艾叶油对豚鼠平喘作用的实验研究

武汉职业技术学院生物工程学院，湖北 武汉 430074

艾叶油对豚鼠平喘作用的实验研究

万军梅郭群

武汉职业技术学院生物工程学院，湖北 武汉 430074

目的研究艾叶油的平喘作用。方法豚鼠随机分成模型对照组、阳性药物组(离体实验为心得安，整体实验为异丙肾上腺素)和艾叶油高、中、低剂量组，以豚鼠离体气管片实验和豚鼠哮喘模型，研究艾叶油的平喘作用。结果艾叶油可直接舒张豚鼠离体气管平滑肌；对豚鼠哮喘模型，艾叶油能延长哮喘发作的潜伏时间。结论艾叶油具有平喘作用。

艾叶油；支气管哮喘

艾叶为菊科植物艾Artemisia argyi Lev1. et Vent．的干燥叶，为临床常用中药材，在我国有悠久的应用历史。传统医学将艾叶归类为祛寒药，具温经止血，散寒除湿之功效，很少有艾叶用于哮喘的描述。20世纪70年代开始发现艾叶中提取的挥发油具有平喘作用，引起了研究者的关注。目前对艾叶油平喘作用的实验研究并不多见，且主要采用口服给药方式[1-2]。口服给药吸收较慢，血药浓度要经过一段时间后达到稳定的水平，一般仅用于预防及轻微哮喘的治疗，而喷雾和吸入给药，使药物直接到达气管，并在气管内形成有效的高浓度，具有速效性、安全性和方便性。前期已经报道了艾叶油长期雾化吸入给药无明显毒性[3]，本文采用雾化吸入给药方式对艾叶油的平喘作用进行研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物与试剂 艾叶油，由南阳张仲景现代中药发展有限公司提供，批号：20100510；盐酸异丙肾上腺素注射液，上海禾丰制药有限公司提供，批号：106014；心得安片，湖北华中药业有限公司提供，批号：20100605；磷酸组织胺，中国药品生物制品检定所提供，批号：0510-9411；氯化乙酰胆碱，Sigma公司进口分装；氯化钡等为市售分析纯。

1.1.2 动物 豚鼠，体重160～200g，400～500g，♀♂兼用，由湖北省实验动物中心提供，合格证号：SCXK(鄂)2008-0005。

1.1.3 仪器 超声雾化器，江苏鱼跃医疗设备有限公司出品。

1.2 方法

1.2.1 豚鼠活体哮喘模型 选幼年豚鼠，体重160～200g，♀♂各半，放入密闭的玻璃钟罩内，用超声雾化器喷入0.1%磷酸组胺和2%氯化乙酰胆碱混合液(1：1)15秒，喷雾停止后观察3分钟内豚鼠出现抽搐跌倒的时间，并记录从喷雾开始到抽搐跌倒的时间，称为引喘潜伏期。若引喘潜伏期大于120秒者则作为不敏感而落选[4]。挑选合格者50只按体重随机分为5组，分组及给药剂量见表1。艾叶油气雾吸入给药，每日一次，连续4天，阳性对照组为0.05%异丙肾上腺素溶液于实验当日气雾吸入30秒，模型对照组在造模后以等体积生理盐水代替待测药物。末次给药后5分钟，以上述同样条件引喘，观察并记录给药前后豚鼠引喘潜伏期，进行统计处理。

1.2.2 豚鼠离体哮喘模型 取400-500g豚鼠，♀♂均可，用木棰猛击脑部致昏迷，迅速剪开颈部皮肤，分离气管，按文献[5]方法制作成气管片标本。将气管片放入盛有克-亨氏营养液的麦氏浴槽内，保持恒温(37±0.5℃)，恒速供气，初始负荷为2g，标本平衡60-90分钟，期间换液3-5次。记录一段正常曲线作为基线后，加入氯化钡溶液0.1ml(使浴槽内终浓度为2mg/ml),观察记录曲线变化，当气管平滑肌张力升高到最高点时，加入不同浓度的艾叶油0.1ml(使浴槽内浓度分别为2.5mg/ml、0.5mg/ml和0.1mg/ml)，模型对照组加入同体积生理盐水，阳性组加入心得安0.1ml(浴槽内终浓度为2.0μg/ml)，模型对照组在造模后以等体积生理盐水代替待测药物。观察各组给药后10分钟曲线下降幅度，按下式求出艾叶油对氯化钡的解痉百分率。

1.2.3 统计学处理 用t-检验比较对照组与药物组间的差异，采用SPSS11.5软件进行统计学分析，P<0.05表示差异具有统计学意义，P<0.01表示差异有高度统计学意义。

