HPLC法测定藏药白花秦艽不同部位中龙胆苦苷的含量△

2014-07-30陈静

中国民族医药杂志 2014年3期

陈静

(西藏藏医学院，西藏拉萨 850000)

白花秦艽藏语解吉嘎保Gentiana straminea Marin.，为龙胆科麻花秦艽，主要分布于西藏、四川西部、湖北西部、青海、甘肃、宁夏，生长在海拔2000～4950m的山坡、草地、灌丛、河滩，其以花入药，性味苦、平，藏医临床用于清热消肿，解毒热，治胃病［1-3］。文献报道［4-6］，龙胆苦苷是龙胆科植物的特征性成分，可用于理化鉴别和品质评价。本文采用高效液相色谱法测定白花秦艽不同部位中的龙胆苦苷含量，进行含量分析，为藏药白花秦艽药材的质量控制提供科学依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器:Waters-e2695高效液相色谱仪(美国Waters，2998型紫外检测器)，PL202-L型电子天平(Metteler Tole Do)。

1.2 试药:龙胆苦苷对照品购于成都普菲德生物技术有限公司，批号:130426;白花秦艽药材采于西藏自治区林芝地区，经西藏自治区药材鉴定专家嘎务副教授鉴定为正品;甲醇为色谱纯(进口)，水为去离子水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验:色谱柱:Waters SunFire C18(4.6mm ×150mm，5μm);流动相:甲醇 -水(30:70);流速1.0mL/min;检测波长:254nm;理论塔板数按龙胆苦苷峰算不低于3000。该条件下，龙胆苦苷对照品与供试品保留时间相同，如图1所示。

图1 龙胆苦苷与供试品高效液相色谱图

2.2 对照品溶液的配制:精密称取已处理的龙胆苦苷对照品 0.0100g，加甲醇制成 10mL，浓度为 1.0mgμmL-1的对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备:精密称取白花秦艽茎、花样品粉末约0.2g，分别置于50mL容量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理30min，0.45μm滤膜滤过，续滤液作供试品溶液。

2.4 线性关系考察:精密吸取对照品溶液 0.1，0.3，0.5，1.0，2.0mL，置于 10mL 容量瓶中，以甲醇定容至刻度，每次进样10μL，依次注入高效液相色谱仪，得线性回归方程:Y=7895.9X+4752.5，r2=0.9996。结果表明，龙胆苦苷在0.05～2μg范围内呈良好的线性关系。

2.5 精密度考察:精密吸取一批对照品溶液，分别注入液相色谱仪，测定龙胆苦苷的峰面积，RSD为0.99%，结果显示精密度良好。

2.6 稳定性考察:取同一供试品溶液，分别放置0，4，8，12，18，24(h)，注入液相色谱仪，测定龙胆苦苷峰面积，RSD为2.41%，表明在24h内基本稳定。

2.7 重复性考察:取同一样品粉末6份，按供试品溶液制备方法制备成样品溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定龙胆苦苷峰面积，RSD为1.91%。

2.8 加样回收率实验:取已知含量的同一样品白花秦艽花粉末5份，每份约0.1g，精密称定，精密加入对照品适量，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，注入高效液相色谱仪，测定龙胆苦苷的峰面积，计算回收率，结果见表1。