人类辅助生殖技术中禁欲时间的相关研究进展

吴竺++++++刁英

[摘要] 禁欲时间的长短对精液质量会产生影响已成为共识，多数认为随着禁欲时间延长，精子的活率、活力、前向运动精子百分率降低，精液量、密度及总精子数增加，但具体机制不详；也有认为可能与精子核蛋白转型、精子顶体酶活性及DNA碎片有关。宫腔内人工受精时禁欲时间长短与妊娠率呈负相关，而禁欲时间长短对体外受精-胚胎移植治疗的实验室指标、临床结局是否有影响，目前国内外研究甚少。

[关键词] 辅助生殖技术；禁欲时间；精子优选技术

[中图分类号] R713.7[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2014）06（c）-0191-03

Research progress of abstinence time in human assisted reproductive technology

WU Zhu DIAO Ying▲

Reproductive Medical Center,the First Affiliated Hospital of Zunyi Medical College in Guizhou Province,Zunyi563003,China

[Abstract] It is a consensus that the length of abstinence time will have an impact on semen quality.Most of the literature suggests that with prolonged abstinence time,sperm motility,vitality,the forward movement of sperm will reduce,semen volume,sperm density and total sperm count will increase.Specific mechanism is unknown.Some literatures suggests that it is related to sperm nucleoprotein transition,sperm acrosome activity and DNA fragmentation.Studies have shown that the length of abstinence time was negatively correlated with pregnancy in IUI,but whether it will affect laboratory parameters and clinical outcomes in IVF-ET,little research can available at present.

[Key words] Assisted reproductive technology;Abstinence time;Sperm selection technique

人类辅助生殖技术（assisted reproductive technique，ART）是指用医学的方法对配子、合子及胚胎进行操作以达到使女方受孕目的的一门技术，包括人工受精、体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）及其衍生技术。众所周知，胚胎质量是决定不孕患者能否通过ART成功受孕的主要因素之一，而精子和卵子的质量又决定了胚胎的质量，其中，卵子质量对胚胎的影响已获得共识，但精子质量对胚胎的影响尚未引起足够重视。近年来随着男科学的不断发展，精子对胚胎质量的影响正逐渐被临床医生所认识，如何获得优质精子，也成为生殖领域研究人员不断探索的问题。研究表明，禁欲时间的长短对精液质量有不同程度的影响，虽然WHO建议精液质量分析的禁欲时间为2～7 d[1]，但在ART治疗中，究竟禁欲多长时间更有利于提高胚胎的质量，从而对治疗结局更有益，尚无定论。在ART治疗中，许多患者精神极度紧张，常常发生手术当日取精困难或取出精液质量明显下降等情况，若能明确不同禁欲时间采集精液对ART治疗的影响如何，就可以提前对患者进行心理干预，以减轻患者的精神紧张，从而有利于ART治疗。本文就ART中禁欲时间的相关研究作简要综述。

1 不同禁欲时间对精液质量的影响

不同禁欲时间精子的密度、活力、活率、精液量、精子总数不同，各家报道结论不一。Gao等[2]认为禁欲时间愈长，一次排出的精液其精子活动率及前向运动精子的百分率越低，而精液量、精子总数、活动精子总数及前向运动精子总数等越高。Pellestor等[3]对禁欲时间为1～18 d的精液进行分析发现，随着禁欲时间延长，精液体积和精子浓度与总精子计数显著增加，活动精子总数和正常形态率明显下降。Levitas等[4]在禁欲时间对精液质量的影响中发现，精液正常组与少精组表现略有不同，随着禁欲时间延长（0～14 d），正常精液组精液量、精子密度、精子总数及活动精子总数都明显增多，但精子活率在禁欲7 d前逐渐上升，7 d后明显下降，精子正常形态率10 d内无明显变化。少精组随着禁欲时间延长精液量增加，精子总数在禁欲0～4 d时呈上升趋势，但第5天趋于平稳，到禁欲11～14 d时又急剧下降。活动精子总数禁欲1～4 d升高，5 d后开始下降。精子正常形态率禁欲0～2 d较高，之后下降。特别是精子密度，在禁欲1 d后达最高峰，之后开始下降，至禁欲5 d后趋于平稳。Raziel等[5]在一项前瞻性队列研究中，对50例非梗阻性精子缺乏症男性患者测定不同禁欲时间内收集的精子数量、精子活动力、总精子计数，结果显示，精子计数、总活动精子数的增加随着禁欲时间延长差异有统计学意义，但是精子活动力差异无统计学意义，说明精子活力随着禁欲时间的变化可以保持在一个相对稳定的状况。Carlsen等[6]认为禁欲时间长短不改变精子活力与正常形态精子百分率，但影响精液量和精子密度，随着禁欲时间延长，精液量与精子密度增加。高榜华等[7]对50例正常男性研究却发现精液量与禁欲时间没有关系。禁欲时间的长短对精液质量会产生影响已成为共识，但具体影响如何仍有较大争议。随禁欲时间延长，男性患者的精液量、精子密度逐渐增加，而前向运动精子率、精子活率、正常形态率则随禁欲时间延长逐渐下降，支持Gao及Pellestor的观点。

