老年食管鳞癌患者术后组织中乙醛脱氢酶1和血管内皮生长因子表达的临床意义

马圣伟 黄江平 崔丰和

(荆州市中心医院心胸外科， 湖北 荆州 434020)

食管鳞癌病情进展快，预后差。近来多项研究显示患者病变进展中多种基因和蛋白出现明显变化。乙醛脱氢酶(ALDH)1是ALDH家族的重要成员，参与机体多种组织的分化和基因表达，也是正常干细胞分化的重要物质〔1〕。近年来学者发现其在恶性肿瘤中表达明显升高〔2〕。血管内皮生长因子(VEGF)是重要的血管生成促进因子，可以引起肿瘤间质新生血管的形成〔3〕。本实验检测食管鳞癌中ALDH1和VEGF的表达及二者的关系。

1 材料和方法

1.1临床资料 收集2010年1月至2012年12月在我院行食管鳞癌根治手术切除后的新鲜标本102例为观察组，组织于术后立即取材，并置于-80℃冰箱中冻存。年龄60～81(平均68.1)岁，其中男52例，女50例，患者术前均未进行任何放、化疗，病例纳入均经病理学主任医师再次阅片确诊，并符合世界卫生组织(WHO)的诊断标准。高分化38例，中分化42例，低分化22例。同时选取经病理证实切端无癌的正常食管黏膜新鲜组织76例作为对照组，年龄60～80(平均68.6)岁，其中男40例，女36例。两组一般临床资料无明显差别(P>0.05)，具有可比性。

1.2流式细胞术检测ALDH1和VEGF的表达 ALDH1和VEGF蛋白的浓缩液均购自武汉博士德生物工程有限公司，按不同比例进行稀释后进行预实验，选择最佳比例进行正式实验。取出冻存新鲜组织，立即置于70%酒精中固定，制备单细胞悬液，应用美国BD公司生产的流式细胞仪进行检测，应用系统自带的软件对数据进行分析。

1.3结果判定标准 应用荧光指数(FI)表示蛋白的含量。FI=(肿瘤中蛋白表达的荧光强度-对照样品的平均荧光强度)/对照样品的平均荧光强度。

1.4统计学方法 应用SAS6.12软件进行t检验和线性相关性分析。

2 结 果

2.1两组ALDH1和VEGF蛋白表达量的比较 观察组中ALDH1(1.32±0.43)和VEGF的表达(1.49±0.29)明显高于对照组(1.00±0.31、1.00±0.28)(t=10.25,P<0.000 1;t=15.53,P<0.000 1)。

2.2观察组不同临床特征中ALDH1和VEGF表达的比较 观察组ALDH1和VEGF的表达与肿瘤的最大径、浸润深度、转移、分化程度、Ki67增殖指数密切相关。见表1。

表1 观察组不同临床特征中ALDH1和VEGF表达的比较

2.3观察组ALDH1和VEGF表达的关系 观察组ALDH1和VEGF的表达呈正相关性(r=0.45，P=0.035 1)。

3 讨 论

食管鳞癌在其进展过程中，多种蛋白常出现明显改变。ALDH1是催化细胞内乙醛氧化为乙酸的细胞溶质酶，参与多种组织的分化与基因表达，也是正常干细胞生长的必要物质〔4,5〕。人类的ALDH1基因定位于9q21染色体上，由56 kb碱基对构成，包含13个外显子，编码相对分子量为54 kD的蛋白。近来相关性学者认为ALDH1是干细胞的标志物，也可以作为分离干细胞的常规标记蛋白〔6,7〕。ALDH1的作用可能具有多向性。VEGF是在干细胞分化基础上形成的蛋白，对肿瘤新生血管形成的作用明显〔8〕。VEGF对血管生成的促进作用表现为多种方面，主要是对基质中CD34、CD31、CD105阳性的血管，肿瘤间质血管生成多，使肿瘤的营养丰富，氧供丰富，肿瘤生成和代谢快，侵袭能力增加，转移潜能增强。

本实验提示ALDH1和VEGF在食管鳞癌中具有明显的协同作用，即肿瘤细胞诱导ALDH1的产生，同时引起VEGF的产生及分泌，促进CD34、CD105阳性的肿瘤新生血管的生成，加速肿瘤生长及侵袭作用。食管鳞癌发生时ALDH1的表达增多，对肿瘤的进展及转移有明显的促进作用〔9,10〕。ALDH1与血管生成有关，尤其是与VEGF的正向协同作用，使ALDH1与血管新生密切联系在一起〔11〕。VEGF被激活后，促进肿瘤内及肿瘤周边血管的新生，加速肿瘤的生长，促进肿瘤转移。联合检测ALDH1和VEGF高表达提示肿瘤进展加速。同时由于浸润深度、分化程度及细胞增殖指数均与患者的预后相关，因此联合检测ALDH1和VEGF的表达可能对判断老年人食管鳞癌的预后有一定价值。

4 参考文献

1吴美华, 黄锦成, 冯振博. 乳腺癌中ALDH1的表达及其与细胞凋亡、caspase-3的关系〔J〕. 临床与实验病理学杂志, 2012; 28(7): 737-9.

2黄 华, 章建国, 仇晓军. 乙醛脱氢酶1在非小细胞肺癌中的表达及意义〔J〕. 山东医药, 2011; 34(49): 45-6.

3Geng L, Chaudhuri A, Talmon G,etal. TGF-beta suppresses VEGFA-mediated angiogenesis in colon cancer metastasis〔J〕. PLoS One, 2013; 8(3): e59918.

4张海涛, 金美善, 石爱平, 等. 肿瘤干细胞标记物ALDH1在非浸润性膀胱癌组织中的表达及其临床意义〔J〕. 吉林大学学报(医学版), 2013; 39(2): 326-8.

5Schwartz T, Stark A, Pang J,etal. Expression of aldehyde dehydrogenase 1 as a marker of mammary stem cells in benign and malignant breast lesions of Ghanaian women〔J〕. Cancer, 2013; 119(3): 488-94.

6Zhong Y, Lin Y, Shen S,etal. Expression of ALDH1 in breast invasive ductal carcinoma: an independent predictor of early tumor relapse〔J〕. Cancer Cell Int, 2013; 13(1): 60.

7Wu A, Luo W, Zhang Q,etal. Aldehyde dehydrogenase 1, a functional marker for identifying cancer stem cells in human nasopharyngeal carcinoma〔J〕. Cancer Lett, 2013; 330(2): 181-9.

8Pang L, Zhang Y, Yu Y,etal. Resistin promotes the expression of vascular endothelial growth factor in ovary carcinoma cells〔J〕. Int J Mol Sci, 2013; 14(5): 9751-66.

9黄江生. 胆总管腺癌Musashi-1和ALDH1表达及其临床病理意义〔J〕. 中国现代医学杂志, 2011; 21(35): 4409-11.

10李秀清, 关艳杰, 吕小明, 等. 肿瘤干细胞标志物ALDH1及CD133在乳腺癌中的表达及意义〔J〕. 中国妇幼保健, 2012; 27(26): 4118-20.

11刘爱东, 庞久玲, 刘士生. 食管鳞癌中基质金属蛋白酶-9和CD105表达关系的研究〔J〕. 中国老年学杂志, 2009; 29(7): 886-7.