孕足月胎膜早破与母体微量元素、MMP-9关系探讨

2014-08-28郭延霞陈燕张阔

河北医药 2014年21期

郭延霞陈燕张阔

·论著·

郭延霞陈燕张阔

目的检测孕足月胎膜早破孕妇血浆铜、锌、钙、镁、铁的含量和血清及羊水中MMP-9含量变化，探讨微量元素、MMP-9和孕足月胎膜早破的关系。方法选取30例孕足月胎膜早破患者(病例组)和30例正常孕足月患者作对照，用原子吸收法检测其血浆铜、锌、钙、镁、铁五种微量元素的含量，用ELSIA法检测其血清及羊水中MMP-9的含量。结果60例患者中缺钙43例占71.67%；缺铁25例占41.67%；既缺钙又缺铁14例占23.33%。足月胎膜早破组孕妇血浆锌、镁含量高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05),足月胎膜早破组孕妇血浆铜、钙、铁较正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)；足月胎膜早破组孕妇血清及羊水中MMP-9含量高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；孕妇血清MMP-9、羊水MMP-9之间有相关性，呈正相关(P<0.05)。结论无论是足月胎膜早破孕妇还是正常孕妇均显示明显缺钙和缺铁，所以孕妇要注意补充钙和铁等微量元素；母体锌、镁、MMP-9含量升高与足月胎膜早破有关。

足月胎膜早破；微量元素；基质金属蛋白酶-9

胎膜早破是产科常见并发症，可引起严重的母儿感染、难产等并发症，增加剖宫产率。其原因是多方面的，胎膜早破与微量元素、MMP-9有关，本研究通过检测孕足月胎膜早破孕妇血浆铜、锌、钙、镁、铁的含量及血清和羊水中MMP-9含量变化，探讨孕足月胎膜早破发生的分子生物学机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2012年11月至2013年3月在我院分娩的孕妇60例，年龄21～35岁，孕周37～41周，所选对象均为足月单胎头位，均无产科及内科合并症，血红蛋白在100～140 g/L、血压60～90 mm Hg/80～120 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。其中确诊为胎膜早破30例为胎膜早破组，正常足月孕妇30例为对照组。2组一般资料具有均衡性。

1.2 标本采集孕妇入院时抽取产前肘静脉血4 ml，分别置于2个无菌试管内，其中一管加抗凝剂肝素锂，24 h内检测血浆铜、锌、钙、镁、铁的含量，另一管常温下离心5 min(3 000 r/min)，取上清液置于-20℃冰箱待测血清MMP-9含量；所有孕妇均在分娩时用5 ml注射器抽取羊水4～5 ml，常温下离心5 min(3 000 r/min)，取上清液置于-70℃冰箱待测羊水MMP-9含量。

1.3 主要试剂及测定方法北京东西分析仪器有限公司生产的原子吸收光谱仪(7003M)直接检测血浆铜、锌、钙、镁、铁的含量；血清及羊水MMP-9用武汉博士德生物工程有限公司提供MMP-9 ELISA试剂盒检测，以标准品10 000、5 000、2 500、1 250、625、312、156 pg/ml的OD值在半对数纸上作图，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线；根据每个测定样品的实际OD值在该曲线图上可查得相应MMP-9含量,故OD值可以代表MMP-9含量高低。

2 结果

2.1 患者缺钙、缺铁和缺钙和铁情况以血浆钙离子浓度的正常参考值为1.55～2.10 mmoL/L,血浆铁离子浓度的正常参考值为7.52～11.8 mmoL/L为标准。60例病例中缺钙43例占71.67%，缺铁25例，占41.67%，既缺钙又缺铁14例占23.33%。

2.2 2组孕妇血浆微量元素比较胎膜早破组血浆锌、镁含量高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；胎膜早破组孕妇血浆铜、钙、铁较对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

组别血浆铜(μmol/L)血浆锌(μmol/L)血浆钙(mmol/L)血浆镁(mmol/L)血浆铁(mmol/L)胎膜早破组20．61±3．36109．10±16．071．44±0．161．42±0．098．18±1．23对照组20．47±3．7790．54±10．991．48±0．101．37±0．107．63±0．97 t值-0．151-5．221．057-2．007-1．941 P值0．8810．0000．2950．0490．057

2.3 2组血清及羊水MMP-9的OD值相比较胎膜早破组血清及羊水MMP-9的OD值均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

组别血清MMP⁃9OD值羊水MMP⁃9OD值胎膜早破组2．28±0．722．14±1．12对照组1．90±0．621．40±1．05 t值-2．204-2．341 P值0．0320．024

