了哥王抗炎有效部位研究*

★ 徐骏军 王国伟 熊友香* 尤志勉

(浙江中医药大学药学院 浙江 杭州 310053)

了哥王为瑞香科荛花属南岭荛花Wikstroemiaindica(L.)C.A.Mey.的干燥根皮，性味苦寒、微辛，有毒，主治跌打损伤，散瘀止痛；分布于江西、浙江、湖南、广东、广西等地[1]，为民间常用中草药。现代药理及临床研究表明，了哥王具有消炎、解毒、镇痛等功效，用于治疗支气管炎、肺炎、扁桃体炎、乳腺炎、蜂窝组织炎等症[2-5]。通过蛋清法致小鼠足肿胀预实验，对乙酸乙酯层、正丁醇层、水层提取物抗炎效果进行了预筛选，结果显示乙酸乙酯层和水层与空白组比较有显著差异(P<0.05)。本研究通过蛋清法致小鼠足肿胀实验及炎症部位PGE2含量测定，确定了哥王的抗炎有效部位。

1 材料

1.1 药物与试剂 阿司匹林肠溶片(南京白敬宇制药有限责任有限公司，批号：060912)；甲醇(杭州化学试剂有限公司，批号：20070509)；氢氧化钠(杭州萧山化学试剂厂，批号：20040522)；了哥王乙酸乙酯层提取物(自制)。

1.2 仪器 UV-2450紫外分光光度计(日本岛津公司生产)。

1.3 动物 昆明种小鼠(20±2)g，SPF级，浙江中医药大学实验动物中心提供。

2 方法与结果

2.1 供试药物的制备 取了哥王药材粗粉50g置于圆底烧瓶，加入石油醚500mL，水浴回流提取3 h，至石油醚呈无色，弃去石油醚层；将药材中的溶剂挥干，再用500mL乙酸乙酯水浴回流提取至无色，合并提取液，将乙酸乙酯提取物浓缩至干，置真空干燥箱内干燥至恒重，得乙酸乙酯层提取物3.2 g，得率为6.4%。用蒸馏水配成不同浓度的混悬液(生药含量分别为：0.72，0.54，0.36 g/mL)。

2.2 阳性对照药物的制备 取6片阿司匹林肠溶片(0.25 mg/片)，研成粉末，用10 mL蒸馏水溶解得阿司匹林阳性对照药物溶液(0.15 mg/mL)。

2.3 蛋清法致小鼠足肿胀实验[6]取昆明种小鼠50只，雄性，按体重随机分成5组，分别为了哥王乙酸乙酯提取物高、中、低三个剂量组(生药含量分别为：0.72，0.54，0.36 g/mL)、阿司匹林阳性药组(0.15 mg/mL)、空白对照组。每组给药量均为0.2 mL/10g，空白对照组按0.2 mL/10g给予蒸馏水；每天灌胃1次，连续灌胃7 d，末次给药后1 h后于每鼠右侧足皮下注射1%蛋清0.05 mL，4 h后沿踝关节剪切左右两足，称重，计算肿胀度(左右足重量差值)和抑制率。抑制率=(1-用药组肿胀度均值/空白对照组肿胀度均值)×100%。

2.4 对炎症小鼠肿胀足中PGE2含量影响实验[6,7]剪碎由2.3项得到的肿胀足，加生理盐水5 mL浸泡1 h，取出，离心浸泡液，吸取上清液0.1 mL，加0.5 mol/L甲醇溶液2 mL，在50℃下异构化20min，用甲醇稀释至20mL，置紫外-可见分光光度计(λ=278nm)测定OD值，以每克炎性组织相当的OD值表示PGE2的含量。

2.5 结果 蛋清法致小鼠足肿胀实验和炎症小鼠肿胀足中PGE2含量影响实验结果如下：

表1 各组小鼠足肿胀度、肿胀抑制率比较

注：与空白对照组比较，*P<0.05。

表2 对炎症小鼠肿胀足中PGE2含量的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05。

3 讨论

本研究通过蛋清法致小鼠足肿胀预实验，对乙酸乙酯层、正丁醇层、水层提取物抗炎效果进行了预筛选，结果显示乙酸乙酯层和水层与空白组比较有显著差异(P<0.05)；结合抑菌实验结果[8]，本课题选取乙酸乙酯部位进行抗炎药效研究。通过小鼠足肿胀实验，测定足肿胀度、肿胀抑制率，及小鼠炎症部位中PGE2含量来研究乙酸乙酯层提取物的抗炎作用，并探讨其初步机制。

结果表明，高剂量组和中剂量组小鼠足肿胀度明显降低(P<0.05)，肿胀抑制率分别为44.75%、38.49%、29.26%。由以上结果推断，了哥王乙酸乙酯部位对蛋清法致小鼠足肿胀具有显著抑制作用。高剂量组和中剂量组小鼠肿胀足中PGE2含量明显降低(P<0.05)，可以推测其抗炎机制是通过抑制炎症部位PGE2的分泌而起作用。

[1]浙江植物志编委.浙江植物志·第四卷[M].杭州:浙江科学技术出版社,1998:255-256.

[2]柯雪红,王丽新,黄可儿,等.了哥王片抗炎消肿及镇痛作用研究[J].时珍国医国药,2003,14(10):603-604.

[3]李雨田,顾雪竹,张村,等.了哥王的化学成分和药理作用研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(24):252-255.

[4]杨振宇,杜智敏.了哥王水煎液的抑菌作用研究[J].哈尔滨医科大学学报,2006,40(5):362-364.

[5]方铝,朱令元,刘维兰,等.了哥王片抗炎抑菌作用的试验研究[J].中国中医药信息杂志,2000,7(1):28-29.

[6]李勇文,李丽,李植飞,等.五味藤抗炎作用及其机制初探[J].中国中医急症,2006,15(8):898-900.

[7]邢建峰,侯家玉,邹节明,等.溃结康胶囊的抗炎作用机制[J].中国医院药学杂志,2005,25(9):817-820.

[8]熊友香,尤志勉,程东庆,等.了哥王不同提取部位抑菌作用研究[J].中国中医药信息杂志,2008,15(10):42-43.