2 禁欲时间对精液质量产生影响的可能机制

禁欲时间对精液质量产生影响的原因很多。研究发现，禁欲时间对核蛋白转型有影响，核蛋白转型障碍可影响精子核染色质的正常凝聚和稳定性，核染色质易受损伤或造成精子头部形态异常，形成畸形精子，使精子受精能力下降，即使受精后，也会使胚胎发育异常造成流产[8]。在核蛋白组型转换半定量值正常患者中，禁欲时间过短（<3 d）对精子核蛋白组型转换半定量值有影响；在核蛋白组型转换半定量值异常患者中，禁欲时间过长（>7 d）对精子核蛋白组型转换半定量值也有影响，所以建议人工受精时尽量要选择禁欲时间3～7 d[9]。

Blackwell等[10]认为禁欲时间与精子顶体酶活性有关。精子顶体酶活性是判断精子生育力的一种很有价值的方法[11]。顶体酶活性能反映精子的受精潜力。禁欲1～5 d时，顶体酶活性是稳定的，而禁欲10 d时顶体酶活性明显下降，与禁欲1 d顶体酶活性比较差异显著（P<0.05），说明禁欲时间对顶体酶活性有一定影响[12]。另外，Gosálvez等[13]认为，通过缩短禁欲时间和精子洗涤，可以减少精子DNA碎片量，而精子DNA碎片含量高会影响精子受精能力、受精后原核形成、胚胎着床及子代健康，且能较直观地反映患者的精子质量[14-16]。笔者认为理论上，延长禁欲时间会使精子更长时间暴露于活性氧中，而高活性氧水平可能导致精子DNA损伤，从而影响精液质量，但禁欲时间对精液质量产生影响的确切机制到底如何尚不确定。

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3 ART与禁欲时间

目前国内外研究较多的是禁欲时间与未经精子优选技术处理过的精液质量的关系，而不同禁欲时间采集的精液经精子优选技术处理后，对IVF-ET的实验室指标及临床结局是否有影响，禁欲多长时间采集精子对IVF-ET最合适，目前国内外研究甚少。

ART中精液均需优选技术处理，目的有两个，一是通过恰当的处理方法得到优质的精子；二是尽可能去除精浆中所含的前列腺素、死精子、白细胞、精子获能抑制因子及一些杂质碎片等有害成分，从而提高精子获能及受精能力[17]。那么，禁欲时间是否对宫腔内人工受精（intrauterine insemination，IUI）的精液质量及其结局有影响呢？杨帆等[18]对142份行人工授精的精液分析认为，对于同一个体禁欲3～7 d与禁欲2 d的精子相比，禁欲2 d做IUI精液质量不受影响。Jurema等[19]对男方精液质量正常者进行IUI时发现禁欲时间长短与妊娠率呈负相关：当禁欲时间≤3 d时，妊娠率最高（14%）；禁欲时间为4～10 d，其妊娠率为10%；禁欲时间≥10 d，妊娠率为3%；而>14 d者无1例妊娠。Marshburn等[20]认为HCG注射日前禁欲≤2 d行IUI妊娠率最高，之后随禁欲时间延长，妊娠率降低。国内李医等[21]报道，精子密度大的弱精子症患者，禁欲时间缩短后做IUI，妊娠成功率提高，支持上述观点。理论上，延长禁欲时间会增加精子暴露于活性氧的时间，体内高活性氧水平导致精子DNA损伤，加快精子凋亡速度，从而对精子功能与妊娠结局有不利影响[22-24]，但目前禁欲时间对精子DNA损伤的具体机制如何尚未可知[25]。

