加味皮康颗粒中橙皮苷的含量测定

武警部队药品仪器检验所，北京 102613

加味皮康颗粒中橙皮苷的含量测定

于玲王晓飞葛海生

武警部队药品仪器检验所，北京 102613

目的建立以高效液相色谱法测定加味皮康颗粒中橙皮苷含量的方法。方法色谱柱：SHISEIDO C18 (4.6mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液(12∶13∶75)，柱温：35℃，检测波长：284nm，流量：1.0ml/min。结果橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围内线性良好(r=0.9998)，平均回收率为98.83%，RSD为1.34%(n=6)。结论本方法简便快速、准确、可用于加味皮康颗粒的质量控制。

高效液相色谱法；加味皮康颗粒；橙皮苷；含量测定

加味皮康颗粒是由牡丹皮、陈皮等多味中草药组成[1]，临床用于玫瑰糠疹、湿疹的治疗，为更好的控制药品质量，确保用药安全，本文采用高效液相色谱(HPLC)测定制剂中橙皮苷的含量，方法简单、准确，可用于本品的质量控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器 SHIMADZU LC-2010HTC高效液相色谱仪(二极管阵列紫外检测器)。

1.2 试药 橙皮苷对照品(批号：110721-201115，中国食品药品检定研究院)；加味皮康颗粒(批号：20130701、20130702、20130703、20130704，武警医院自制)；乙腈、甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2]色谱柱：SHISEIDO C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液(12∶13∶75)；柱温：35℃；检测波长：284nm；流量：1.0ml/min；进样量：10μl。理论塔板数按橙皮苷峰计算不低于7000，分离度符合规定。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液制备 精密称取橙皮苷对照品(含量为96.3%)约7.92mg，置于50ml量瓶中，加甲醇适量溶解后，稀释至刻度，摇匀制得贮备液。精密吸取贮备液2ml置5ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液(约每1ml含橙皮苷60μg)。

2.2.2 供试品溶液 取本品约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20min使溶散，加热回流45min，放冷，再称定重量，加80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

2.2.3 阴性对照溶液 按处方中各药味的比例和制法项下规定配制缺陈皮的阴性样品，再按“2.2.2”项下方法对样品进行制备，作为阴性样品溶液。

2.3 方法专属性试验 精密吸取橙皮苷阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各10μl，分别注入色谱仪，按“2.1”项下色谱条件进行测定，记录图谱，结果阴性对照溶液在与橙皮苷对照品相同保留时间色谱峰处未显色谱峰，因此无干扰。

2.4 线性关系考察 精密量取橙皮苷对照品溶液(浓度为：61.02μg/ml)各1、5、10、15、20、25、30、35、40μl注入色谱仪中，按“2.1”项下色谱条件测定橙皮苷峰面积(A)，作为纵坐标，同时以橙皮苷进样量(μg)为横坐标，得回归方程为Y=11400+1725506X，r=0.9998，橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验 精密量取“2.4”中同一橙皮苷对照品溶液(浓度为61.02μg/ml)，按“2.1”项下色谱条件重复进样6次，每次10μl，记录橙皮苷峰面积，依法进行计算，结果芍药苷的峰面积RSD为0.12%(n=6)。

2.6 稳定性试验 将“2.2.2”项下的供试品溶液于室温放置，分别在0、2、4、6、8、10、12h进样10μl，经计算得橙皮苷峰面积RSD为0.80%(n=7)，表明供试品溶液在12h内稳定。

2.7 重复性试验 取同一批号的样品0.5g，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，平行制备6份。依法测定，结果橙皮苷含量的RSD=0.69%(n=6)，表明本法重复性良好。

2.8 加样回收率试验 取已知橙皮苷含量的供试品(批号：20130704，含量为5.1425 mg/g)6份，每份约0.5g，精密称定，分别置于锥形瓶中，精密加入橙皮苷对照品溶液(浓度为2.6913mg/ml)各1ml，再精密加入80%甲醇50ml，按“2.2.2”项下方法制成供试品，分别吸取供试品溶液10μl，注入HPLC仪，依法测定橙皮苷含量，计算加样回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果 (n=6)

2.9 样品的测定 取本品3批，按“2.2.2”项下方法制成供试品溶液，进样10依法测定，按外标法计算橙皮苷的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果 (n=3)

3 讨论

3.1 在试验中，取同一批号的供试品，采用甲醇、80%甲醇、乙醇分别考察了超声处理15min的考察方法，结果表明，以80%甲醇为溶剂，超声处理15min，再加热回流40min，方法简便，提取充分，方法最佳。

3.2 试验中，比较了参考文献1、2所述的流动相、柱温，以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)，柱温：35℃，制剂中橙皮苷能与其他组分的色谱峰很好分离，理论板数按橙皮苷峰计算不低于7000，且方法简便、实用，结果准确，重现性好，可作为加味皮康颗粒的质量控制方法。

[1]于玲，王晓飞，葛海生．加味皮康颗粒的质量标准研究[J]．中国民族民间医药，2013，22(23)：14-16．

[2]国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：441，475．

DeterminationoftheContentofHesperidininJiaweipikangGranulesbyHPLC

YU Ling,WANG Xiao-fei,GE Hai-sheng

Institute for Drug Control of the Chinese People′s Armed Police Forces , Beijing 102613,China

ObjectiveTo establish a HPLC method for determination of the content of Hesperidin in Jiawei pikang Granules.MethodThe separation column, SHISEIDO C18 column;dmobile phase,methanol-water- 0.1% Solution of phosphoric acid(12∶13∶75); column temperature was 35℃;detection wavelength was at 284nm; flow rate was 1.0ml/min.ResultThe calibration curve of Hesperidin had a good linear relationship in the range of 0.06336μg～2.5344μg (r=0.9998) , the average recovery was 98.83%, The RSD is 1.34%(n=6).ConclusionThe method is simple, accurate. It can be used for quality control of Jiawei pikang Granules.

HPLC；Jiawei pikang Granules；Hesperidin；Content Determination

于玲，副主任药师，主要从事药品检验。E-mail：yuling.y@163.com

R284.1

A

1007-8517(2014)19-0013-02

2014.08.15)