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宽筋藤提取物对小鼠抗炎作用的实验研究

2014-08-08薛强罗莹许小林

右江医学 2014年3期
关键词:抗炎小鼠

薛强+罗莹+许小林

基金项目:20072009年度右江民族医学院普高学生科研课题(编号:66)

作者简介:薛强,男,高级技师,医学学士。Email:xueqiang116@126.com.

▲通信作者:罗莹,女,实验师,硕士。Email:luoxf@139.com.

薛强1,罗莹2▲,许小林1

(右江民族医学院,1.药学院,2.基础医学院,百色 533000)

【摘要】目的观察宽筋藤提取物对小鼠的抗炎作用。

方法①采用二甲苯致小鼠耳郭肿胀法,观察宽筋藤大、中、小剂量对小鼠耳郭肿胀的抑制率;②采用鸡蛋清致小鼠足趾肿胀法,观察致炎后1 h、2 h、4 h、6 h、8 h,宽筋藤大、中、小剂量对小鼠足趾肿胀的抑制作用。

结果宽筋藤提取物灌胃可减轻二甲苯致小鼠耳郭肿胀程度和鸡蛋清致小鼠足趾肿胀程度(P<001),且肿胀抑制率随剂量的增加而加强。

结论 宽筋藤对小鼠组织肿胀具有抑制作用,并且呈现剂量依赖性,具有抗炎药理作用。

【关键词】宽筋藤;抗炎;小鼠

中图分类号:R965文献标识码:A文章编号:10031383(2014)03028503

DOI:10.3969/j.issn.10031383.2014.03.007



Experimental study of the antiinflammatory effect of Kuan Jin Teng extract on mice

XUE Qiang1,LUO Ying2▲,XU Xiaolin1

(1.College of Pharmacy,2.College of Preclinical Medicine,

Youjiang Medical University for Nationalities,Baise 533000,Guangxi,China)

【Abstract】ObjectiveTo investigate the antiinflammatory effect of water extract from Kuan Jin Teng on mice.

Methods①Xylene was used to induce pinna swelling on mice.②Toe swelling of mice was induced by egg white.Observe the inhibition effect of large,middle,small dose of Kuan Jin Teng on the inflammation of mice 1h,2h,4 h,6 h and 8 h later.

Results The intragastric administration of water extract of Kuan Jin Teng can relieve the pinna swelling induced by xylene and toe swelling induced by egg white(P<0.01) and the inhibition effect on swelling enhanced with the increase of dose.

Conclusion Kuan Jin Teng has inhibition effect on tissue swelling of mice,which shows dose dependency,and has antiinflammatory pharmacologiccal effect.

【Key words】Kuan Jin Teng;antiinflammatory;mice

宽筋藤是防己科植物宽筋藤的干燥藤茎[1],又叫伸筋藤、舒筋藤、砍不死、松根藤,广泛分布于广西、广东、西藏、云南、海南等地区[2,3],其味微苦、性凉[4],广西壮族民间常用其治疗风湿骨痛、腰肌劳损、肩周炎等[5,6],是舒筋活络常用的中药。目前有关宽筋藤的药理作用报道较少,我们对其抗炎活性作用进行实验研究。

1材料与方法

1.1药品

宽筋藤购于广西百色市药材市场,经我校中药学教研室刘春荣副主任药师鉴定。取宽筋藤200 g自然干燥,粉碎加蒸馏水液料比1∶10,浸泡24 h 后,80℃超声提取60 min,过滤,提取3次,合并滤液,浓缩至每ml溶液含生药2 g。

