板蓝根药材及其制剂中告依春稳定性研究

张 昀，胡海廷，刘 欣

(河南大学 药学院,河南 开封 475004)

板蓝根为目前最常用的预防感冒药物之一，具有一定的抗病毒性。2010年版《中国药典》[1]表明其具有清热解毒、凉血利咽之功效。而板蓝根的主要抗病毒活性成分为告依春，因此，告依春含量的高低，决定了板蓝根抗病毒效果的好坏，2010版中国药典[1]将其作为板蓝根药材质量控制的指标。关于板蓝根药材及其制剂中告依春含量的测定方法文章比较多，但贮存条件对板蓝根药材及其制剂的影响未见报道。因此，我们以告依春含量为指标，考察不同温度对板蓝根药材及其制剂中告依春含量的影响，为板蓝根药材及其制剂的质量控制提供参考依据。

1 仪器与试药

TEMI880药物稳定试验箱(上海苏盈试验仪器有限公司)；高效液相色谱仪Agilent1260；分析电子天平(BAS224S 赛多利斯科学仪器有限公司)；超声仪(TP300天鹏电子技术(北京)有限公司)。

告依春对照品(中国药品生物检定所，批号111753-201103)；板蓝根药材购于开封市乐仁堂总店(批号110923)；板蓝根颗粒(白云山制药厂，批号F2F034)；板蓝根含片(洛阳新春都生物制药有限公司生产，批号110901)；板蓝根糖浆(李时珍医药集团有限公司，批号111001)；甲醇、乙腈为色谱纯(天津四友精细化学品有限公司)；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

Aglient TC-C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相乙腈-0.2 g/L磷酸溶液(9∶91)；检测波长245 nm；流速:1 mL/min；柱温30 ℃；进样量20 μL。高效液相色谱图,见图1。

2.2 对照品溶液的制备

按中国药典[1]板蓝根含量测定项下，对照品溶液的制备操作。

2.3 供试品溶液的制备

2.3.1 药材 按中国药典[1]板蓝根含量测定项下，供试品溶液的制备操作。

2.3.2 颗粒制剂 取样品各5袋，混匀，研细，称取0.500 3 g置10 mL容量瓶中，用超纯水溶解，超声提取10 min，冷却，摇匀，定容，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.3.3 糖浆制剂 取样品5瓶，混匀，移取2.00 mL置10 mL容量瓶中，用超纯水溶解，定容，超声提取10 min，冷却，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.3.4 含片制剂 取样品10片，研细，混匀，称取0.399 9 g置10 mL容量瓶中，用超纯水溶解，超声提取10 min，冷却，定容，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液，即得。

A.对照品 B.药材 C.板蓝根颗粒 D.复方板蓝根颗粒 E.板蓝根含片 F.板蓝根糖浆 1.告依春

2.4 线性关系考察

分别取浓度为0.4、1.2、2.4、3.2、4.8 mg/mL的告依春对照品溶液各20 μL，按2.1色谱条件进行测定，以峰面积(Y)对照品质量(X)进行线性回归，回归方程为Y=6157.4X+270.09 (r=1.000 0)。表明，告依春在8～96 μg与峰面积成良好的线性关系。

2.5 精密度实验

精密吸取2.4 mg/mL告依春对照品溶液20 μL，同一条件下重复进样6次，测定峰面积。结果，告依春RSD为1.5%，精密度良好。

2.6 稳定性实验

精密吸取2.4 mg/mL告依春对照品溶液20 μL，分别于0、4、8、12、16、20、24 h进样，测定峰面积。结果，告依春峰面积RSD为3.9%，在24 h内稳定。

2.7 加样回收率实验

按2.3项下取已知含量的药材及各个制剂，按2.3项下取样量分别减半，各精密称定6份，分别加入一定量的告依春对照品，按2.3项下，制备供试品溶液。结果，药材平均回收率为98.06%，RSD1.39%；单方颗粒平均回收率为97.28%，RSD1.03%；复方颗粒平均回收率为97.12%，RSD2.57%；含片平均回收率为98.24%，RSD3.06%；糖浆平均回收率为97.41%，RSD2.78%。

2.8 样品测量

分别将药材及各制剂置于5 ℃冰箱，30 ℃±5 ℃(相对湿度65%±5%)和40 ℃±2 ℃(相对湿度75%±5%)的稳定性试验箱中，于0，1，2，3，6个月取样。用外标法一点法计算各样品中告依春的含量，测定结果见表1。

表1 不同温度样品中告依春含量(n=3)

3 讨论

由表1可知，不同温度对板蓝根药材及其制剂中告依春含量有影响。5℃时，告依春在药材及各种制剂中都很稳定，放置6 mon后未见明显变化。而在40 ℃(相对湿度75%±5%)时，放置6 mon后，药材中的含量相对0个月平均下降约15%，颗粒制剂均下降约40%，含片下降约50%，糖浆剂下降约45%；在30 ℃±5 ℃(相对湿度65%±5%)时，放置6 mon后，药材中的含量相对0个月平均下降约3%，变化不大，颗粒制剂均下降约35%，含片下降约48%，糖浆剂下降约38%。说明告依春在药材中相对比较稳定，一般的贮存条件对其影响不大。而含片制剂下降较多是因为含片出现了吸潮现象，其他剂型外观未见明显变化。因此，高温不利于板蓝根的保存，告依春会随温度升高而变得不稳定。因此，对不同厂家、不同产地板蓝根及其制剂中告依春含量的考察，应注意贮存温度对含量带来的影响[2-4]，否则没有任何对比的意义。 我们对不同流动相和不同色谱柱的分离效果也进行了考察。筛选的流动相有甲醇-0.2 g/L磷酸溶液(7∶93)[1]，甲醇-0.115 /L磷酸溶液(11∶89)[5]，乙腈-水-磷酸-三乙胺(8.50∶90.72∶0.73∶0.05)[6-15]，甲醇-水(15∶85)[15]，乙腈-0.02%磷酸(9:91)等，复方板蓝根颗粒中干扰成分较多，不易分离，只有流动相为乙腈-0.2 g/L磷酸(9∶91)，可以将全部剂型中的告依春很好的分离出来，故将其定为本实验所用流动相。对于色谱柱，考察了Aglient TC-C18(2) (4.6 mm×250 mm，5 μm)、Aglient HC-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)、Agilent Eclipse Plus C18 (4.6 mm×150 mm，5 μm)、Thermo C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)、Aglient HC-C18 (4.6 mm×150 mm，5 μm)等不同型号色谱柱的分离效果，发现在我们实验色谱条件下，色谱柱型号为(4.6 mm×250 mm，5 μm)的告依春均能达到完全分离，而Aglient HC-C18 (4.6 mm×150 mm，5 μm)，分离度略差。因此应选用规格为(4.6 mm×250 mm，5 μm)的色谱柱。

药材的提取方法按中国药典[1]板蓝根项下操作。对于其他制剂，因为告依春易溶解于水，故采用水为提取溶剂。另外，由于三种制剂都溶于水，故采用水提超声10 min，使其快速溶解均匀。

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