微小染色体维持蛋白7和活化蛋白激酶C受体在非小细胞肺癌中的表达及意义

钟云华 宋 波 刘 俊 郑 梅 陈 滟 丛树园 孙 睿

(云南省第一人民医院内科干部保健科，云南 昆明 650032)

非小细胞肺癌发生发展过程中多种基因和蛋白异常表达，使肿瘤的侵袭性增加。微小染色体维持蛋白7(MCM7)属于MCM蛋白家族，是启动DNA复制起始点的复制准许因子之一，参与DNA的合成，促进细胞的增殖〔1〕。活化蛋白激酶C受体-1(RACK1)属于天冬氨酸/色氨酸-40结构域蛋白家族成员，能与多种重要的细胞内蛋白质和信号分子形成协同作用，调节信号转导、周期演进、细胞生长和运动等功能〔2〕。本文关注MCM7和RACK1在非小细胞肺癌中的作用及二者的关系。

1 材料与方法

1.1临床资料 选取2011年1月至2012年12月在我院确诊为非小细胞肺癌的患者98例作为观察组，均行手术治疗，术后标本均应用甲醛溶液固定。均符合WHO中非小细胞肺癌的诊断标准。男50例，女48例，年龄52～73(平均67.5)岁。选取70例肿瘤切除后肺组织的切缘组织作为对照组，并严格经病理医师证实为正常的肺组织，男35例，女35例，年龄53～72(平均66.7)岁。

1.2MCM7和RACK1蛋白检测 MCM7和RACK1蛋白的浓缩液均购自北京中杉金桥生物技术公司，按不同比例进行稀释进行预实验，选择最理想的浓度进行正式实验。蛋白的检测应用免疫组化SP法、DAB染色，严格质量控制，减少各种误差。

1.3结果判定标准 MCM7阳性部位为细胞核，RACK1阳性部位为细胞质和(或)细胞膜，以出现棕黄色颗粒为阳性反应细胞，选择10个400倍视野并计数，以阳性率≥25%为阳性，以阳性率<25%为阴性。

1.4统计学方法 应用SAS6.12统计软件进行χ2检验或相关分析。

2 结 果

2.1MCM7和RACK1在观察组与对照组中表达阳性率的比较 MCM7和RACK1在观察组中表达的阳性率明显高于对照组(P<0.01)，见表1。

表1 MCM7和RACK1在两组中表达阳性率的比较〔n(%)〕

2.2观察组中MCM7和RACK1的表达在不同临床病理特征中的关系 观察组中MCM7和RACK1的表达均与肿瘤的最大径、胸膜侵犯、临床分期、淋巴结转移、脉管浸润密切相关(P<0.05)，见表2。

表2 观察组中MCM7和RACK1的阳性表达

2.3观察组中MCM7和RACK1表达的相关性分析 观察组中MCM7和RACK1(r=0.48，P=0.041 0)的表达具有正相关性。

3 讨 论

非小细胞肺癌发展过程中可以表现出明显的侵袭和转移，多种蛋白的变化促进了此过程。在真核细胞中，DNA复制合成起始于一个特定的起始复制点，这个位点是保证基因组在每个细胞周期仅复制1次的必要条件〔3〕。正常情况下MCM7参与完成正常的准许功能，当MCM7表达失调时可以引起染色体的缺损，促使肿瘤发生〔4〕。当肿瘤发生后，MCM7的异常表达还可以破坏细胞骨架和改变细胞凋亡等参与肿瘤的进展〔5〕。RACK1含有7个高度保守的结构域，作为活化蛋白激酶(PKC)的锚定蛋白，能将PKC从胞质转位到胞膜而发挥对PKC的调节作用〔6，7〕。有学者认为RACK1表达上调时可导致肿瘤的化疗受阻，其机制是定位于溶酶体的RACK1与PKC结合，使真核细胞翻译起始因子磷酸化，再使细胞生长因子与生存的蛋白因子翻译，引起化疗的抵抗〔8，9〕。因此RACK1不仅对肿瘤的发生发展有影响，还对治疗有明显的影响。

本实验结果提示MCM7和RACK1在肿瘤的形成和进展中具有重要作用。在此过程中MCM7异常表达使细胞正常复制的位点发生变化，引起肿瘤的失控性增生。而且MCM7可以调节细胞因子、生长因子和连接蛋白，调节生长因子的生物利用度，使肿瘤细胞具有侵袭性。RACK可通过调节细胞代谢而影响细胞之间的信息传递〔10〕。RACK还可以调节细胞分化及迁移，进而可能影响肿瘤的生物学行为，这与Nagashio等〔11〕认为RACK1是肺癌新的重要生物标志物的结论相同。本实验结果提示MCM7和RACK1可能具有通路作用，由于RACK1/MCM7在肿瘤中表达增高，其促癌作用明显，此过程活化后，可以激活其相应的靶蛋白，引起肿瘤的快速生长、侵袭和转移。本实验结果提示MCM7和RACK1参与肿瘤的浸润、脉管侵犯和淋巴累犯。由于以上因素均与预后相关，因此应用免疫组化检测MCM7和RACK1的表达可能对判断非小细胞肺癌的预后有一定临床意义。

4 参考文献

1李书勤，倪观太，孔丽娜，等.微型染色体维持蛋白7在宫颈癌早期诊断和预防中的价值〔J〕.中国实用妇科与产科杂志，2012；28(1)：34-6.

2Wang Z，Zhang B，Jiang L,etal.RACK1，an excellent predictor for poor clinical outcome in oral squamous carcinoma，similar to Ki67〔J〕.Eur J Cancer，2009；45(3)：490-6.

3史 琳，张安文,罗 宇，等.甲状腺癌中MCM7和P27的表达及临床意义〔J〕.实用肿瘤杂志，2011；26(4)：390-2.

4任占平,石 吉，张 芫.子宫内膜样腺癌组织中P27、MCM7蛋白的表达及意义〔J〕.肿瘤防治杂志，2011；38(1)：73-5.

5张文苹，王贵吉，吴晶晶，等.MCM7、MCM5及cyclin E在直肠癌中的表达及临床意义〔J〕.第三军医大学学报，2011；33(5)：527-9.

6Cao XX，Xu JD，Xu JW,etal.RACK1 promotes breast carcinoma migration/metastasis via activation of the RhoA/Rho kinase pathway〔J〕. Breast Cancer Res Treat，2011；126(3)：555-63.

7Cao XX，Xu JD，Liu XL,etal.RACK1：a superior independent predictor for poor clinical outcome in breast cancer〔J〕.Int J Cancer，2010；127(5)：1172-9.

8朱 薇，贺修强，肖志强，等.RACK1在大肠癌癌变过程中的表达和意义〔J〕.国际病理科学和临床杂志，2013；33(1)：22-5.

9Bourd-Boittin K，Le Pabic H，Bonnier D,etal.RACK1，a new ADAM12 interacting protein.Contribution to liver fibrogenesis〔J〕.J Biol Chem，2008；283(38)：26000-9.

10Cao XX，Xu JD，Xu JW,etal.RACK1 promotes breast carcinoma proliferation and invasion/metastasis in vitro and in vivo〔J〕.Breast Cancer Res Treat，2010；123(2)：375-86.

11Nagashio R，Sato Y，Matsumoto T,etal.Expression of RACK1 is a novel biomarker in pulmonary adenocarcinomas〔J〕.Lung Cancer，2010；69(1)：54-9.