昆明种小鼠,SPF级,右江民族医学院实验动物中心提供(许可证号:SYXK桂20110010)。

1.3仪器

电子分析天平(AR1140/C),奥豪斯(上海)公司生产;足趾容积测量仪(YLS7B),山东省医学科学院设备站生产。

1.4实验方法

1.4.1二甲苯致小鼠耳郭肿胀实验

小鼠50只,体重(20±2)g,雌雄各半,随机分成5组,每组10只,分别为生理盐水组,地塞米松组(10 mg/kg),宽筋藤大、中、小剂量组(20 g/kg、10 g/kg、5 g/kg),各组连续灌胃7 d,末次给药1 h后,于小鼠右耳两面均匀涂抹二甲苯0.02 ml致肿胀,左耳不涂为正常对照耳[7]。1 h后小鼠颈椎脱臼处死,沿着耳郭基线剪下双耳,用6 mm打孔器沿着左右耳相同部位打一圆片,于电子分析天平上称重,计算肿胀率,比较各组间的差异。肿胀率(%)=(右耳重量-左耳重量)/左耳重量×100%。肿胀抑制率(%)=(生理盐水组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/生理盐水组平均肿胀度×100%。

1.4.2鸡蛋清致小鼠足趾肿胀实验

小鼠50只,体重(20±2)g,雌雄各半,随机分成5组,每组10只,分别为生理盐水组,地塞米松组(10 mg/kg),宽筋藤大、中、小剂量组(20 g/kg、10 g/kg、5 g/kg),各组连续灌胃7 d,末次给药1 h后,小鼠右后足趾关节下注射鸡蛋清0.1 ml致炎[8]。致炎后1 h、2 h、4 h、6 h、8 h用足趾容积测量仪分别测量小鼠足趾容积。肿胀率(%)=(致炎后足趾容积值-致炎前足趾容积值)/致炎前足趾容积值×100%。

1.5统计学方法

实验数据用(-±s)表示,采用SPSS for Windows 15.0统计软件进行ANOVA分析,P<005为差异有统计学意义。

2结果

2.1宽筋藤提取物对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的影响

地塞米松组和宽筋藤大、中剂量组二甲苯致小鼠耳郭肿胀率与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<001),宽筋藤大剂量组二甲苯致小鼠耳郭肿胀率与地塞米松组比较差异无统计学意义(P>005)。宽筋藤大剂量组小鼠耳郭肿胀抑制率为4666%,与生理盐水组差异有统计学意义(P<001)。说明宽筋藤提取物含有抗炎活性成分,能降低二甲苯致小鼠耳郭肿胀的程度。详见表1。

2.2宽筋藤提取物对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响

各小组足趾肿胀率随时间推移呈下降趋势,地塞米松组和宽筋藤大剂量组致炎后1 h足趾肿胀率与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<001)。宽筋藤中、小剂量组抑制小鼠足趾肿胀起效比较慢,致炎后4 h与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<005或<001)。其中宽筋藤大剂量组与地塞米松组比较差异无统计学意义(P>005)。宽筋藤提取物具有抑制鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的作用,作用特点为起效比较慢,在致炎后4 h作用逐步增强。详见表2。

表1宽筋藤提取物对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的影响(n=10,%,-±s)

分组肿胀率肿胀抑制率

生理盐水组47.73±18.32★-

地塞米松组16.19±11.32●66.09%

宽筋藤大剂量组25.46±11.41●46.66%

宽筋藤中剂量组29.29±9.17●☆38.63%

宽筋藤小剂量组35.00±18.47★26.67%

注:与生理盐水组比较,●P<001;与地塞米松组比较,☆P<005,★P<001。

表2宽筋藤提取物对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响(n=10,%,-±s)

组别足趾肿胀率(%)

