HCVAb-IgG阳性与HCV-RNA载量的关系探讨

赵亚娟 孙孟甜 杨振丽

HCVAb-IgG阳性与HCV-RNA载量的关系探讨

赵亚娟 孙孟甜 杨振丽

目的 研究丙肝抗体IgG(HCVAb-IgG)阳性者其丙肝病毒核酸(HCV-RNA)载量的阳性率,并探讨其与HCV-IgG的S/CO值之间的关系。方法 HCVAb-IgG采用ELISA法, HCV-RNA采用荧光定量PCR法。结果 统计248例HCVAb-IgG阳性者, HCV-RNA阳性150例, 阳性率60.5%；同时统计HCVAb-IgG 的S/CO值, 观察其与HCV-RNA结果的相关性。结论 HCV-RNA阳性率与HCVAb-IgG的S/CO值一致, 但HCV-RNA含量与HCVAb-IgG S/CO值无显著相关性(P＞0.05), 不能以S/CO值衡量HCV-RNA结果。

丙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒抗体；丙型肝炎病毒核酸载量

丙型肝炎病毒(HCV)是急慢性丙型肝炎及非甲非乙型肝炎的主要病原体, 其极易引起该病慢性化, 少数患者易发展为肝硬化及肝癌［1］, 因此早期诊断和发现感染者很重要。目前丙型肝炎病毒抗体(HCVAb-IgG)及丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量是诊断丙型肝炎的主要病原学指标, HCVAb-IgG间接反映HCV的感染和既往感染, HCV-RNA反映了患者血清中是否存在病毒血症［2］。临床上习惯检测HCVAb-IgG作为有无HCV感染的初筛, 阳性者再进一步检测病毒载量的多少以决定是否需抗病毒治疗。在此作者回顾了2年来HCVAb-IgG阳性者所测HCV-RNA的阳性率及与HCVAb-IgG的S/CO值的关系, 总结报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取248例2012年1月~2013年12月本院的所有PCR法HCV-RNA检测数据和同期ELISA测HCVAb-IgG的数据做统计分析。其中男172例, 女76例。年龄2个月~84岁。

1. 2 试剂与方法

1. 2. 1 HCVAb-IgG检测 使用北京万泰生物药业股份有限公司提供的试剂盒检测, 用酶标仪双波长测定各孔OD值,测得的结果OD值>4定为阳性。

1. 2. 2 HCV-RNA检测 采用上海科华生物药业股份有限公司提供的试剂盒及质控品, 核酸提取及反应体系的配制严格按照说明书操作。结果判断：测定结果<103IU/ml报告低于检测下限；103~107IU/ml 的样本按照测定结果直接报告。

1. 3 仪器 艾德康全自动酶免一体机, Roche LightCycler 1.5扩增仪。

1. 4 统计学方法 采用SPSS11.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验；计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 不同HCVAb-IgG的 S/CO值与HCV-RNA阳性率对应关系见表1。248例HCVAb-IgG阳性样本中, HCV-RNA阳性150例, 阳性率占60.5%。这与文献报道的60%~70%相一致［3］。随着HCVAb-IgG S/CO的增大, HCV-RNA阳性率有增高的趋势, 但不是如某些报道统计的在高S/CO值阳性率可达到100%［4］, 在高S/CO值, 仍有约32%的样本HCVRNA结果为阴性。在RNA阴性组也有不少高于阳性组的S/ CO值。

表1 不同HCVAb-IgG(S/CO)值与HCV-RNA阳性率(n, %)

2. 2 不同HCVAb-IgG的 S/CO值与HCV-RNA载量比较,见表2。在低HCVAb-IgG S/CO段仍有高的HCV-RNA载量值, 在高S/CO段也有低的载量值, 即HCV-RNA载量不随着HCVAb-IgG的S/CO值的增大而一定增高。故不能以S/ CO值衡量HCV-RNA结果的高低。这与陈作芬等［5］报道的HCV-RNA含量与HCVAb的S/CO值无显著相关性一致。

