龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平与2型糖尿病及慢性牙周炎的关系

程亚玮，岳二丽，尚 伟，郭留云#

1)郑州大学口腔医学院牙周科 郑州 450052 2)中国人民解放军第153中心医院检验科 郑州 450042

龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平与2型糖尿病及慢性牙周炎的关系

程亚玮1)，岳二丽1)，尚 伟2)，郭留云1)#

1)郑州大学口腔医学院牙周科 郑州 450052 2)中国人民解放军第153中心医院检验科 郑州 450042

#通讯作者，女，1964年9月生，主任医师，教授，研究方向：牙周病的病因与防治，E-mail：glyun@163.com

龈沟液；超敏C反应蛋白;肿瘤坏死因子-α;2型糖尿病;慢性牙周炎

研究[1-3]表明，糖尿病与牙周病存在共同的危险因素，二者均被认为是炎症相关性疾病。人体内超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)水平与炎症程度密切相关[4]，所以研究上述两类患者龈沟液中这些因子的水平，对疾病诊断具有重要的临床意义[5]。目前，关于此方面的研究多以血液为标本，而对2型糖尿病(type 2 diabetus mellitu，T2DM)伴牙周炎患者龈沟液中hs-CRP 和TNF-α水平的检测及相关性研究极少。该研究通过检测、分析慢性牙周炎(chronic periodontitis，CP)和T2DM患者龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平，进一步探讨龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平检测的临床意义。

1 对象与方法

1.1研究对象从郑州大学第一附属医院和河南省武警医院内分泌科分别选取2型糖尿病伴牙周炎(T2DM-CP)患者及T2DM患者各30例，从河南省口腔医院牙周科选取CP患者30例，从河南省口腔医院职工中选取健康者30人(正常组)。

1.2诊断标准①T2DM：按WHO(1999年)的诊断标准被诊断为T2DM至少6个月以上；空腹血糖≥7.0 mmol/L，餐后血糖≥11.1 mmol/L或糖耐量实验2 h血糖≥11.1 mmol/L，无其他全身疾病；一直采用口服降糖药物或注射胰岛素治疗；所选对象同时满足以上条件。②CP：全身情况良好；全口牙周至少有6个位点附着丧失超过3 mm，探诊深度超过4 mm；X线显示多个位点牙槽骨吸收超过根长的1/3；至少半年内未接受过任何牙周治疗[6]。③正常：附着丧失≤1 mm或仅有牙龈炎，无系统性疾病。

1.3龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平的测定每位受试者选取一颗第一恒磨牙或第二恒磨牙作为受试牙，其颊侧至少有1个位点探诊深度≥4 mm且牙颈部无龋损和充填体，以探诊深度最深位点作为龈沟液检测位点。采用吸潮纸尖收集龈沟液，将每份纸尖用200 μL PBS缓冲液浸泡30 min后离心10 min，收集洗脱液，-20 ℃保存备用。 采用罗氏Cobas 8000全自动生化分析仪检测洗脱液中hs-CRP水平，采用ELISA法检测TNF-α水平，两种试剂盒均由上海西唐生物科技公司提供，操作步骤按试剂盒说明进行。

1.4统计学处理所得数据应用SPSS 16.0进行统计学处理。4组年龄、BMI的比较采用单因素方差分析，性别构成的比较采用χ2检验，4组龈沟液中TNF-α和hs-CRP水平的比较采用2×2析因设计的方差分析，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 4组一般情况的比较见表1。4组受试者年龄及性别构成差异均无统计学意义。

2.2 4组龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平的比较

见表2。由表2可知, T2DM、CP组hs-CRP、TNF-α水平显著高于正常组，T2DM组高于CP组，而T2DM-CP组并没有表现出较T2DM组更高的水平。

表1 4组受试者一般情况的比较

*:与正常组比较，P<0.05。

表2 4组龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平的比较

3 讨论

近年来研究[1-3]表明：牙周炎不仅破坏口腔的健康，而且严重危害人们的全身健康，是多种疾病发病的危险因素，如糖尿病、心脑血管疾病、呼吸系统疾病等。T2DM是一种常见的内分泌代谢疾病，其与牙周病存在共同的危险因素，且互为高危因素，牙周炎诱导产生的促炎递质可调节胰岛素抵抗和降低胰岛素活性[2-3，7]。

CRP是由细胞因子白细胞介素-6诱导肝脏合成的一种典型的非特异性的急性时相蛋白，属分泌型糖蛋白，目前hs-CRP水平已成为反映人体内炎症症状的敏感且可靠的指标。TNF-α是一种由单核巨噬细胞和脂肪细胞产生的多功能细胞因子，是一种很有前景的探查炎症性疾病和宿主反应的指标。牙周病变组织中TNF-α含量明显高于正常牙龈组织[8]，并且牙周炎患者血清TNF-α水平与牙周炎活动性及牙周组织破坏的严重程度呈正相关[9]。TNF-α可能通过降低牙周膜纤维细胞碱性磷酸酶活性，抑制牙周膜纤维细胞向成骨细胞的功能转化，从而发挥破骨吸收作用。糖尿病患者糖脂代谢障碍，高血糖、高血脂可导致非酶类糖基化产物聚集，与单核巨噬细胞表面高亲和力受体结合，使单核巨噬细胞分泌过多的与牙周病相关的细胞因子。

该研究结果表明，CP、T2DM和T2DM-CP组患者龈沟液中hs-CRP和TNF-α水平均较正常组有不同程度的升高，但T2DM-CP组患者龈沟液中二者的水平并未较T2DM单独疾病组更高。研究结果进一步证实了hs-CRP与CP、T2DM的密切关系，hs-CRP是两种疾病发生的最强预测因子[10]。另外，牙周炎是一种由微生物引起的感染性疾病，这种炎症反应也可由hs-CRP水平的升高体现出来。

该研究中作者采用与传统常用滤纸条法不同的吸潮纸尖法提取患者龈沟液，用全自动生化分析仪检测hs-CRP水平，使所得数据更真实、更客观。龈沟液是牙龈结缔组织的渗出液，是机体内外交汇的一个微观界面环境，能反映宿主对病原因子的自然反应状况，故对龈沟液中hs-CRP和TNF-α的检测可以定量掌握病情的活动性和发展趋势，对基础研究具有一定的参考价值，对了解CP和T2DM的病情变化有重要的临床意义。

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(2014-02-14收稿 责任编辑王 曼)

10.13705/j.issn.1671-6825.2014.03.037