大孔树脂AB-8纯化短梗五加果实中 的花色苷

郝婧玮+赵玥琪+孙晓薇++杨金昕+柴军红+宛春雷

摘要：通过静态吸附实验，考察大孔树脂AB-8对短梗五加果实中花色苷的最优纯化条件。在pH值为4、温度20℃、盐浓度为2%时达到最优吸附，2小时达到吸附平衡；以 70%的乙醇溶液作为解析液，解吸平衡的时间为3小时；其吸附率和解吸率分别是86.59%、31.94%。

关键词：大孔树脂；短梗五加果实；花色苷；静态吸附

基金项目：牡丹江师范学院校级项目——短梗五加果实高效利用工艺研究

项目编号：QY201219

中图分类号：TS254.4 文献标识码：A 文章编号： 1674-0432（2014）-11-32-2

1 短梗五加及其花色苷

短梗五加，五加科五加属落叶灌木或小乔木植物[1]，叶和果分别入药。花色苷是类黄酮——以黄酮核为基础的一类物质中能呈现红色的一族化合物[2]，因功能独特，可用于清除体内自由基、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等[3]。对利用PC、TLC、HPLC等技术测定花色苷结构有过报道[4]。

2 材料与方法

2.1 实验用品

短梗五加果实（风干）、AB-8大孔树脂、盐酸、乙醇、氢氧化钠、氯化钠等、电子天平、微型植物粉碎机、超声波清洗器、紫外可见分光光度计。

2.2 实验方法

2.2.1大孔树脂预处理采用一般方法预处理的树脂用于样品提取相同的体积分数乙醇浸泡4小时以上，滤除乙醇溶液，蒸馏水清洗直到检测不到树脂内的乙醇残留。树脂置于具塞广口瓶，平衡24小时。

2.2.2湿树脂绝干量测定称取一定量AB-8湿树脂3~5克×2份，于105±3℃烘干至恒重，计算绝干树脂量。树脂含水率计算公式如下：■

式中： α是含水率(%)； Wwet表示树脂湿重(g)； Wdry表示树脂干重（克）。

2.2.3 样品溶液制备短梗五加果实（风干）100克，经粉碎后，pH在3.5以下，超声提取50分钟后，过滤，得到目标组分溶液。

2.2.4 静态吸附 取5份绝干重为2.0克树脂，分别加入同浓度过量的目标组分溶液各50毫升。水浴恒温振荡，其条件为：恒定温度25 ℃，摇床摇动频率为100 rpm，进行连续操作24小时。重复三次，取平均值。测定吸光值。

2.2.5 静态解吸吸附达到平衡后，在吸附饱和树脂中分别加入浓度20%、40%、60%、80%、100%的乙醇溶液50毫升，利用水浴恒温振荡器进行解吸附试验，解吸条件为：恒定温度25 ℃，摇床摇动频率为100 rpm和连续操作24小时。重复3次，取平均值。测定解吸附溶液的吸光值。计算解吸率，公式如下： ■

式中：β是解吸率（%）；A0是吸附液初始质量浓度的吸光值；A1是吸附液剩余质量浓度的吸光值；A2是解吸液质量浓度吸光值。

2.2.6 静态吸附时间曲线 取经过预处理的上述树脂2.0克（绝干重），加入同浓度过量的目标组分溶液50毫升，瓶口保鲜膜密封。水浴恒温振荡，第0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时分别取样1毫升。测定吸光值。计算吸附率，公式如下：■

式中： ω是吸附率（%）；A0是吸附液初始质量浓度的吸光值；A1是吸附液剩余质量浓度的吸光值。

2.2.7 静态解吸时间曲线 取上述2.2.6饱和吸附树脂，过滤出溶液。精密加入50毫升已确定的洗脱溶剂，震荡不同时间。第0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时分别用移液枪取样1毫升。测定吸光值。

2.2.8 pH对吸附的影响 以稀盐酸或稀氢氧化钠溶液将目标组分溶液调至不同pH后（pH＝1、2、3、4、5、6、7、8、9），分别加入2.0g的AB-8树脂（绝干重），振荡吸附。

