脑胶质瘤CT灌注成像时脑血流容积值与术后组织中癌胚抗原相关细胞黏附分子、神经纤毛蛋白和血管内皮生长因子表达的关系

叶春涛 嵇 鸣 王 臣

(复旦大学附属华东医院放射科(MR室),上海 200040)

脑胶质瘤病变发生过程中血管增生明显，且对病变进展有重要意义，目前学者发现了多种肿瘤血管生成的促进物质，也证实了其以肿瘤进展的促进作用。脑灌注成像技术是通过无创分析脑肿瘤的血管生成及血流情况，对判断肿瘤的性质有一定价值〔1〕。癌胚抗原相关细胞黏附分子(CEACAM)6、神经纤毛蛋白(NRP)2和血管内皮生长因子(VEGF)均为与脑胶质瘤生物学行为和预后相关的蛋白，三者对促进肿瘤性病变进展有重要价值〔2～4〕。本研究观察脑胶质瘤患者应用CT灌注成像技术时脑血流容积值(rCBV)与术后组织中CEACAM6、NRP2和VEGF表达的关系。

1 资料和方法

1.1临床资料 我院于多层螺旋(MS)CT灌注检查后1个月内行肿瘤切除手术的脑胶质瘤患者98例，均经术后病理确诊，分类及分级均符合世界卫生组织(WHO)的诊断标准。排除标准：①伴有严重内脏器官疾病；②伴有其他器官恶性肿瘤；③有精神系统疾病史；④有头颅损伤或手术病史。男58例，女40例，年龄52～85(平均65.2)岁。

1.2MSCT灌注成像检查方法 应用GE Lightspeed 16iMSCT机，先定位，再进行灌注扫描。经肘前静脉快速团注对比剂，3.5 ml/s，总剂量50 ml，延迟时间5 s，总扫描时间50 s。应用Perfusin2软件进行灌注成像，选取流入动脉和流出静脉，计算并显示灌注图像，显示CBV灌注图像，找出CBV值最大区域，计算rCBV值。

1.3术后组织中CEACAM6、NRP2和VEGF检测 CEACAM6、NRP2和VEGF 3种抗体浓缩液均购自武汉博士德生物工程公司，依不同比例进行稀释后行预实验，观察最理想的表达，应用该浓度进行正式实验。应用免疫组化SP法，均由同一病理主管技师完成，严格质量控制。

1.4统计学方法 采用SAS6.12软件进行t检验、线性相关性分析。

2 结 果

2.1不同分级胶质瘤患者rCBV的比较 Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤患者rCBV值(n=46,4.84±1.22)较Ⅲ～Ⅳ级(n=52,7.52±2.13)明显低(t=6.75，P=0.029 3)。

2.2不同分级胶质瘤患者术后组织中CEACAM6、NRP2和VEGF表达 不同分级分组中CEACAM6、NRP2和VEGF表达的阳性率差别显著(P<0.001)，即高分级患者CEACAM6、NRP2和VEGF表达的阳性率高。见表1。

2.3胶质瘤患者rCBV值与CEACAM6、NRP2、VEGF表达的关系 rCBV与CEACAM6(r=0.46,P=0.043 2)、rCBV与NRP2(r=0.43,P=0.025 3)、rCBV与VEGF(r=0.56,P=0.010 9)的表达均正相关。

表1 不同分级胶质瘤患者术后组织CEACAM6、NRP2和VEGF阳性表达的比较〔n(%)〕

3 讨 论

胶质瘤进展过程中，血管增生活跃。胶质瘤的血管生成不仅是肿瘤生长的重要支持成分，也是肿瘤分级的重要病理基础。脑CT灌注成像是脑功能成像的重要方法之一，通过观察脑组织或局部肿瘤组织的血液灌注状态及血管化的程度，无创性地判断病变程度〔5,6〕。其理论基础是核医学的放射性示踪剂稀释理论和中心容积定律。CT灌注成像各参数反映了肿瘤组织的微血管分布和血流灌注的改变〔7〕。近年学者关注胶质瘤病变发展过程中伴随多种癌基因及血管生成因子的状态〔8,9〕。CEACAM6是机体内免疫球蛋白超家族的重要成员，是细胞表面存在的一种糖蛋白，通过糖基磷脂酰肌醇连接在局部的细胞膜上〔10〕。CEACAM6分布在上皮细胞和血管内皮细胞上，在促肿瘤因素的作用下，CEACAM6的表达可以升高，使肿瘤细胞增殖活性提高，肿瘤细胞的生长加速，侵袭能力增强〔11〕。学者〔12〕认为CEACAM6可以促进肿瘤血管生成，因此CEACAM6的作用可能具有多元性。当CEACAM6被激活后，可促进肿瘤内及肿瘤周边血管的新生，加速肿瘤的生长，促进肿瘤转移〔13〕。NRP2是从乳腺癌细胞系中纯化得到的〔14〕，其与血管的关系密切，也有学者〔15〕将NRP2作为VEGF的新型受体，即一个潜在的血管生成促进因子，因此NRP2与VEGF可能有明显的协同作用。VEGF与肿瘤的生长伴随发生，是在干细胞分化的基础上形成的蛋白质，其高表达对肿瘤的血管生成有重要影响〔16〕。研究〔17〕认为VEGF高表达时可以促进CD34、CD31、CD105阳性的血管内皮细胞标志物的生成，从多元角度促进肿瘤间质的血管新生。

