宫颈鳞癌组织中TS和TopoⅡα的表达与新辅助化疗效果的关系

邓克红，崔金全，卢书芳

郑州大学第二附属医院妇产科 郑州 450014

宫颈鳞癌组织中TS和TopoⅡα的表达与新辅助化疗效果的关系

邓克红，崔金全#，卢书芳

郑州大学第二附属医院妇产科 郑州 450014

#通讯作者，女，1962年11月生，博士，教授，研究方向：妇科肿瘤，E-mail：jinquan_cui@163.com

宫颈鳞癌；新辅助化疗；化疗疗效；胸苷酸合成酶；DNA拓扑异构酶Ⅱα

目的：探讨宫颈鳞癌组织中胸苷酸合成酶(TS)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)的表达与新辅助化疗效果的关系。方法采用免疫组化SP法检测54例宫颈鳞癌患者宫颈组织中TS、TopoⅡα的表达。结果54例宫颈鳞癌患者中34例对NACT有反应，总有效率为72.2%，无效率为27.8%。宫颈癌患者组织中TS、TopoⅡα的表达水平与NACT疗效有关(χ2=7.020和9.026，P<0.05)。TS低表达者的化疗有效率高于高表达者，TopoⅡα高表达者的化疗有效率高于低表达者。结论TS低表达和TopoⅡα高表达的患者均可从NACT中获益，两者是否可以作为宫颈癌患者NACT疗效指标值得进一步研究。

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，其中90%～95%的宫颈癌为鳞状细胞癌(简称鳞癌)。传统手术和放疗可使早期宫颈鳞癌治愈率达到80%以上；而对于要保留卵巢和阴道功能的中晚期年轻患者，常采用新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy，NACT)缩小肿瘤体积、降低肿瘤临床分期后再进行手术治疗[1]。铂类药物联合紫杉类药物是宫颈癌术前化疗最常用的方案之一[2-3]。作者分析了宫颈鳞癌组织中胸苷酸合成酶(TS)、DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)与NACT的关系，探讨二者对宫颈鳞癌NACT疗效的预测价值。

1 对象与方法

1.1研究对象选取郑州大学第二附属医院2008年2月至2013年2月收治的54例宫颈鳞癌患者，年龄23～69岁，中位年龄40岁。临床分期(FIGO，2012年)：Ⅰ期10例，Ⅱ期44例；病理分级：高分化21例，中低分化33例。54例患者均无化疗禁忌证，给予1～3个疗程以铂类为主的联合化疗(紫杉醇150 mg/m2+卡铂500 mg/m2)，化疗结束后2周评价临床疗效，再行根治性手术。收集其化疗前宫颈活检组织及化疗后手术标本蜡块进行研究，所有活检及手术组织标本均经病理证实为宫颈鳞癌。

1.2化疗疗效判定化疗结束后2周参照国际抗癌联盟(UICC)疗效判定标准[3]评价疗效：①完全缓解(CR)指肉眼观肿瘤完全消失，且无新病灶。②部分缓解(PR)指肿瘤缩小≥50%，且无新病灶。③病情稳定(SD)指肿瘤缩小<50%，无新病灶。④进展(PD)指肿瘤无缩小或有新病灶出现。其中CR和PR为有效，SD和PD为无效。

1.3NACT前后宫颈癌组织中TS与TopoⅡα表达的检测即用型鼠抗人TS单克隆抗体、即用型TopoⅡα单克隆抗体、DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。采用免疫组化SP法检测标本中TS和TopoⅡα的表达，严格按试剂说明书操作，用PBS代替一抗为阴性对照，已知阳性组织为阳性对照。结果判定：TS阳性信号定位于胞浆或胞膜，TopoⅡα阳性信号定位于胞核或胞浆，二者均呈棕黄色或棕褐色颗粒。采用全自动显微镜和图像采集分析系统，数码显微镜捕捉免疫组化图片，根据阳性染色区域的不同调节整幅图像的分割范围及阈值，图像采集分析系统自动计算阳性细胞占总细胞的百分比及阳性区平均积分光密度，均以平均积分光密度值≥120.5为高表达，<120.5为低表达。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0进行分析。应用χ2检验比较宫颈鳞癌不同临床病理特征与NACT临床疗效的关系，检验水准α=0.05。

