

15周忠笑，魏晰麟，姚建茄，等.AKT抑制剂SH-5对胃癌细胞系BGC-823增殖的影响〔J〕.中国老年医学杂志，2012;32(10)：2115-7.

16梁秀菊，高 明，周 云.胃癌组织EGFR，HER-2与TopoIIα的表达及临床意义〔J〕.第三军医大学学报，2010;32(22)：2443-5.