雌、孕激素受体和表皮生长因子受体在乳腺癌中的表达及其临床意义

杜 璟 张晓丽 蒋丽娜

(河北北方学院，河北 张家口 075000)

乳腺癌可能是在性激素和生长因子的共同介导下导致局部微环境的变化而生成，其中以雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和表皮生长因子受体(EGFR)尤为重要〔1〕。虽然目前乳腺癌诊断研究进展有很大的提高，但是对如何准确评估乳腺癌的预后及为临床治疗方案提供可靠的依据仍不够理想。因此，本实验探讨联合检测ER、PR和EGFR对乳腺癌诊断、治疗和判断预后的意义。

1 资料与方法

1.1临床资料 收集河北北方学院第一附属医院自2009～2011年手术切除女性乳腺癌标本120例，术前均未做放化疗，病理诊断明确。患者年龄27～74岁，中位年龄49岁。病理分型：非浸润性癌10例，浸润性小叶癌41例，浸润性导管癌69例。发生淋巴结转移的61例，其中淋巴结转移数超过15个有29例，未超过15个有32例，无淋巴结转移的59例。

1.2标本处理 术后立即取10 mm×10 mm×4 mm的新鲜标本固定于10%中性甲醛内(24 h)，常规石蜡包埋，4 μm连续切片6张，2张常规HE染色确定组织学类型，其余用于免疫组化染色。

1.3免疫组化染色 用免疫组化SP法试剂盒(北京中杉金桥生物技术公司)，经脱蜡，高压锅热修复，过氧化氢封闭后滴加一抗，4℃过夜，滴加二抗试剂，最后DAB显色，封片，检测ER、PR和EGFR在乳腺癌组织中的表达情况。染色程序严格按照试剂盒要求进行，阳性对照用已知的ER、PR、EGFR阳性切片，阴性对照用PBS代替一抗。

1.4免疫组化结果判定 阳性物质呈棕黄色。ER、PR阳性染色主要集中在细胞核，EGFR阳性染色在近胞膜处，将阳性部位出现了均匀一致的棕黄色颗粒定义为阳性细胞。连续阅读20个高倍镜视野，其中阳性细胞计数占肿瘤细胞总数的20%以上者为阳性病例，否则为阴性病例。

1.5统计学处理 采用SPSS14.0统计软件进行χ2检验和Spearman等级相关分析。

2 结 果

2.1PR、ER和EGFR的表达与乳腺癌生物学特性的关系 镜下可见PR、ER的阳性物主要分布在细胞核内，EGFR的阳性物主要分布在近胞膜处。这三种基因表达与患者年龄和癌变部位无明显相关性(P>0.05)。在非浸润性乳腺癌内PR、 ER阳性率明显高于浸润性乳腺癌(P<0.05)，而EGFR阳性率低于浸润性乳腺癌(P<0.05)。见表1。

2.2淋巴结转移数与EGFR在乳腺癌中表达关系 EGFR在有淋巴结转移组表达高于无淋巴结转移组(59.01% vs 35.59%，P<0.05)，且在淋巴结转移数超过15个的患者中其表达率明显高于淋巴结未转移或未达15个的患者(75.86% vs 43.75%，P<0.001)。见表1。

表1 PR、 ER和EGFR的表达与乳腺癌生物学特性的关系〔n(%)〕

2.3PR、ER和EGFR在乳腺癌中表达的相关性 ER、PR均(+)者32例，ER(+)PR(-)者25例，ER(-)PR(+)者54例，ER、PR均(-)者41例。ER表达与PR表达无明显相关性(P>0.05)。PR与ER之间表达存在正相关性(r=0.208,P<0.05)，PR与EGFR之间表达存在负相关性(r=-0.218,P<0.05)。

3 讨 论

EGFR基因位于7p11.13，其产物是分子量为170 kD的糖蛋白，分布在胞膜上，由胞外区(受体部位)、跨膜区、胞内区(激酶活性区)组成，是有“受体酶”之称的细胞表面传感器〔2〕。研究表明，在正常乳腺细胞内也合成适量的EGFR，当与转化生长因子(TGF)-α、EGFR等配体结合后引起构象改变并磷酸化，同时产生多种信息将刺激信号传递至细胞核，促进细胞增殖分化及迁移〔3〕。由于代谢因素或细胞周围微环境的改变，使肿瘤组织合成的EGFR增加，增强受体对配体的亲和力，结合后通过受体信号传导途径促进DNA的合成，加快细胞的异常分裂、增殖，促进肿瘤的生长和转移。本实验结果表明在非浸润性乳腺癌内EGFR阳性率明显低于浸润性乳腺癌，无淋巴结转移的患者EGFR表达低于有淋巴结转移患者，而与年龄、癌变部位之间无关。Piyathilake等〔4〕在研究中发现，正常组织、癌前病变组织和癌组织中EGFR的表达是逐级升高的，而本研究中发现EGFR在无淋巴结转移患者、淋巴结转移数不超过15个患者和淋巴结转移数超过15个患者中表达率依次升高，说明EGFR过度表达的肿瘤细胞分化差，有更强的分裂增殖能力，易于发生转移，这与国外有关报道〔5，6〕相符。另有文献报道，EGFR的高表达能抑制细胞凋亡，促进肿瘤内血管形成，因此，EGFR过表达是肿瘤患者预后不良的重要指标之一，也是肿瘤导向诊断及治疗的靶点〔7，8〕。

ER、PR是存在于正常乳腺上皮细胞胞核内的甾体激素受体，调节乳腺细胞的增殖和分化，其分子上有激素结合区及DNA结合区〔9〕。乳腺细胞癌变后仍能保持其激素依赖性生长，临床上激素依赖性乳腺癌约占全部乳腺癌的50%～60%〔10〕。随着肿瘤细胞分化变差，受体表达降低，肿瘤对激素的依赖性生长随之降低，导致激素对肿瘤生长的调控作用也降低。研究表明ER、PR阳性率高的患者，对各种治疗有效尤其是对内分泌治疗敏感性高，可使肿块缩小，癌细胞凋亡〔11〕。而汪波等〔12〕称ER阴性患者内分泌治疗有效率仅为5%～8%。经证实，ER、PR阳性表达的乳腺癌术后5年生存率明显高于阴性者，且术后复发和远处转移较少〔13〕。检测ER、PR表达程度对判断预后，指导内分泌治疗具有一定的指导意义。

本实验发现，ER、PR、EGFR对于判断肿瘤分化、浸润和转移程度均有一定的指导意义。正常细胞中EGFR表达水平较低，对于ER(+)的患者，肿瘤的生长转移多依赖于雌激素的作用，当长期的内分泌治疗阻断这个通路后，可通过一定机制激活EGFR基因的转录〔14〕，提高了EGFR介导的Ras-Raf-MEK-Erk/MAPK〔15〕和PI3K-PKC-IKK〔16〕信号转导通路活性。从而使细胞对内分泌治疗产生耐药性〔17〕。此外，高表达的EGFR可以抵抗放、化疗中对肿瘤细胞的细胞毒性作用〔18〕，使其对放、化疗不敏感。因此可推测EGFR的信号通路活性提高，是乳腺癌内分泌治疗中产生耐药的机制之一。正是耐药的乳腺癌细胞对EGFR信号通路的依赖，因此在乳腺癌内分泌治疗过程中，加用EGFR信号转导通路抑制剂，将更有利于控制肿瘤的生长，延缓耐药的产生，达到更好的治疗效果，预计不久将应用于临床〔19〕。

4 参考文献

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