老年子宫内膜样腺癌患者癌组织中Cirpto-1、Survivin和基质金属蛋白酶-14表达及意义

魏琳琳 王 蕊 关淑梅

(辽宁医学院附属第一医院妇产科，辽宁 锦州 121001)

子宫内膜样腺癌病变进展中出现多种蛋白表达的异常。Cirpto-1作为细胞膜表达的受体可以接受多种信号刺激，是重要的癌基因生长因子，参与癌细胞增殖和转移〔1〕。Survivin是凋亡抑制基因，具有抑制肿瘤细胞凋亡和调节细胞周期的双重功能，与肿瘤的发生和发展密切相关〔2,3 〕。基质金属蛋白酶(MMP)-14是MMPs家族的重要成员，不仅可以降解细胞外基质(ECM)，还可以接受多种蛋白的调节作用，使基底膜的溶解作用增强，加速肿瘤细胞播散〔4〕。本实验探讨老年子宫内膜样腺癌患者术后组织中Cirpto-1、Survivin和MMP-14蛋白的表达及在病变进展中的价值。

1 资料和方法

1.1临床资料 2011年3月至2013年3月我院行子宫内膜样腺癌根治术老年患者113例为观察组，年龄60～82岁，中位年龄69岁。有淋巴结转移42例，无淋巴结转移71例；肿瘤最大径0.4～9 cm。选择70例子宫肌瘤或子宫脱垂后经病理证实为正常的老年人子宫内膜组织作为对照组，年龄60～80岁，中位年龄68岁。两组一般临床资料无显著差别(P<0.05)。

1.2Cirpto-1、Survivin和MMP-14的检测方法及判断标准 Cirpto-1、Survivin和MMP-14蛋白的试剂盒均购自武汉博士德生物技术公司，应用免疫组化SP法进行检测，DAB染色，均由病理科技师操作完成，严格按说明书进行，严格质量控制，努力减少误差。Cirpto-1、Survivin和MMP-14的阳性表达部位是细胞质，以出现棕黄色颗粒为阳性细胞，选择阳性细胞较为集中的区域(热点区)，每个病例选取5个高倍视野(400倍)，计数阳性细胞的总数和高倍镜下总细胞数，以阳性率≥50%定为阳性，以阳性率<50%定为阴性。

1.3统计学方法 应用SAS6.12软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1两组中Cirpto-1、Survivin和MMP-14阳性表达率的比较 观察组Cirpto-1、Survivin和MMP-14阳性表达率明显高于对照组(P<0.000 1)，见表1。

2.2观察组Cirpto-1、Survivin和MMP-14的表达与临床病理特征的关系 观察组Cirpto-1、Survivin和MMP-14阳性表达率与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、肿瘤最大径、有无癌栓及Ki67指数密切相关。见表2。

2.3观察组Cirpto-1、Survivin和MMP-14表达相关性 观察组Cirpto-1和Survivin(r=0.47，P=0.045 3)、Cirpto-1和MMP-14(r=0.48，P=0.035 4)、Survivin和MMP-14(r=0.44，P=0.029 9)表达均呈正相关。

表1 两组Cirpto-1、Survivin和MMP-14阳性表达率比较〔n(%)〕

表2 观察组中Cirpto-1、Survivin和MMP-14阳性表达与临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨 论

老年人伴有退性子宫内膜萎缩，因此，子宫内膜样腺癌恶变过程中主要是蛋白或基因调节的。目前评估老年子宫内膜样腺癌的高危因素有脉管侵犯、淋巴结转移、是否伴有瘤栓等。研究显示机体基因和蛋白水平的变化可以对生物学行为有重要影响，目前Cirpto-1 在肿瘤中的表达逐渐引起关注〔5，6〕。

Cirpto-1是表皮生长因子(EGF)家族成员，是一个糖基磷脂酰基醇锚定膜蛋白，具有调节细胞分化和早期胚胎发育的功能〔7〕。Cirpto-1基因最先由畸胎癌cDNA文库中被发现并分离，其定位于染色体3p21.3，编码由188个氨基酸组成的糖蛋白，其cDNA长约2.2 kb，内含约564 bp长的一个开放读码框架(ORF)。其基因由5个内含子和长约4.8 kb的6个外显子组成，4号外显子上含有保守的EGF样序列〔8〕。Cirpto-1蛋白的相对分子量为36×103，其结构包含氨基末端的信号肽，一个可修饰的EGF样结构域，一个富含半胱氨酸的CFC结构域及一个羧基疏水末端〔9〕。目前多项研究显示Cirpto-1具有癌基因的特征，并对癌症的发生及进展起重要作用〔10〕。徐朝霞等〔11〕通过对食管鳞癌中Cirpto-1蛋白和mRNA的表达进行检测，发现Cirpto-1在肿瘤中高表达，并认为Cirpto-1能在体外诱导正常上皮细胞的转化、促进上皮-间质转换，刺激血管生成，高效促进肿瘤的发生。Survivin是凋亡抑制因子，不仅刺激细胞凋亡，还参与细胞周期的调控和新生血管的形成，也有研究显示Survivin在发挥作用的过程中可以抑制多种信号途径，如caspase、P53、Fas等诱导的细胞凋亡〔12,13〕。Survivin在调节细胞有丝分裂中也有一定作用，如影响微管的聚合及胞质的分化过程〔14〕。还有观点认为Survivin在癌细胞过度表达时可以促使其跳过细胞周期的G2/M期检测点，完成异常有丝分裂而促进癌细胞增殖，引起肿瘤逃避凋亡〔15〕。MMP-14对ECM和基底膜可以形成有效的降解，使细胞的移动性增强，易于在远隔器官形成种植灶〔16〕。也有观点认为MMP-14可以启动细胞表达多个蛋白级联反应，如激活细胞膜上的MMP-2引发连锁性的ECM溶解〔17,18〕。

本实验结果提示Cirpto-1、Survivin和MMP-14三种蛋白异常表达在肿瘤恶变中起积极的促进作用，均可以起癌基因的作用。本研究提示Cirpto-1高表达时促进肿瘤的侵袭、浸润和脉管播散。三者对肿瘤的促进作用可能是通过促进细胞增殖实现的。Cirpto-1在发挥促进肿瘤进展的作用过程中可能与对Survivin和MMP-14的调节有关。如果Cirpto-1高表达，引起细胞增殖状态活跃，细胞生长加速，侵袭能力增强，同时Cirpto-1高表达可以诱导Survivin抑制凋亡的作用，同时可以活化MMP-14的表达，引起ECM高效降解，使肿瘤转移的屏障消失，促进肿瘤转移和播散。也有观点认为Cirpto-1高表达与肿瘤的侵袭和转移相关，并认为Cirpto-1在上皮、间质转化中的调节作用中发挥作用〔5〕，多项研究认为Cirpto-1可能通过转化生长因子(TGF)、Wnt信号转导系统发挥作用参与肿瘤的生物学进展〔19〕。本实验相关分析显示的只是Cirpto-1作用的一个方面，具体机制尚有待证实。

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