不同于自然同房怀孕时精子要依靠自身能力穿过女性生殖道，到达输卵管壶腹部完成受精，IVF受精时是直接将精卵混合在一起，精子浓度较高，且IVF治疗中精液都经过优选技术处理，而处理后的精液质量较处理前均会有较大提高，故在IVF周期中，当精子的各项质量指标及其功能低于正常值时，通过精子优选技术处理，在大多数情况下可以完成受精过程[26]，即IVF治疗中对精子质量的要求没有自然受孕时高。那么，IVF治疗时是否还需要严格禁欲2～7 d呢？翟丹梅等[27]的研究认为，禁欲时间长短不影响体外受精后的受精率和卵裂率，禁欲6～7 d的男性精液经优化处理后用于IVF-ET，其种植率和临床妊娠率较其他禁欲时间（≤3 d组、4～5 d组和>7 d组）低，而原因不详。虽然禁欲时间不同精液质量有所不同，但经精子优选技术处理后可较大程度地提高精子获能与受精能力，只要前向运动精子总数能满足需要，对体外受精的结局可能无太大影响。

综上所述，禁欲时间的长短对精子质量有明显影响。

[参考文献]

[1]World Health Organization.WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen[M].5th ed.Geneva：World Health Organization，2010：7-8.

[2]Gao J，Gao ES，Yang Q，et al.Semen quality in a residential geographic and age representative sample of healthy Chinese men[J].Hum Reprod，2007，22（2）：477-484.

[3]Pellestor F，Girardet A，Andreo B.Effect of long abstinence periods on human sperm quality[J].Int J Fertil Menopausal Stud，1994，39（5）：278-282.

[4]Levitas E，Lunenfeld E，Weiss N，et al.Relationship between the duration of sexual abstinence and semen quality:analysis of 9489 semen samples[J].Fertil Steril，2005，83（6）：1680-1686.

[5]Raziel A，Friedler S，Schachter M，et al.Influence of a short or long abstinence period on semen parameters in the ejaculate of patients with nonobstructive azoospermia[J].Fertil Steril，2001，76（3）：485-490.

[6]Carlsen E，Petersen JH，Andersson AM，et al.Effects of ejaculatory frequency and season on variations in semen quality[J].Fertil Steril，2004，82（2）：358-366.

[7]高榜华，叶英，万奇，等.成都地区50例正常男子精液连续一年的动态观察[J].男性学杂志，1998，2（1）：29-31.

[8]Wu JY，Ribar TJ，Cummings DE，et al.Spermiogenesis and exchange of basic nuclear protein are impaired in male germ cells lacking Camk4[J].Nat Genet，2000，25（4）：448-452.

[9]杨光，卞廷松，徐福松，等.禁欲时间对男性不育症患者精子核蛋白组型转换半定量检测值的影响[J].中国实用医药，2008，3（6）：14-15.

[10]Blackwell JM，Zaneveld LJ.Effect of abstinence on sperm acrosin,hypoosmotic swelling,and other semen variables[J].Fertil Steril，1992，58（4）：798-802.

[11]Howes L，Jones R.Interactions between zona pellucida glycoprotein and sperm proacrosin/acrosin during fertilization[J].J Reprod Immunol，2002，53（1-2）：181-182.

[12]刘睿智，董乃屹，高元奇，等.禁欲时间对人精子顶体酶活性精子密度和精子数的影响[J].中国妇幼保健，2005，20（1）：3306-3307.

[13]Gosálvez J，González-Martínez M，López-Fernández C，et al.Shorter abstinence decreases sperm deoxyribonucleic acid fragmentation in ejaculate[J].Fertil Steril，2011，96（5）：1083-1086.