2.4 孕妇血清MMP-9、羊水MMP-9间相关性分析孕妇血清MMP-9、羊水MMP-9之间呈正相关(P<0.05)。见表3。

表3 血清MMP-9与羊水MMP-9的相关性分析

3 讨论

胎膜早破的病因至今尚未完全明了，人们曾试图用力学原理解释，之后感染因素被认为是胎膜早破的主要原因，感染与胎膜早破互为因果，而现在人们更加注重胎膜本身对胎膜早破的影响。胎膜由绒毛膜和羊膜组成。绒毛膜为胎膜外层，胎膜内层为结实、坚韧而柔软的羊膜。羊膜上皮层下为基底膜，此膜富含Ⅳ型胶原。羊膜层决定了胎膜的弹性。

3.1 微量元素和胎膜早破的关系微量元素是正常人类生长和人体功能必不可少的。微量元素和胎膜早破的关系已有研究，但国内外报道不一。李树寿等[1]报道血清中的锌、铜、钙含量与胎膜早破无因果关系；王耕[2]报道胎膜早破和铜、钙、锌水平低有关；本研究表明：血浆锌、镁含量增高和足月胎膜早破有关，锌是人体重要的微量元素，在MMP-9中起到稳定酶的构象、参与催化反应、传递电子,并在酶与底物间起桥梁作用、中和阴离子、降低反应中的静电斥力的作用[3]。当锌增多时，活化状态MMP-9量增多，降解Ⅳ型胶原，导致胎膜早破。镁是人体重要的微量元素之一，是人体骨骼形成和多种胞内酶发挥作用时所必需。镁缺乏可能导致先兆子痫、早产和低体重儿的发生[4]。本研究中血浆钙、铁与对照组无明显差异，和胎膜早破的关系尚无定论，这种报道的不一致性可能和地区、种族、饮食及经济状况等多种因素有关。本研究显示所有孕妇，无论足月胎膜早破患者还是正常孕妇均有明显的缺钙及缺铁，比例高达71.67%和41.67%，提示孕妇要注意补充钙和铁等微量元素。张惠丹等[5]研究显示，足月胎膜早破和铜缺乏有关。各种微量元素间存在相互作用，如：大量锌摄入抑制铜的吸收，锌铜之间为拮抗作用；高钙含量会损害小肠锌的吸收[6]。这些为足月胎膜早破血浆锌含量升高和血浆钙降低提供了有力证据。

3.2 MMP-9和胎膜早破的关系 MMPs是一类结构上相关的锌依赖酶，包括MMP-2和MMP-9。MMP-9又叫Ⅳ型胶原酶，它主要水解基底膜的Ⅳ型胶原，破坏基底膜，使胎膜的强度、韧性下降，导致胎膜早破。已有研究证实MMP-9的升高和胎膜早破有关：黎艳芳等[7]研究发现MMP-9 在足月胎膜早破孕妇血清中的含量及表达增高。王耕[2]报道胎膜早破孕妇血清、阴道分泌物中MMP-9水平升高；范建辉等[8]研究发现MMP-9在胎膜早破母血、羊水和胎膜中的表达均高于正常对照组。本研究发现，足月胎膜早破孕妇血清及羊水中MMP-9明显升高，且两者之间有相关性，呈正相关。MMP-9作为Ⅳ型胶原的水解酶，可能是足月胎膜早破的病因之一。

1 李树寿，刘敏华，赵凯君，等.孕妇血清锌、铜、钙含量与胎膜早破的关系初探.中国实用妇科与产科杂志，1994,10：89-90.

2 王耕.基质金属蛋白酶-9、微量元素与胎膜早破关系的研究.中国优生与遗传杂志，2008,16：63-64.

3 李小英，黄莺，刘芳芳.基质金属蛋白酶-9、微量元素与胎膜早破的关系.现代生物医学进展，2010，10：3753-3756.

4 Pathak P,Kapil U.Role of trace elements zinc,copper and magnesium during pregnancy and its outcome.India J Pediatr,2004,71:1003-1005.

5 张惠丹，陈惠池，单连峰.铜及赖氨酰氧化酶与胎膜早破的相关性研究.中华妇产科杂志，2006,1：7-11.

6 吕选中，于宙，王广仪主编.元素生物学.第1版.合肥：中国科学技术大学出版社，2011.563-564.

7 黎艳芳，陈倩，张金凤.IL-1β和MMP-9在足月胎膜早破孕妇血清中的表达.中国现代医生，2012，50：116-117.

8 范建辉，崔金辉，腾奔琦，等.MMP-9 和iNOS 在胎膜早破胎膜组织中的表达及相关性研究.中国病理生理杂志，2011,27：2000-2004.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.21.038

项目来源：河北省卫生厅科研经费资助项目(编号：20130065)

063000 河北省唐山市，河北联合大学2011级硕士研究生(郭延霞、张阔)；河北联合大学附属医院(陈燕)

陈燕，063000 河北联合大学附属医院；