UHRF1在肝细胞肝癌中的表达及意义

施国明 蔡加彬 俞静娴 柯爱武 董兆如 张弛 张鹏飞 邱双健 孙惠川 周俭 樊嘉

(复旦大学附属中山医院肝外科，上海 200032)

UHRF1(Ubiquitin-like，containing PHD and RING finger domains 1)作为表观基因组的重要调控因子，与DNA甲基化的维持有关，参与多种生理和病理过程[1-2]。近来文献报告，UHRF1在乳腺癌[3]、膀胱癌[4]、前列腺癌[5-7]、非小细胞肺癌[8]等多种肿瘤组织和细胞中表达上调。本研究采用免疫组织化学方法检测肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)患者癌组织及癌旁组织中UHRF1的表达水平，并分析了UHRF1与HCC临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2005—2008年在复旦大学附属中山医院肝外科行肿瘤根治性切除术且随访资料完整的556例HCC患者的肿瘤标本，经病理学证实诊断。556例中男性473例，女性83例。所有患者术前均未接受放疗、化疗；标本均在手术切除后15 min内采集。

1.2 试剂 鼠抗人UHRF1单克隆抗体(美国BD公司)；辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗、免疫组织化学SP试剂盒及二氨基联苯胺(3,3′-diaminobenzidine，DAB)试剂盒均购自上海长岛生物技术公司。

1.3 免疫组织化学方法检测UHRF1蛋白的表达 参照免疫组织化学SP试剂盒说明书进行。细胞核内见棕褐色颗粒定义为UHRF1表达阳性，细胞核无棕褐色颗粒为阴性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0统计软件处理，计数资料组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 UHRF1蛋白在HCC组织中的表达 经HE染色确定HCC诊断(图1A～D)。免疫组织化学SP法结果显示，HCC患者UHRF1蛋白阳性表达主要定位于癌细胞的细胞核，呈棕黄色或棕褐色，染色均一，不同患者个体间UHRF1蛋白阳性表达情况差异较大(图1 E、G)；HCC患者癌组织中UHRF1蛋白表达阳性率为59%，癌旁组织中UHRF1呈阴性表达(图1 F、H)。

图1A～D为病例1(A为癌、B为癌旁)、病例2(C为癌、D为癌旁)的HE染色，×200；E、F为病例1，UHRF1蛋白在HCC组织阳性表达(E)，在癌旁组织阴性表达(F)，DAB染色，×200；G～H为病例2，UHRF1蛋白在HCC组织(G)及癌旁组织(H)阴性表达，DAB染色，×200

2.2 UHRF1蛋白表达与HCC临床病理特征的关系 UHRF1蛋白表达与HCC患者肿瘤大小(P<0.01)、分化程度(P<0.05)、微血管侵犯(P<0.01)相关，而与年龄、性别、血清甲胎蛋白水平、血清丙氨酸氨基转移酶水平、有无肝硬化、肿瘤数目、肿瘤是否有包膜无关(P>0.05)，见表1。

表1 UHRF1蛋白表达与HCC临床病理特征的关系

续表

3 讨 论

UHRF1是目前在哺乳动物细胞中已知的唯一能特异性结合甲基化H3和甲基化CpG的蛋白，参与调节细胞周期进程，与细胞增殖密切相关[1-2,9-10]。UHRF1编码蛋白与特定的DNA序列结合后，进一步招募组蛋白泛素化酶，影响染色质的结构，从而发挥调控基因表达的作用[9]。UHRF1的SRA域在DNA复制过程中识别半甲基化的DNA子链，并使DNMT1聚合在DNA链上，将半甲基化DNA双链转变成完全甲基化DNA，从而使得DNA甲基化状态在复制和传代过程中得以维持[1-2]。

多项研究[3-7]表明，UHRF1在多种肿瘤中表达上调，UHRF1过表达通过影响细胞的细胞周期、凋亡、抑癌基因失活等多种方式影响肿瘤的发生与进展。本研究发现，UHRF1蛋白在HCC癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织，这提示UHRF1可能与HCC的发生相关；且UHRF1蛋白过表达与HCC的恶性表型如肿瘤大小、分化程度和微血管侵犯有关，说明UHRF1过表达可能参与HCC的进展，但确切的分子机制有待进一步研究。本研究提示UHRF1过表达在HCC发生发展中起重要作用，进一步阐述其在HCC发生发展的分子机制，有望为HCC的防治提供新的思路。

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[8]Daskalos A,Oleksiewicz U,Filia A,et al.UHRF1-mediated tumor suppressor gene inactivation in nonsmall cell lung cancer[J].Cancer,2011,117(5):1027-1037.

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