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[14]Smit M，Dohle GR，Hop WC，et al.Clinical correlates of the biological variation of sperm DNA fragmentation in infertile men attending an andrology outpatient clinic[J].Inter J Androl，2007，30（1）：48-55.

[15]Shamsi MB，Kumar R，Dada R.Evaluation of nuclear DNA damage in huaman spermatozoa in men opting for assisted reproduction[J].Indian J Med Res，2008，127（2）：115-123.

[16]Zini A，Sigman M.Are tests of sperm DNA damage clinically useful?pros and cons[J].J Androl，2009，30（3）：219-229.

[17]黄荷凤.现代辅助生殖技术[M].北京：人民军医出版社，2003：201-202.

[18]杨帆，施祖美，王晓敏，等.禁欲2天对于精子质量的影响[J].中国男科学杂志，2004，18（3）：29-31.

[19]Jurema MW，Vieira AD，Bankowski B，et al.Effect of ejaculatory abstinence period on the pregnancy rate after intrauterine insemination[J].Fertil Steril，2005，84（3）：678-681.

[20]Marshburn PB，Alanis M，Matthews ML，et al.A shorted period of ejaculatory abstinence before intrauterine insemination is associated with higher pregnancy rates[J].Fertil Steril，2010，93（1）：286-288.

[21]李医，杜兴琴.缩短禁欲时间治疗弱精子的探讨[J].中国实用医学，2011，4（6）：242-243.

[22]Williams AC，Ford WC.Relationship between reactive oxygen species production and lipid peroxidation in human sperm suspensions and their association with sperm function[J].Fertil Steril，2005，83（4）：929-936.

[23]Gallegos G，Ramos B，Santiso R，et al.Sperm DNA fragmentation in infertile men with genitourinary infection by Chlamydia trachomatis and Mycoplasma[J].Fertil Steril，2008，90（2）：328-334.

[24]戴汝琳，刘睿智.影响精子DNA损伤因素研究进展[J].生殖与避孕，2009，29（6）：358-359.

[25]Desai NR，Mahfouz R，Sharma R，et al.Reactive oxygen specices levels are independent of sperm concentration，motility，and abstinence in a normal，healthy，proven fertile man:a longitudinal study[J].Fertil Steri，2010，94（4）：1541-1543.

[26]顾斌，郑爱燕，丁洁，等.精子质量和功能参数与IVF受精率和优胚率的关系探讨[J].中国妇幼保健，2011，26（1）：881-884.

[27]翟丹梅，李柳铭，覃爱平，等.不同禁欲时间对体外受精-胚胎移植结局的影响[J].检验医学与临床，2012，9（13）：1583-1586.

（收稿日期：2014-03-17本文编辑：李亚聪）

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[14]Smit M，Dohle GR，Hop WC，et al.Clinical correlates of the biological variation of sperm DNA fragmentation in infertile men attending an andrology outpatient clinic[J].Inter J Androl，2007，30（1）：48-55.

[15]Shamsi MB，Kumar R，Dada R.Evaluation of nuclear DNA damage in huaman spermatozoa in men opting for assisted reproduction[J].Indian J Med Res，2008，127（2）：115-123.

[16]Zini A，Sigman M.Are tests of sperm DNA damage clinically useful?pros and cons[J].J Androl，2009，30（3）：219-229.

[17]黄荷凤.现代辅助生殖技术[M].北京：人民军医出版社，2003：201-202.

[18]杨帆，施祖美，王晓敏，等.禁欲2天对于精子质量的影响[J].中国男科学杂志，2004，18（3）：29-31.

[19]Jurema MW，Vieira AD，Bankowski B，et al.Effect of ejaculatory abstinence period on the pregnancy rate after intrauterine insemination[J].Fertil Steril，2005，84（3）：678-681.

[20]Marshburn PB，Alanis M，Matthews ML，et al.A shorted period of ejaculatory abstinence before intrauterine insemination is associated with higher pregnancy rates[J].Fertil Steril，2010，93（1）：286-288.