2 结果

54例行NACT的宫颈鳞癌患者中 CR 5例，PR 34例，总有效率为72.2%；其余15例表现为SD，无效率为27.8%。宫颈鳞癌不同临床病理特征与NACT临床疗效分析结果见表1。不同的临床分期、病理分级和年龄组患者间NACT疗效的差异无统计学意义，而宫颈癌组织中TS高表达、TopoⅡα低表达者NACT疗效较差。

表1 宫颈鳞癌不同临床病理特征与NACT临床疗效分析 例(%)

*:校正χ2检验。

3 讨论

随着新化疗技术的不断发展，化疗在宫颈癌的治疗中日益受到重视，目前临床上使用的NACT能缩小肿瘤的体积和范围、降低肿瘤的分期、增加患者的手术机会[4-5]，NACT的近期有效率可达54%～83%。但对于化疗不敏感者，既耽误了手术时机又加重了患者的经济负担。因此寻找化疗敏感的生化指标，预测患者对化疗的反应性，对宫颈癌的治疗将具有十分重要的意义。

TS是胸苷合成的限速酶，能催化生物体内尿嘧啶脱氧核苷(dUMP)甲基化为胸腺嘧啶脱氧核苷(dTMP),而dTMP是细胞DNA合成所必需的,因此，抑制TS就能抑制DNA的生物合成，进而抑制细胞的生长或增殖[6]。有文献[7]报告在多种肿瘤中TS低表达者可以从NACT中获益。该研究结果显示，NACT有效组中TS低表达高于无效组。有学者[8-9]对65例胃癌行NACT，化疗有效和无效者间肿瘤组织TS mRNA水平差异显著，在28例低TS mRNA水平者中15例化疗有效，而29例高TS mRNA水平者仅有5例化疗有效，作者的研究结果与之相符。

TopoⅡα的表达依赖于细胞周期，其高表达可导致DNA复制与细胞分裂增加，是细胞增殖的特异指标。TopoⅡα的表达水平越高，使得具有TopoⅡ抑制作用的抗肿瘤药具备作用的靶点越多，抗肿瘤药的敏感性越高，当TopoⅡ表达降低或不表达时，这类药物失去作用的底物，表现为对这类药物不敏感[10-11]。TopoⅡα的高表达预示着化疗有效，提示TopoⅡα的高表达可作为化疗有效的预测指标[12-13]。该研究结果表明，NACT有效组中TopoⅡα高表达高于无效组，提示以铂类联合紫杉类的化疗方案协同作用较强，可清除部分TopoⅡα阳性表达的肿瘤细胞，或下调了细胞增殖蛋白TopoⅡα的表达，提示TopoⅡα表达较高的宫颈癌患者在初治策略设计时可考虑选用包括拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的化疗方案。

总之，TS低表达和TopoⅡα高表达的患者在NACT中的均有较好疗效，通过检测宫颈组织TS、TopoⅡα的表达，可以有针对性地选择化疗方案，以提高化疗效果。

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(2013-08-31收稿 责任编辑赵秋民)

Relationship between expressions of TS and TopoⅡα in cervical squamous cancer tissue and curative effect of neoadjuvant chemotherapy

DENGKehong,CUIJinquan,LUShufang

DepartmentofGynecologyandObstetrics，theSecondAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450014

cervical squamous cancer;neoadjuvant chemotherapy;chemotherapy efficacy；TS;TopoⅡα

Aim: To explore relationship between the expressions of TS and TopoⅡα in cervical squamous cancer tissue and the efficacy of neoadjuvant chemotherapy(NACT) of taxol and carbon(TC). Methods: TS and TopoⅡα expressions in 54 specimens of cervical squamous cancer were detected by SP immunohistochemistry. Results: 34 out of 54 cervical squamous cancer patients reacted to NACT, and the total effective rate was 72.2%, ineffective rate was 27.8%. There was correlation between TS,TopoⅡα expressions and the curative effect of NACT (χ2=7.020 and 9.026，P<0.05). Conclusion: The patients with lower expression of TS and higher expression of TopoⅡα can benefit from NACT, and whether TS and TopoⅡα can serve as factors for chemotherapy efficacy in cervical squamous cancer is worthy of further research.

10.13705/j.issn.1671-6825.2014.03.031

R737.33