本实验结果提示rCBV值可以在一定程度上反映肿瘤的分级。理论上讲，低级别胶质瘤的微循环主要是在脑组织已有的血管上，此时血管屏障并未受到破坏，当肿瘤在促瘤因素的作用下，血管屏障功能受到影响，通透性增强，成熟的血管和未成熟的血管均明显增多，血流增加，此时检测的rCBV值明显升高。术后检测CEACAM6、NRP2和VEGF的表达可以在一定程度上辅助分级。CEACAM6、NRP2和VEGF的表达可能在一定程度上判断肿瘤患者的预后。CEACAM6、NRP2和VEGF均具有血管成生作用，尤其是VEGF，NRP2也具有直接的血管生成作用，但是其作用程度较弱于VEGF，CEACAM6可以通过促进VEGF而发挥血管生成的作用。rCBV和CEACAM6、NRP2三者具有协同作用，由于VEGF是直接的血管生成因子，因此，CEACAM6、NRP2作为不同通路的癌相关蛋白，二者可通过促进VEGF的表达发挥血管生成的作用。由于三者均与肿瘤的生物学行为及预后相关，因此，术前无创性测定rCBV值可以初步判断肿瘤的生物学行为及预后。

4 参考文献

1诸静其,常时新,金惠明,等.小儿脑胶质瘤CT表现与PCNA表达相关性研究〔J〕.放射学实践,2006；21(7): 735-7.

2Litkouhi B,Litkouhi B,Fleming E,etal.Overexpression of CEACAM6 in borderline and invasive mucinous ovarian neoplasms〔J〕.Gynecol Oncol,2008；109(2): 234-9.

3Staton CA,Koay I,Wu JM,etal.Neuropilin-1 and neuropilin-2 expression in the adenoma-carcinoma sequence of colorectal cancer〔J〕.Histopathology,2013；62(6): 908-15.

4李德艳,刘爱东,高 峰.MMP-7和VEGF在胃癌组织中表达的临床价值〔J〕.中国老年学杂志,2011；31(2): 185-6.

5张建华,漆剑频,黄文华,等.脑胶质瘤CT灌注成像与VEGF表达的对照研究〔J〕.中国医学影像技术,2007；23(7): 982-4.

6王 冰,雷 震.胶质瘤的CT灌注成像与血管生成的相关性研究〔J〕.现代预防医学,2011；38(1): 198-9.

7史军丽,张体江,先正元,等.脑胶质瘤多层螺旋CT灌注成像与血管内皮生长因子的相关性研究〔J〕.广东医学,2009；30(9):1286-8.

8诸静其,郝楠馨,金惠明,等.儿童脑胶质瘤的CT征像与病理、Ki67表达对照研究〔J〕.中国医学影像学杂志,2008；16(1): 20-2.

9许乃滔,王志策.CT灌注成像在脑胶质瘤分级中的价值及与微血管密度的相关性〔J〕.海南医学院学报,2012；18(12): 1708-9.

10Ieta K,Tanaka F,Utsunomiya T,etal.CEACAM6 gene expression in intrahepatic cholangiocarcinoma〔J〕.Br J Cancer,2006；95(4): 532-40.

11Litkouhi B,Litkouhi B,Fleming E,etal.Overexpression of CEACAM6 in borderline and invasive mucinous ovarian neoplasms〔J〕.Gynecol Oncol,2008；109(2): 234-9.

12Zhao ZS,Li L,Wang HJ,etal.Expression and prognostic significance of CEACAM6,ITGB1,and CYR61 in peripheral blood of patients with gastric cancer〔J〕.J Surg Oncol,2011；104(5): 525-9.

13Long H,Li Q,Wang Y,etal.Effective combination gene therapy using CEACAM6-shRNA and the fusion suicide gene yCDglyTK for pancreatic carcinoma in vitro〔J〕.Exp Ther Med,2013；5(1): 155-61.

14Yasuoka H,Kodama R,Hirokawa M,etal.Neuropilin-2 expression in papillary thyroid carcinoma: correlation with VEGF-D expression,lymph node metastasis,and VEGF-D-induced aggressive cancer cell phenotype〔J〕.J Clin Endocrinol Metab,2011；96(11): E1857-61.

15Kawakami T,Tokunaga T,Hatanaka H,etal.Neuropilin 1 and neuropilin 2 co-expression is significantly correlated with increased vascularity and poor prognosis in nonsmall cell lung carcinoma〔J〕.Cancer,2002；95(10): 2196-201.

16吴泽宇,罗中仁,万 进,等.中下段直肠癌E-cadherin,MMP-2和VEGF表达与肿瘤侵袭转移的关系〔J〕.中国普通外科杂志,2007；16(4): 387-9.

17涂燕君,陈 军,刘昌盛,等.侵袭性垂体腺瘤MRI表现与MMP-9、MMP-14、VEGF表达的相关性研究〔J〕.武汉大学学报(医学版),2010；31(5): 671-5.