1 h2 h4 h6 h8 h

生理盐水组61.33±16.17★45.74±18.89★34.59±15.03★5.51±6.54★14.63±11.61★

地塞米松组35.75±14.13●21.03±10.29●11.30±6.76●10.25±10.34●2.67±3.43●

宽筋藤大剂量组41.89±18.92●33.97±17.2215.73±9.93●12.04±7.20●5.06±5.55●

宽筋藤中剂量组47.95±16.1135.41±18.1722.42±10.13○☆13.07±8.98○5.95±4.28●

宽筋藤小剂量组47.13±15.5934.79±19.5223.44±11.35○☆12.83±11.34○8.51±6.28○

注:与生理盐水组比较,○P<005,●P<001 ;与地塞米松组比较,☆P<005,★P<001。

3讨论

在炎症性疾病模型中,炎性细胞被激活后,炎性介质被释放出来,导致了动脉和静脉的扩张,引起血管通透性增加,结果导致体液和血浆蛋白外渗,形成水肿。二甲苯致小鼠耳郭肿胀模型、鸡蛋清致小鼠足趾肿胀模型属于炎症反应的第一时相,是以由化学物质、蛋白介导的血管通透性改变为主的典型的急性炎症模型[9,10],主要用于评价药物对炎症早期血管通透性增加的抑制作用以及炎性渗出的影响程度,从而反映药物对急性炎症的作用,常用于抗炎药物的初筛。

实验结果显示,宽筋藤提取物大、中、小剂量组均能减轻二甲苯致小鼠耳郭肿胀程度,宽筋藤各剂量组的耳郭肿胀抑制率为46.66%、38.63%、2667%,其中宽筋藤大剂量组效果与地塞米松组作用相近,优于中、小剂量组。宽筋藤提取物各剂量组对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀具有抑制作用,随着时间增加小鼠足趾肿胀率明显减小,其中地塞米松组和宽筋藤大剂量组小鼠足趾肿胀率在致炎后1 h与生理盐水组比较差异有统计学意义,宽筋藤中、小剂量组小鼠足趾肿胀率在致炎后4 h与生理盐水组比较差异有统计学意义,呈现出明显的量效关系,各小组在致炎后8 h对小鼠足趾肿胀抑制作用最明显。实验结果说明了宽筋藤在一定程度上对早期炎症的炎性渗出、组织肿胀具有抑制作用,并且呈现剂量依赖性,具有抗炎药理作用。本实验为今后进一步研究宽筋藤抗炎活性的中药有效成分和临床应用提供参考,也为开发利用宽筋藤中草药材资源提供实验依据。

参考文献

[1] 国家药典委员会.中国药典[M].2010版.北京:中国医药科技出版社,2010:附录25.

[2] 广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准[M].南宁:广西科学技术出版社,1992:7879.

[3] 广东中药志编辑委员会.广东中药志[M].广州:广东科技出版社,1994:501502.

[4]江苏新医学院.中药大辞典[M].上册.上海:上海科学技术出版社,1977:11391140.

[5] 滕红丽,梅之南,郭力城.壮医风湿免疫病常用藤本药物药学及临床应用研究[J].辽宁中医杂志,2011,38(5):873875.

[6] 林耐球,朱英,周广军,等.壮医药治疗痹证研究概况[J].辽宁中医药大学学报,2013,15(11):139142.

[7] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000:355379.

[8] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:882886.

[9] Liu J,Yang F,Zhang Y,Li J. Studies on the cellimmunosuppressive mechanism of Oridonin from Isodon serra[J].Int Immunopharmacol,2007,7(7):945954.

[10]Feng X,Cheng Q,Chen SY,et al. Evaluation of the burn healing properties of oil extraction from housefly larva in mice[J].J Ethnopharmacol,2010,130(3): 586592.

(收稿日期:2014-04-10修回日期:2014-06-11)

编辑:潘明志)



表1宽筋藤提取物对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的影响(n=10,%,-±s)

分组肿胀率肿胀抑制率

生理盐水组47.73±18.32★-

地塞米松组16.19±11.32●66.09%

宽筋藤大剂量组25.46±11.41●46.66%

宽筋藤中剂量组29.29±9.17●☆38.63%

宽筋藤小剂量组35.00±18.47★26.67%

注:与生理盐水组比较,●P<001;与地塞米松组比较,☆P<005,★P<001。

表2宽筋藤提取物对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响(n=10,%,-±s)

组别足趾肿胀率(%)