[21]李医，杜兴琴.缩短禁欲时间治疗弱精子的探讨[J].中国实用医学，2011，4（6）：242-243.

[22]Williams AC，Ford WC.Relationship between reactive oxygen species production and lipid peroxidation in human sperm suspensions and their association with sperm function[J].Fertil Steril，2005，83（4）：929-936.

[23]Gallegos G，Ramos B，Santiso R，et al.Sperm DNA fragmentation in infertile men with genitourinary infection by Chlamydia trachomatis and Mycoplasma[J].Fertil Steril，2008，90（2）：328-334.

[24]戴汝琳，刘睿智.影响精子DNA损伤因素研究进展[J].生殖与避孕，2009，29（6）：358-359.

[25]Desai NR，Mahfouz R，Sharma R，et al.Reactive oxygen specices levels are independent of sperm concentration，motility，and abstinence in a normal，healthy，proven fertile man:a longitudinal study[J].Fertil Steri，2010，94（4）：1541-1543.

[26]顾斌，郑爱燕，丁洁，等.精子质量和功能参数与IVF受精率和优胚率的关系探讨[J].中国妇幼保健，2011，26（1）：881-884.

[27]翟丹梅，李柳铭，覃爱平，等.不同禁欲时间对体外受精-胚胎移植结局的影响[J].检验医学与临床，2012，9（13）：1583-1586.

（收稿日期：2014-03-17本文编辑：李亚聪）

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[14]Smit M，Dohle GR，Hop WC，et al.Clinical correlates of the biological variation of sperm DNA fragmentation in infertile men attending an andrology outpatient clinic[J].Inter J Androl，2007，30（1）：48-55.

[15]Shamsi MB，Kumar R，Dada R.Evaluation of nuclear DNA damage in huaman spermatozoa in men opting for assisted reproduction[J].Indian J Med Res，2008，127（2）：115-123.

[16]Zini A，Sigman M.Are tests of sperm DNA damage clinically useful?pros and cons[J].J Androl，2009，30（3）：219-229.

[17]黄荷凤.现代辅助生殖技术[M].北京：人民军医出版社，2003：201-202.

[18]杨帆，施祖美，王晓敏，等.禁欲2天对于精子质量的影响[J].中国男科学杂志，2004，18（3）：29-31.

[19]Jurema MW，Vieira AD，Bankowski B，et al.Effect of ejaculatory abstinence period on the pregnancy rate after intrauterine insemination[J].Fertil Steril，2005，84（3）：678-681.

[20]Marshburn PB，Alanis M，Matthews ML，et al.A shorted period of ejaculatory abstinence before intrauterine insemination is associated with higher pregnancy rates[J].Fertil Steril，2010，93（1）：286-288.

[21]李医，杜兴琴.缩短禁欲时间治疗弱精子的探讨[J].中国实用医学，2011，4（6）：242-243.

[22]Williams AC，Ford WC.Relationship between reactive oxygen species production and lipid peroxidation in human sperm suspensions and their association with sperm function[J].Fertil Steril，2005，83（4）：929-936.

[23]Gallegos G，Ramos B，Santiso R，et al.Sperm DNA fragmentation in infertile men with genitourinary infection by Chlamydia trachomatis and Mycoplasma[J].Fertil Steril，2008，90（2）：328-334.

[24]戴汝琳，刘睿智.影响精子DNA损伤因素研究进展[J].生殖与避孕，2009，29（6）：358-359.

[25]Desai NR，Mahfouz R，Sharma R，et al.Reactive oxygen specices levels are independent of sperm concentration，motility，and abstinence in a normal，healthy，proven fertile man:a longitudinal study[J].Fertil Steri，2010，94（4）：1541-1543.

[26]顾斌，郑爱燕，丁洁，等.精子质量和功能参数与IVF受精率和优胚率的关系探讨[J].中国妇幼保健，2011，26（1）：881-884.

[27]翟丹梅，李柳铭，覃爱平，等.不同禁欲时间对体外受精-胚胎移植结局的影响[J].检验医学与临床，2012，9（13）：1583-1586.

（收稿日期：2014-03-17本文编辑：李亚聪）

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