表2 不同HCVAb-IgG(S/CO)值与HCV-RNA载量

3 讨论

丙型肝炎是HCV经血液传播的一种病毒感染性疾病。HCV感染的病原学检测是诊断和治疗决策的唯一依据。ELISA法检测HCVAb是目前我国判断丙肝的常规方法,是HCV感染初筛的首选指标, 但HCVAb阳性只说明患者可能曾经感染过HCV, 不能区别现症感染或既往感染, 又因HCVAb产生后可长期存在, 对诊断和治疗的评价意义不大。HCV-RNA的检测是HCV存在的最直接、最敏感和最特异的指标, 可提示HCV是否存在及是否在体内复制。在初筛HCVAb-IgG阳性后再检测HCV-RNA更合理。实际工作中二者检测不一致的原因既有检验方法的局限性, 也有疾病及不同个体的差异, 具体分述如下。

3. 1 影响HCVAb-IgG检测的因素

3. 1. 1 HCVAb-IgG检测采用ELISA法, 该法影响因素较多,如血清中的纤维蛋白原、加样时间的长短、温育时间、洗板的过程, 都是造成假阳性的原因。

3. 1. 2 HCVAb-IgG检测的是IgG抗体, 自身免疫性疾病等患者标本含有某些干扰因素(类风湿因子、补体、高浓度的非特异性免疫球蛋白、交叉反应物质等)时会导致假阳性结果。

3. 2 与PCR检测相关的因素

3. 2. 1 HCVAb阳性提示机体可能有HCV感染史, 但当机体病毒被清除, 病情处于恢复期, HCV-RNA可能为阴性, 而抗体却会持续存在较长时间。

3. 2. 2 HCVAb-IgG是检测患者血清中针对HCV基因组编码抗原某区域而产生的抗体, 而PCR是检测患者血清中的HCV。第三代ELISA试剂能检测出针对不同区域抗原产生的多种抗体, 而PCR法所用引物固定, HCV有显著的异原性和多变性, 并非同一引物适用于所有HCV毒株, 故当病毒基因变异时本法检测不出变异的RNA。

3. 2. 3 患者曾使用干扰素抗病毒治疗, 干扰和抑制了HCVRNA的复制, 受染肝细胞释放到外周血循环中的病毒载量减少, 而抗病毒治疗不影响HCVAb的存在。对照了数例干扰素治疗前后的HCV-RNA结果与HCVAb的S/CO值, 发现多数抗病毒治疗后病毒载量降低但S/CO值变化不大。提示HCVAb-IgG的S/CO值无法对HCV的感染及治疗情况进行动态检测。

3. 2. 4 HCV在血液中复制的阶段性。虽然肝内HCV持续存在, 但病毒血症可能出现波动。即血清HCV-RNA呈波浪状起伏, 当HCV-RNA达波谷时, 检测结果即为阴性。

3. 2. 5 PCR灵敏度虽然很高, 但有一定的检测线性范围。当病毒载量<103时, 因低于其阈值检测不到, 故当部分患者血清中HCV量极少时, 虽处于复制期, 低于检测阈值也会显示阴性结果。

综上所述, ELISA法检测HCVAb-IgG在初步的丙肝诊断中因操作简单成本低, 作为初筛的意义大, 其地位不可取代。荧光定量PCR能够查明抗体阳性者体内的HCV复制水平, 以便确定是否需要进行抗病毒治疗, 或预测及评价抗病毒治疗的效果, 两种检测的联合在临床上具有重要的使用价值及临床意义, 是完善诊断、评价疗效比较有益的方式。

［1］ 黄秀琼, 吴英.110例丙肝患者HCV-RNA载量及抗-HCV与肝功能指标的相关性研究.国际检验医学杂志, 2012, 33(15): 1809-1810.

［2］ 王茉莉, 姜涛, 潘煜, 等. HCV感染患者436例丙型肝炎病毒载量与抗-HCV及ALT异常的关系.中国老年学杂志, 2011, 31(5):770-772.

［3］ 孙军红, 张永乐, 王巧燕, 等.抗-HCV抗体检测与荧光定量RT-PCR检测在丙型肝炎诊断中的比较.中国卫生检验杂志, 2009, 19(7):1562.

［4］ 罗娜.抗-HCV(OD/CO)值与HCV-RNA阳性率及载量深析.国际医药卫生导报, 2012, 18(1):82-84.

［5］ 陈作芬, 曹永平.丙肝患者治疗前后HCV-RNA与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶水平的分析.检验医学与临床, 2010, 7(12): 1175-1177.

2014-08-29］

467000 平顶山市平煤集团总医院检验科