2 结果

2.1 艾叶油吸入给药对豚鼠哮喘的影响 实验结果显示，与模型对照组比较，艾叶油100μl/kg能明显延长豚鼠的引喘潜伏期，差异具有统计学意义(P<0.05)，艾叶油50μl /kg和25μl /kg也表现出延长引喘潜伏期的趋势，但与模型对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明艾叶油对组胺和乙酰胆碱诱发的豚鼠哮喘具有抑制作用。结果见表1。

表1 艾叶油吸入给药对组胺和乙酰胆碱诱发豚鼠哮喘的影响 ±s)

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.2 艾叶油对离体豚鼠气管平滑肌的影响 实验结果显示，与模型对照组比较，艾叶油不同浓度对氯化钡引起的离体豚鼠气管平滑肌收缩有显著的拮抗作用，差异具有统计学意义(P<0.01)，表明艾叶油能有效缓解气管平滑肌的痉挛，并且艾叶油在实验剂量范围内具有明显的量效关系。结果见表2。

表2 艾叶油对离体豚鼠气管平滑肌的影响 ±s)

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3 讨论

支气管哮喘(bronchial asthma，简称哮喘)，是一种以可逆性气流受限为特征的气道慢性炎症性疾病，被世界医学界公认为四大顽症之一，被列为十大死亡原因之最。相关资料表明[6]，支气管哮喘的发病率在世界范围内为1%～13%，其高发人群在我国位居第一的是儿童,其次为老人。近年来虽然支气管哮喘的治疗方法不断发展，但其发病率和死亡率仍呈上升趋势，因此支气管哮喘的防治与研究一直是医学界研究的热点之一。

哮喘急性发作期，现代医学主要采用糖皮质激素、支气管扩张剂治疗。虽然能迅速控制病情，但副作用较大，且远期疗效不佳，复发率很高，反复发作则心、肺、肾等脏腑功能失调，并发各种慢性疾病。中药治疗哮喘具有较好的远期疗效, 以复制哮喘动物模型筛选中药及其有效部位, 并在此基础上进行干预成为该研究领域的重要方法。本实验研究了艾叶油对支气管哮喘的作用，离体试验结果表明，艾叶油能明显缓解氯化钡引起的离体豚鼠气管平滑肌的痉挛，具有舒张支气管平滑肌的作用；整体动物试验中，艾叶油气雾吸入给药能明显延长豚鼠的引喘潜伏期，对组胺和乙酰胆碱诱发的豚鼠哮喘具有抑制作用，说明艾叶油对支气管哮喘具有整体治疗作用。上述结果为艾叶油在临床上雾化吸入给药缓解哮喘急性发作提供了实验依据。

[1]黄学红，谢元德，朱婉萍，等. 艾叶油治疗慢性支气管炎的实验研究[J]. 浙江中医杂志，2006,41(12)：734-735.

[2]魏国会, 杜梅素, 宋宁，等. 艾叶油的平喘作用研究——小鼠卵蛋白复制法[J]. 时珍国医国药，2010,21(1)：86-87.

[3]万军梅，郭 群，付 杰. 艾叶油雾化吸入对大鼠的长期毒性研究[J]. 亚太传统医药，2013，9(5)：15-18.

[4]王北婴，李仪奎.中药新药研制开发技术与方法[M]，上海：上海科学技术出版社，2001:491-495.

[5]徐叔云，卞如濂，陈修. 药理实验方法学[M].第三版.北京：人民卫生出版社，2003：905.

[6]申艳，李凯. 心理及社会因素对支气管哮喘影响的研究进展[J]. 医学综述，2013，19(15)：2784-2787.

StudyontheEffectofvolatileoilfromArtemisiaargyionBronchialAsthma

WAN Jun-mei GUO Qun

Biological Engineering College，Hubei Province, Wuhan 430074,China

Objective To study on the effect of volatile oil from Artemisia argyi(VOFAA) on bronchial asthma. Methods The Guinea pigs were randomly divided into five groups：contro1，propranolol in vitro or isoprenaline in vivo，and VOFAA of high dose，VOFAA of moderate dose，VOFAA of low dose．Adopted the Guinea pig’s tracheal slice test in vitro and asthma test in vivo respectively to study the effect of VOFAA on bronchial asthma. Results VOFAA with all three doses showed the effect of the relaxation of the contractive tracheal slices in vitro，and the prolongation of the asthma delitescence in vivo. Conclusion VOFAA has positive effect on bronchial asthma.

volatile oil from Artemisia argyi ; Bronchial asthma

万军梅(1969-)，女，湖北洪湖人，硕士，副教授，主要从事药理学的教学与科研工作。E-mail: jmwan1028@163.com。

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1007-8517(2014)09-0010-02

2014.03.08)