黄芪、大黄配伍对慢性肾功能衰竭大鼠血生化及抗氧化能力的影响

尹翠翠，杨 勇，容 蓉

（山东中医药大学，山东济南250355）

慢性肾功能衰竭（chronic renal failure，CRF）是多种原发或继发性肾脏疾病发展至晚期的共同归宿，主要表现为肾功能的减退、代谢产物潴留、水电解质及酸碱平衡失调，严重威胁人类健康［1］。中医治疗本病总的原则是扶正祛邪，依据不同的发病阶段及发病类型分别采用补益肾元法、健脾补肾法、调理脾胃法及泄浊解毒法等治疗方法［2］。黄芪味甘性温，具有补气升阳、提高机体免疫力的作用；大黄性寒味苦，具有苦寒降泄、祛湿热排浊毒的作用。两者药性相反，但均在慢性肾功能衰竭的临床治疗中疗效显著，已得到广泛应用。本课题拟以血肌酐（Cr）、尿素氮（UREA）、胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、钙（Ca）、磷（P）等生化指标及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化脂质（LPO）等指标为检测依据，探讨大黄、黄芪配伍后治疗慢性肾功能衰竭的药理学机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 Wistar雄性大鼠，体重170 g～200 g，由山东大学医学院实验动物中心提供，合格证号：鲁动质字20001003；饮用水均为自来水，自由摄食及进水。

1.1.2 实验仪器 全自动生化分析仪Beckman 700，723可见光分光光度仪，上海第三分析仪器厂；FJ-2021 γ放射免疫计数器，西安国营二六二厂；GL20A全自动高速冷冻离心机，湖南仪器仪表总厂离心机厂；LXJ-II离心沉淀机，上海医用分析仪器厂；电热恒温水浴箱，上海医疗器械七厂。

1.1.3 试剂与药材 腺嘌呤，批号：000807，购自上海丽珠东风生物技术有限公司。尿素氮，批号：010101；肌酐，批号：010301；钙，批号：000901，磷：批号：010101，均为北京中生生物工程高技术公司生化试剂盒。黄芪、大黄购自建联中药店，经本校中药鉴定教研室鉴定符合《中华人民共和国药典》2010年版标准［3］。

1.2 实验方法

1.2.1 各实验组溶液的制备 黄芪大黄组：按照药物比例黄芪∶大黄（3∶1）称取一定量药物，加适量水浸泡30 min，水煎煮2次，合并滤液，水浴浓缩成每毫升制剂相当于生药1 g，置4℃冰箱备用。黄芪组：称取一定量的黄芪，制备方法同上。大黄组：称取一定量的大黄，制备方法同上。

1.2.2 分组及模型制备 大鼠固体饲料喂养2 d～3 d，所示正常生长后随机分为5组：分别为正常组、模型组、黄芪大黄组、大黄组、黄芪组。除正常组外，其他各组参考郑平东［4］报道的方法，将3%的腺嘌呤10 mL/（kg·d）给大鼠灌胃，连续30 d。随着灌胃日数的增加大鼠日益消瘦，模型组大鼠出现生长抑制现象，并出现多饮、多尿、体毛干枯不齐、精神萎靡、畏寒拱背现象即为造模成功的标志。造模灌胃腺嘌呤后，间隔6 h，中药干预组每天分别用不同的中药水煎液灌胃4 g/kg体重，正常组和模型组灌胃等量的自来水。连续用药5 w。

1.2.3 指标检测 实验5 w后各组大鼠肝素抗凝取血，置冷冻离心机中，3000 r/min离心10 min，取上清，-20℃保存待用。采用Beckman 700全自动生化分析仪测定 UREA、Cr、钙（Ca）、磷（P）；采用光化学扩增法测定血浆中SOD的含量；采用TBA反应比色法测定血浆中MDA的含量［5］。

1.3 统计学方法

实验数据采用SPSS软件进行统计处理，计量资料均以均数±标准差（±s）表示，F检验（方差分析）进行组间差异分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 对 CRF 大鼠血浆中 UREA、Cr、CHOL、P、TG、Ca的影响

结果见表1、表2。

表1 对CRF大鼠 UREA、Cr的影响 （±s）

表1 对CRF大鼠 UREA、Cr的影响 （±s）

注：与正常组比较，1）P<0.01；与黄芪组比较，2）P<0.05

组别nUREA（mmol/L）Cr（μmol/L）正常组 105.69±1.6081.42±7.11模型组 822.14±8.591）2）183.52±43.221）黄芪大黄组 820.85±7.062）153.38±41.65大黄组 724.09±3.022）148.88±46.89黄芪组 833.75±19.95209.88±99.69

表2 对 CRF 大鼠 CHOL、TG、Ca、P 的影响 （±s）

表2 对 CRF 大鼠 CHOL、TG、Ca、P 的影响 （±s）

注：与模型组比较，1）P<0.01

组别 n CHOL TG Ca（mmol/L）P（mmol/L）正常组 105.35±5.382.73±1.231.12±0.5611.35±2.581）模型组 87.68±4.483.51±1.231.06±0.4717.88±3.45黄芪大黄组 84.30±1.892.74±0.241.22±0.4711.69±2.081）大黄组 75.59±2.003.05±0.741.13±0.8111.75±3.501）黄芪组 84.52±1.692.65±0.210.78±0.1312.07±3.501）