2.2.9 盐效应对吸附量的影响 取目标组分溶液，加入氯化钠使其在溶液中的质量浓度分别为2%、3%、4%、5%，加入2.0g的AB-8树脂（绝干重），振荡吸附。

2.2.10 温度对静态饱和吸附率的影响取4份2.0 克树脂（绝干重）置于锥形瓶中，加入同浓度过量的目标组分溶液各50毫升，在不同温度下（0℃、20℃、30℃、40℃）振荡吸附，每0.5小时取样1毫升检测。

3 结果与分析

3.1 AB-8树脂的静态吸附和解吸能力

经2.2.4实验，测得AB-8树脂分离花色苷吸附率为87.80%。从不同浓度乙醇对树脂解析的吸光值可知70%乙醇解析能力较优。不同浓度乙醇解析率分别为11.11%、23.61%、27.78%、31.94%、29.17%。

3.2 静态吸附动力学曲线

吸附速率也是评定树脂性质的重要因素[5]。由图3-1可知，吸附速率随时间的增长而增加，在2小时左右AB-8树脂达到吸附平衡。

3.3 静态解吸动力学曲线

解吸速率随时间的增长而增加，在3小时左右AB-8树脂达到解析平衡。

3.4 pH值对静态吸附的影响

pH值不论是在实验中还是在工业生产中，都有着重要作用[6]。 AB-8大孔树脂在25℃、振荡频率100rpm吸附3小时的情况下，进行实验操作。当pH值为4时，吸附率最高，可达到86.59%。

3.5 盐效应对吸附量的影响

AB-8大孔树脂在25℃、振荡频率100rpm吸附3小时的情况下，进行实验操作。随着盐浓度的增加，吸附率降低。综合考虑，加入氯化钠质量浓度为2%较好。

3.6 温度对静态吸附的影响

考察了不同温度下的吸附率。由图3-2可知，当温度为20℃时，为最佳吸附率。

4 结论

通过实验，得到如下结果：最优吸附条件为在pH值为4，温度20℃、盐浓度为2%时2小时达到吸附平衡；解吸条件70%的乙醇溶液，解吸平衡的时间为3小时；其吸附率和解吸率分别是86.59%、31.94%。

参考文献

[1] 王冬梅,尉芹,马希汉.大孔吸附树脂在药用植物有效成分分离中的应用[J]. 西北林学院学报,2002,(1).

[2]刘洋.刺五加主要活性成分的提取分离及微粉化制备[D].哈尔滨：东北林业大学,生命科学与技术学院,2010.

[3] 姜平平,吕晓玲,朱惠丽.花色苷类物质分离鉴定方法[J].中国食品添加剂,2003,（4）:108-109.

[4] 董函竹,刘沛溢,谭天伟.发酵生产S-腺苷-L-蛋氨酸培养条件的优化研究[J].微生物学通报,2006,33(1):110-113.

[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学化工出版社, 2005:143-144.

[6] 陈勇,张晴.AB-8大孔吸附树脂吸附和分离紫甘薯色素的研究[J].中国食品添加剂,2001,（1）:6-9.

作者简介：郝婧玮，硕士学历，牡丹江师范学院生命科学与技术学院，助教，研究方向：植物化学与植物药。

摘要：通过静态吸附实验，考察大孔树脂AB-8对短梗五加果实中花色苷的最优纯化条件。在pH值为4、温度20℃、盐浓度为2%时达到最优吸附，2小时达到吸附平衡；以 70%的乙醇溶液作为解析液，解吸平衡的时间为3小时；其吸附率和解吸率分别是86.59%、31.94%。

关键词：大孔树脂；短梗五加果实；花色苷；静态吸附

基金项目：牡丹江师范学院校级项目——短梗五加果实高效利用工艺研究

项目编号：QY201219

中图分类号：TS254.4 文献标识码：A 文章编号： 1674-0432（2014）-11-32-2

1 短梗五加及其花色苷

短梗五加，五加科五加属落叶灌木或小乔木植物[1]，叶和果分别入药。花色苷是类黄酮——以黄酮核为基础的一类物质中能呈现红色的一族化合物[2]，因功能独特，可用于清除体内自由基、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等[3]。对利用PC、TLC、HPLC等技术测定花色苷结构有过报道[4]。

2 材料与方法

2.1 实验用品

短梗五加果实（风干）、AB-8大孔树脂、盐酸、乙醇、氢氧化钠、氯化钠等、电子天平、微型植物粉碎机、超声波清洗器、紫外可见分光光度计。

2.2 实验方法

2.2.1大孔树脂预处理采用一般方法预处理的树脂用于样品提取相同的体积分数乙醇浸泡4小时以上，滤除乙醇溶液，蒸馏水清洗直到检测不到树脂内的乙醇残留。树脂置于具塞广口瓶，平衡24小时。