1 h2 h4 h6 h8 h

生理盐水组61.33±16.17★45.74±18.89★34.59±15.03★5.51±6.54★14.63±11.61★

地塞米松组35.75±14.13●21.03±10.29●11.30±6.76●10.25±10.34●2.67±3.43●

宽筋藤大剂量组41.89±18.92●33.97±17.2215.73±9.93●12.04±7.20●5.06±5.55●

宽筋藤中剂量组47.95±16.1135.41±18.1722.42±10.13○☆13.07±8.98○5.95±4.28●

宽筋藤小剂量组47.13±15.5934.79±19.5223.44±11.35○☆12.83±11.34○8.51±6.28○

注:与生理盐水组比较,○P<005,●P<001 ;与地塞米松组比较,☆P<005,★P<001。

3讨论

在炎症性疾病模型中,炎性细胞被激活后,炎性介质被释放出来,导致了动脉和静脉的扩张,引起血管通透性增加,结果导致体液和血浆蛋白外渗,形成水肿。二甲苯致小鼠耳郭肿胀模型、鸡蛋清致小鼠足趾肿胀模型属于炎症反应的第一时相,是以由化学物质、蛋白介导的血管通透性改变为主的典型的急性炎症模型[9,10],主要用于评价药物对炎症早期血管通透性增加的抑制作用以及炎性渗出的影响程度,从而反映药物对急性炎症的作用,常用于抗炎药物的初筛。

实验结果显示,宽筋藤提取物大、中、小剂量组均能减轻二甲苯致小鼠耳郭肿胀程度,宽筋藤各剂量组的耳郭肿胀抑制率为46.66%、38.63%、2667%,其中宽筋藤大剂量组效果与地塞米松组作用相近,优于中、小剂量组。宽筋藤提取物各剂量组对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀具有抑制作用,随着时间增加小鼠足趾肿胀率明显减小,其中地塞米松组和宽筋藤大剂量组小鼠足趾肿胀率在致炎后1 h与生理盐水组比较差异有统计学意义,宽筋藤中、小剂量组小鼠足趾肿胀率在致炎后4 h与生理盐水组比较差异有统计学意义,呈现出明显的量效关系,各小组在致炎后8 h对小鼠足趾肿胀抑制作用最明显。实验结果说明了宽筋藤在一定程度上对早期炎症的炎性渗出、组织肿胀具有抑制作用,并且呈现剂量依赖性,具有抗炎药理作用。本实验为今后进一步研究宽筋藤抗炎活性的中药有效成分和临床应用提供参考,也为开发利用宽筋藤中草药材资源提供实验依据。

参考文献

[1] 国家药典委员会.中国药典[M].2010版.北京:中国医药科技出版社,2010:附录25.

[2] 广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准[M].南宁:广西科学技术出版社,1992:7879.

[3] 广东中药志编辑委员会.广东中药志[M].广州:广东科技出版社,1994:501502.

[4]江苏新医学院.中药大辞典[M].上册.上海:上海科学技术出版社,1977:11391140.

[5] 滕红丽,梅之南,郭力城.壮医风湿免疫病常用藤本药物药学及临床应用研究[J].辽宁中医杂志,2011,38(5):873875.

[6] 林耐球,朱英,周广军,等.壮医药治疗痹证研究概况[J].辽宁中医药大学学报,2013,15(11):139142.

[7] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000:355379.

[8] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:882886.

[9] Liu J,Yang F,Zhang Y,Li J. Studies on the cellimmunosuppressive mechanism of Oridonin from Isodon serra[J].Int Immunopharmacol,2007,7(7):945954.

[10]Feng X,Cheng Q,Chen SY,et al. Evaluation of the burn healing properties of oil extraction from housefly larva in mice[J].J Ethnopharmacol,2010,130(3): 586592.