由表1、表2可以看出，与正常组比较，模型组血浆中 UREA、Cr、P 明显升高（P<0.01），说明造模成功；黄芪大黄组、大黄组、黄芪组大鼠血浆的P水平与模型组相比则显著降低（P<0.01）；黄芪大黄组与模型组相比有降低 UREA、Cr、胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）的趋势；与模型组相比，黄芪大黄组有升高血钙的趋势。

2.2 对大鼠血浆中SOD、LPO的影响

结果见表3。

表3 对CRF大鼠血浆SOD、LPO的影响 （±s）

表3 对CRF大鼠血浆SOD、LPO的影响 （±s）

注：与模型组比较，1）P<0.01

组别 n SOD（μg/mL）LPO（mmol/L）正常组 1085.02±10.764.54±0.781）模型组 877.22±9.248.72±0.50黄芪大黄组 877.45±19.434.48±1.301）大黄组 778.65±22.034.73±1.361）黄芪组 881.76±6.864.32±2.391）

由表3可见，SOD含量各组间相比，差异虽无统计学意义（P>0.05），但与正常组比较，模型组SOD含量有降低的趋势；与模型组相比，黄芪组SOD含量有升高的趋势，而黄芪大黄组、大黄组变化不明显。血浆LPO含量，模型组较正常组显著升高（P<0.01）；与模型组相比，黄芪大黄组、大黄组、黄芪组都能明显地降低大鼠血浆中LPO含量（P<0.01）。

3 讨 论

CRF是各种原因引起的肾脏疾病持续进展的最终结局，是一种进行性的、不可逆的临床综合征，其临床症状复杂，死亡率高［6］。中医学对慢性肾功能衰竭的认识自《内经》时期开始，经过长期的临床医学发展，目前对此病的治疗已有很大突破。研究多认为此病主要与脾肾虚损有关，诱因为外邪致虚劳，基本病机为本虚标实，正虚则包括气血阴阳的虚损［7］，邪实为湿浊邪毒壅阻。因此临床的基本治疗原则是扶正祛邪。

大黄性寒味苦，入脾、胃、大肠、心包、肝经，具有清热泻火、凉血祛瘀、解毒功效，其临床应用广泛，除传统的泻下作用外，其临床应用领域扩展到消化系统、免疫系统、泌尿系统等方面［8］。氮代谢紊乱是CRF患者的突出表现，大量实验和临床研究均证明，大黄具有改善氮代谢的作用［9］。研究报道，大黄对肾脏代偿性增生的保护作用是通过降低CRF大鼠血清中肌酐、尿素氮水平，改善肾性贫血症状，调整钙、磷、镁等电解质代谢紊乱，纠正酸中毒，改善机体蛋白质代谢的紊乱状态等途径完成［6］。黄芪味甘性温，具有补气升阳、固表止汗、托毒排脓、利水消肿、敛疮生肌的功效。现代药理研究表明，黄芪具有增强机体免疫功能，强心降压、降血糖、利尿、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤、抗病毒、镇静、镇痛等作用。黄芪对缺血性肾脏有保护作用［10-11］，通过抗氧化、清除自由基、促进细胞代谢、利尿消肿、减少尿白蛋白排泄、促肝脏合成白蛋白、降脂、调节免疫、降血压等作用，保护肾脏细胞免受伤害。

本实验结果表明，黄芪大黄组与模型组相比有降低尿素氮、肌酐代谢产物含量的趋势，且作用强度优于黄芪组。对于胆固醇、甘油三酯，黄芪大黄组与模型组相比，都有降低的趋势，其作用强度优于大黄组；对于钙，黄芪大黄组与模型组相比，有升高的趋势，且作用强度优于大黄组和黄芪组，表现出改善氮代谢作用，纠正钙、磷、镁等电解质代谢紊乱，纠正酸中毒，改善机体蛋白质代谢的紊乱状态，对肾脏代偿性增生有一定的保护作用；黄芪大黄组、大黄组、黄芪组与模型组相比，超氧化物歧化酶含量有升高的趋势，但黄芪大黄组、大黄组变化不明显；三组血浆中LPO的含量显著降低（P<0.01），表现出清除自由基作用，改善由于过多的自由基对肾功能造成的进一步损害。总之，黄芪与大黄配伍、黄芪或大黄单用均可通过不同的作用途径起到改善CRF的作用，黄芪与大黄配伍后总体作用效果强于单味药。综合评价认为，大黄、黄芪配伍后相互促进、协同起效，表现出较强的药理活性，对CRF有较好的治疗效果。

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［3］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.北京：中国医药科技出版社，2010.

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［7］赵凯彬，阮诗玮.中医药治疗慢性肾功能衰竭现状与进展［J］.中医药通报，2010，9（1）：63-65.

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