2.2.2湿树脂绝干量测定称取一定量AB-8湿树脂3~5克×2份，于105±3℃烘干至恒重，计算绝干树脂量。树脂含水率计算公式如下：■

式中： α是含水率(%)； Wwet表示树脂湿重(g)； Wdry表示树脂干重（克）。

2.2.3 样品溶液制备短梗五加果实（风干）100克，经粉碎后，pH在3.5以下，超声提取50分钟后，过滤，得到目标组分溶液。

2.2.4 静态吸附 取5份绝干重为2.0克树脂，分别加入同浓度过量的目标组分溶液各50毫升。水浴恒温振荡，其条件为：恒定温度25 ℃，摇床摇动频率为100 rpm，进行连续操作24小时。重复三次，取平均值。测定吸光值。

2.2.5 静态解吸吸附达到平衡后，在吸附饱和树脂中分别加入浓度20%、40%、60%、80%、100%的乙醇溶液50毫升，利用水浴恒温振荡器进行解吸附试验，解吸条件为：恒定温度25 ℃，摇床摇动频率为100 rpm和连续操作24小时。重复3次，取平均值。测定解吸附溶液的吸光值。计算解吸率，公式如下： ■

式中：β是解吸率（%）；A0是吸附液初始质量浓度的吸光值；A1是吸附液剩余质量浓度的吸光值；A2是解吸液质量浓度吸光值。

2.2.6 静态吸附时间曲线 取经过预处理的上述树脂2.0克（绝干重），加入同浓度过量的目标组分溶液50毫升，瓶口保鲜膜密封。水浴恒温振荡，第0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时分别取样1毫升。测定吸光值。计算吸附率，公式如下：■

式中： ω是吸附率（%）；A0是吸附液初始质量浓度的吸光值；A1是吸附液剩余质量浓度的吸光值。

2.2.7 静态解吸时间曲线 取上述2.2.6饱和吸附树脂，过滤出溶液。精密加入50毫升已确定的洗脱溶剂，震荡不同时间。第0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时分别用移液枪取样1毫升。测定吸光值。

2.2.8 pH对吸附的影响 以稀盐酸或稀氢氧化钠溶液将目标组分溶液调至不同pH后（pH＝1、2、3、4、5、6、7、8、9），分别加入2.0g的AB-8树脂（绝干重），振荡吸附。

2.2.9 盐效应对吸附量的影响 取目标组分溶液，加入氯化钠使其在溶液中的质量浓度分别为2%、3%、4%、5%，加入2.0g的AB-8树脂（绝干重），振荡吸附。

2.2.10 温度对静态饱和吸附率的影响取4份2.0 克树脂（绝干重）置于锥形瓶中，加入同浓度过量的目标组分溶液各50毫升，在不同温度下（0℃、20℃、30℃、40℃）振荡吸附，每0.5小时取样1毫升检测。

3 结果与分析

3.1 AB-8树脂的静态吸附和解吸能力

经2.2.4实验，测得AB-8树脂分离花色苷吸附率为87.80%。从不同浓度乙醇对树脂解析的吸光值可知70%乙醇解析能力较优。不同浓度乙醇解析率分别为11.11%、23.61%、27.78%、31.94%、29.17%。

3.2 静态吸附动力学曲线

吸附速率也是评定树脂性质的重要因素[5]。由图3-1可知，吸附速率随时间的增长而增加，在2小时左右AB-8树脂达到吸附平衡。

3.3 静态解吸动力学曲线

解吸速率随时间的增长而增加，在3小时左右AB-8树脂达到解析平衡。

3.4 pH值对静态吸附的影响

pH值不论是在实验中还是在工业生产中，都有着重要作用[6]。 AB-8大孔树脂在25℃、振荡频率100rpm吸附3小时的情况下，进行实验操作。当pH值为4时，吸附率最高，可达到86.59%。