(收稿日期:2014-04-10修回日期:2014-06-11)

编辑:潘明志)

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表1宽筋藤提取物对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的影响(n=10,%,-±s)

分组肿胀率肿胀抑制率

生理盐水组47.73±18.32★-

地塞米松组16.19±11.32●66.09%

宽筋藤大剂量组25.46±11.41●46.66%

宽筋藤中剂量组29.29±9.17●☆38.63%

宽筋藤小剂量组35.00±18.47★26.67%

注:与生理盐水组比较,●P<001;与地塞米松组比较,☆P<005,★P<001。

表2宽筋藤提取物对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响(n=10,%,-±s)

组别足趾肿胀率(%)

1 h2 h4 h6 h8 h

生理盐水组61.33±16.17★45.74±18.89★34.59±15.03★5.51±6.54★14.63±11.61★

地塞米松组35.75±14.13●21.03±10.29●11.30±6.76●10.25±10.34●2.67±3.43●

宽筋藤大剂量组41.89±18.92●33.97±17.2215.73±9.93●12.04±7.20●5.06±5.55●

宽筋藤中剂量组47.95±16.1135.41±18.1722.42±10.13○☆13.07±8.98○5.95±4.28●

宽筋藤小剂量组47.13±15.5934.79±19.5223.44±11.35○☆12.83±11.34○8.51±6.28○

注:与生理盐水组比较,○P<005,●P<001 ;与地塞米松组比较,☆P<005,★P<001。

3讨论

在炎症性疾病模型中,炎性细胞被激活后,炎性介质被释放出来,导致了动脉和静脉的扩张,引起血管通透性增加,结果导致体液和血浆蛋白外渗,形成水肿。二甲苯致小鼠耳郭肿胀模型、鸡蛋清致小鼠足趾肿胀模型属于炎症反应的第一时相,是以由化学物质、蛋白介导的血管通透性改变为主的典型的急性炎症模型[9,10],主要用于评价药物对炎症早期血管通透性增加的抑制作用以及炎性渗出的影响程度,从而反映药物对急性炎症的作用,常用于抗炎药物的初筛。

实验结果显示,宽筋藤提取物大、中、小剂量组均能减轻二甲苯致小鼠耳郭肿胀程度,宽筋藤各剂量组的耳郭肿胀抑制率为46.66%、38.63%、2667%,其中宽筋藤大剂量组效果与地塞米松组作用相近,优于中、小剂量组。宽筋藤提取物各剂量组对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀具有抑制作用,随着时间增加小鼠足趾肿胀率明显减小,其中地塞米松组和宽筋藤大剂量组小鼠足趾肿胀率在致炎后1 h与生理盐水组比较差异有统计学意义,宽筋藤中、小剂量组小鼠足趾肿胀率在致炎后4 h与生理盐水组比较差异有统计学意义,呈现出明显的量效关系,各小组在致炎后8 h对小鼠足趾肿胀抑制作用最明显。实验结果说明了宽筋藤在一定程度上对早期炎症的炎性渗出、组织肿胀具有抑制作用,并且呈现剂量依赖性,具有抗炎药理作用。本实验为今后进一步研究宽筋藤抗炎活性的中药有效成分和临床应用提供参考,也为开发利用宽筋藤中草药材资源提供实验依据。

参考文献

[1] 国家药典委员会.中国药典[M].2010版.北京:中国医药科技出版社,2010:附录25.

[2] 广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准[M].南宁:广西科学技术出版社,1992:7879.

[3] 广东中药志编辑委员会.广东中药志[M].广州:广东科技出版社,1994:501502.

[4]江苏新医学院.中药大辞典[M].上册.上海:上海科学技术出版社,1977:11391140.

[5] 滕红丽,梅之南,郭力城.壮医风湿免疫病常用藤本药物药学及临床应用研究[J].辽宁中医杂志,2011,38(5):873875.

[6] 林耐球,朱英,周广军,等.壮医药治疗痹证研究概况[J].辽宁中医药大学学报,2013,15(11):139142.

[7] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000:355379.

[8] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:882886.

[9] Liu J,Yang F,Zhang Y,Li J. Studies on the cellimmunosuppressive mechanism of Oridonin from Isodon serra[J].Int Immunopharmacol,2007,7(7):945954.

[10]Feng X,Cheng Q,Chen SY,et al. Evaluation of the burn healing properties of oil extraction from housefly larva in mice[J].J Ethnopharmacol,2010,130(3): 586592.

(收稿日期:2014-04-10修回日期:2014-06-11)

编辑:潘明志)

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