3.5 盐效应对吸附量的影响

AB-8大孔树脂在25℃、振荡频率100rpm吸附3小时的情况下，进行实验操作。随着盐浓度的增加，吸附率降低。综合考虑，加入氯化钠质量浓度为2%较好。

3.6 温度对静态吸附的影响

考察了不同温度下的吸附率。由图3-2可知，当温度为20℃时，为最佳吸附率。

4 结论

通过实验，得到如下结果：最优吸附条件为在pH值为4，温度20℃、盐浓度为2%时2小时达到吸附平衡；解吸条件70%的乙醇溶液，解吸平衡的时间为3小时；其吸附率和解吸率分别是86.59%、31.94%。

参考文献

[1] 王冬梅,尉芹,马希汉.大孔吸附树脂在药用植物有效成分分离中的应用[J]. 西北林学院学报,2002,(1).

[2]刘洋.刺五加主要活性成分的提取分离及微粉化制备[D].哈尔滨：东北林业大学,生命科学与技术学院,2010.

[3] 姜平平,吕晓玲,朱惠丽.花色苷类物质分离鉴定方法[J].中国食品添加剂,2003,（4）:108-109.

[4] 董函竹,刘沛溢,谭天伟.发酵生产S-腺苷-L-蛋氨酸培养条件的优化研究[J].微生物学通报,2006,33(1):110-113.

[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学化工出版社, 2005:143-144.

[6] 陈勇,张晴.AB-8大孔吸附树脂吸附和分离紫甘薯色素的研究[J].中国食品添加剂,2001,（1）:6-9.

作者简介：郝婧玮，硕士学历，牡丹江师范学院生命科学与技术学院，助教，研究方向：植物化学与植物药。

摘要：通过静态吸附实验，考察大孔树脂AB-8对短梗五加果实中花色苷的最优纯化条件。在pH值为4、温度20℃、盐浓度为2%时达到最优吸附，2小时达到吸附平衡；以 70%的乙醇溶液作为解析液，解吸平衡的时间为3小时；其吸附率和解吸率分别是86.59%、31.94%。

关键词：大孔树脂；短梗五加果实；花色苷；静态吸附

基金项目：牡丹江师范学院校级项目——短梗五加果实高效利用工艺研究

项目编号：QY201219

中图分类号：TS254.4 文献标识码：A 文章编号： 1674-0432（2014）-11-32-2

1 短梗五加及其花色苷

短梗五加，五加科五加属落叶灌木或小乔木植物[1]，叶和果分别入药。花色苷是类黄酮——以黄酮核为基础的一类物质中能呈现红色的一族化合物[2]，因功能独特，可用于清除体内自由基、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等[3]。对利用PC、TLC、HPLC等技术测定花色苷结构有过报道[4]。

2 材料与方法

2.1 实验用品

短梗五加果实（风干）、AB-8大孔树脂、盐酸、乙醇、氢氧化钠、氯化钠等、电子天平、微型植物粉碎机、超声波清洗器、紫外可见分光光度计。

2.2 实验方法

2.2.1大孔树脂预处理采用一般方法预处理的树脂用于样品提取相同的体积分数乙醇浸泡4小时以上，滤除乙醇溶液，蒸馏水清洗直到检测不到树脂内的乙醇残留。树脂置于具塞广口瓶，平衡24小时。

2.2.2湿树脂绝干量测定称取一定量AB-8湿树脂3~5克×2份，于105±3℃烘干至恒重，计算绝干树脂量。树脂含水率计算公式如下：■

式中： α是含水率(%)； Wwet表示树脂湿重(g)； Wdry表示树脂干重（克）。

2.2.3 样品溶液制备短梗五加果实（风干）100克，经粉碎后，pH在3.5以下，超声提取50分钟后，过滤，得到目标组分溶液。

2.2.4 静态吸附 取5份绝干重为2.0克树脂，分别加入同浓度过量的目标组分溶液各50毫升。水浴恒温振荡，其条件为：恒定温度25 ℃，摇床摇动频率为100 rpm，进行连续操作24小时。重复三次，取平均值。测定吸光值。

2.2.5 静态解吸吸附达到平衡后，在吸附饱和树脂中分别加入浓度20%、40%、60%、80%、100%的乙醇溶液50毫升，利用水浴恒温振荡器进行解吸附试验，解吸条件为：恒定温度25 ℃，摇床摇动频率为100 rpm和连续操作24小时。重复3次，取平均值。测定解吸附溶液的吸光值。计算解吸率，公式如下： ■

式中：β是解吸率（%）；A0是吸附液初始质量浓度的吸光值；A1是吸附液剩余质量浓度的吸光值；A2是解吸液质量浓度吸光值。

2.2.6 静态吸附时间曲线 取经过预处理的上述树脂2.0克（绝干重），加入同浓度过量的目标组分溶液50毫升，瓶口保鲜膜密封。水浴恒温振荡，第0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时分别取样1毫升。测定吸光值。计算吸附率，公式如下：■

式中： ω是吸附率（%）；A0是吸附液初始质量浓度的吸光值；A1是吸附液剩余质量浓度的吸光值。

2.2.7 静态解吸时间曲线 取上述2.2.6饱和吸附树脂，过滤出溶液。精密加入50毫升已确定的洗脱溶剂，震荡不同时间。第0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时分别用移液枪取样1毫升。测定吸光值。

2.2.8 pH对吸附的影响 以稀盐酸或稀氢氧化钠溶液将目标组分溶液调至不同pH后（pH＝1、2、3、4、5、6、7、8、9），分别加入2.0g的AB-8树脂（绝干重），振荡吸附。

2.2.9 盐效应对吸附量的影响 取目标组分溶液，加入氯化钠使其在溶液中的质量浓度分别为2%、3%、4%、5%，加入2.0g的AB-8树脂（绝干重），振荡吸附。

2.2.10 温度对静态饱和吸附率的影响取4份2.0 克树脂（绝干重）置于锥形瓶中，加入同浓度过量的目标组分溶液各50毫升，在不同温度下（0℃、20℃、30℃、40℃）振荡吸附，每0.5小时取样1毫升检测。

3 结果与分析

3.1 AB-8树脂的静态吸附和解吸能力

经2.2.4实验，测得AB-8树脂分离花色苷吸附率为87.80%。从不同浓度乙醇对树脂解析的吸光值可知70%乙醇解析能力较优。不同浓度乙醇解析率分别为11.11%、23.61%、27.78%、31.94%、29.17%。

3.2 静态吸附动力学曲线

吸附速率也是评定树脂性质的重要因素[5]。由图3-1可知，吸附速率随时间的增长而增加，在2小时左右AB-8树脂达到吸附平衡。

3.3 静态解吸动力学曲线

解吸速率随时间的增长而增加，在3小时左右AB-8树脂达到解析平衡。

3.4 pH值对静态吸附的影响

pH值不论是在实验中还是在工业生产中，都有着重要作用[6]。 AB-8大孔树脂在25℃、振荡频率100rpm吸附3小时的情况下，进行实验操作。当pH值为4时，吸附率最高，可达到86.59%。

3.5 盐效应对吸附量的影响

AB-8大孔树脂在25℃、振荡频率100rpm吸附3小时的情况下，进行实验操作。随着盐浓度的增加，吸附率降低。综合考虑，加入氯化钠质量浓度为2%较好。

3.6 温度对静态吸附的影响

考察了不同温度下的吸附率。由图3-2可知，当温度为20℃时，为最佳吸附率。

4 结论

通过实验，得到如下结果：最优吸附条件为在pH值为4，温度20℃、盐浓度为2%时2小时达到吸附平衡；解吸条件70%的乙醇溶液，解吸平衡的时间为3小时；其吸附率和解吸率分别是86.59%、31.94%。

参考文献

[1] 王冬梅,尉芹,马希汉.大孔吸附树脂在药用植物有效成分分离中的应用[J]. 西北林学院学报,2002,(1).

[2]刘洋.刺五加主要活性成分的提取分离及微粉化制备[D].哈尔滨：东北林业大学,生命科学与技术学院,2010.

[3] 姜平平,吕晓玲,朱惠丽.花色苷类物质分离鉴定方法[J].中国食品添加剂,2003,（4）:108-109.

[4] 董函竹,刘沛溢,谭天伟.发酵生产S-腺苷-L-蛋氨酸培养条件的优化研究[J].微生物学通报,2006,33(1):110-113.

[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学化工出版社, 2005:143-144.

[6] 陈勇,张晴.AB-8大孔吸附树脂吸附和分离紫甘薯色素的研究[J].中国食品添加剂,2001,（1）:6-9.

作者简介：郝婧玮，硕士学历，牡丹江师范学院生命科学与技术学院，助教，研究方向：植物化学与植物药。