泪腺炎患者血清中白细胞介素-4、白细胞介素-17和γ-干扰素的含量及意义

杨萍 朱豫

泪腺炎患者血清中白细胞介素-4、白细胞介素-17和γ-干扰素的含量及意义

杨萍 朱豫

泪腺炎；白细胞介素-4；白细胞介素-17；γ-干扰素

目的探讨泪腺炎患者血清中白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-17和γ-干扰素(γ-interferon，γ-IFN)的含量及意义。方法收集2012年10月到2013年7月于我院诊断为泪腺炎的31例患者的炎症期及炎症缓解期血清样本各31份，另收集同期正常体检血清标本32份为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期和正常血清中IL-4、IL-17、γ-IFN的含量，并进行对比分析。结果泪腺炎患者炎症期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN 3种因子含量分别为945.96～1594.28 ng·L-1、178.42～300.50 ng·L-1和371.56～432.08 ng·L-1，较炎症缓解期(分别为604.06～987.33 ng·L-1、106.60～156.78 ng·L-1和175.86～241.04 ng·L-1)及正常对照组(分别为604.84～1293.06 ng·L-1、108.88～164.36 ng·L-1和166.00～191.52 ng·L-1)显著增高(均为P<0.05)；泪腺炎患者炎症缓解期与正常对照组血清中3种因子含量相比，差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论以IL-4、IL-17和γ-IFN为主要代表的Th1、Th17及Th2细胞可能参与了泪腺炎病变过程，并可在血清中检测到变化，该疾病是与全身免疫相关的。

[眼科新进展，2014，34(5)：471-473]

近年来，临床上具有免疫反应特征的泪腺炎具有增多趋势，一些研究显示其病理特征为泪腺大量T淋巴细胞浸润[1]，然而其病因及发病机制尚未明了。免疫学研究多认为该病的发生与淋巴细胞对泪腺自身抗原间产生的异常免疫应答有关，多种炎症因子及趋化因子参与其中。γ-干扰素(γ-interferon，γ-IFN)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和IL-17分别作为Th1、Th2以及Th17细胞最有特征性的细胞因子一直备受关注。本研究观察一组免疫反应相关泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期血清中的IL-4、IL-17、γ-IFN的水平，并与正常血清中含量进行对比，现将结果总结报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料收集2012年10月到2013年7月于我科诊断为免疫反应相关泪腺炎患者31例，其中男12例、女19例；年龄18～61岁，平均42.8岁。采集每例患者炎症期与炎症缓解期血清样本各31份。另收集同期于我院体检的正常血清标本32份，均无泪腺炎及其他免疫性疾病，作为正常对照组，男17例，女15例；年龄22～63岁，平均40.3岁。

免疫反应相关泪腺炎纳入标准：反复发作一侧或双侧泪腺区红肿肿胀，病史超过1个月，未行糖皮质激素、免疫抑制剂、局部放射等相关治疗。排除标准：其他眼科疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病以及恶性肿瘤等。本研究方案经过郑州大学第一附属医院伦理委员会的审批；所有患者签署知情同意书。

1.2血清标本收集与检测方法泪腺炎患者均于清晨空腹采血2 mL，离心后取上清，置于EP管中-80 ℃低温冰箱储存备检。正常对照组血清为我院门诊体检中心符合条件的正常血清标本，均测血清中IL-4、IL-17、γ-IFN的含量。

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期和正常血清中IL-4、IL-17、γ-IFN的水平，按照试剂说明书操作。酶标仪(美国Thermo Scientific 公司 Multiskan MS型)450 nm处检测吸光度A值，绘制出标准曲线，计算出IL-4、IL-17、γ-IFN的浓度值。

2 结果

2.1正常对照组与泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN的含量正常对照组血清中IL-4含量为604.84～1293.06(826.09±137.40)ng·L-1，IL-17含量为108.88～164.36(133.42±17.53)ng·L-1，γ-IFN含量为166.00～191.52(191.86±17.82)ng·L-1。泪腺炎患者炎症期血清IL-4含量为945.96～1594.28(1151.56±178.43)ng·L-1；IL-17含量为178.42～300.50(220.68±37.07)ng·L-1，γ-IFN含量为371.56～432.08(400.28±15.57)ng·L-1。泪腺炎患者炎症缓解期血清中IL-4含量为604.06～987.33(890.47±194.68)ng·L-1，IL-17血清含量为106.60～156.78(126.65±15.30)ng·L-1，γ-IFN含量为175.86～241.04(203.82±19.63)ng·L-1。

2.2正常对照组与泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量比较正常对照组与泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量比较见表1，由表1可以看出：正常对照组和泪腺炎患者炎症期IL-4、IL-17和γ-IFN含量差异均有统计学意义(均为P<0.05)，正常对照组和泪腺炎患者炎症缓解期IL-4、IL-17和γ-IFN含量差异均无统计学意义(均为P>0.05)；泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量比较，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。

表1 正常对照组与泪腺炎患者炎症期及炎症缓解期血清中细胞因子含量的比较Table 1 Comparison with serum levels of cytokines in normal control group,inflammation and inflammation remission of dacryoadenitis patients

3 讨论

3.1炎症因子与泪腺炎多种自身免疫性疾病的研究认为，Th1/Th2失衡是主要原因。γ-IFN和IL-4分别作为Th1 和Th2 细胞产物中最有特征性的细胞因子，它们之间的平衡对Th0分化成Th1或Th2起关键调控作用。同时，国内外近期研究发现不同于Th1和Th2的Th17细胞，因其独立的分化和发育调节功能，成为自身免疫病机制中的新的要素。Th17细胞特异性地产生IL-17[2]，但不产生γ-IFN和IL-4。在机体内IL-6与TGF-β通过Th17独特的RORγt信号转导通路启动该细胞分化，随后Th17细胞通过自分泌扩大分化规模、活化并启动STAT3信号转导通路，上调转录调节因子RORγt的表达，从而编码表达IL-17并发挥其生物学效应[3-4]。IL-17被证实与多种炎症及自身免疫性疾病的发生有关[5-6]，靶向Th17细胞的分化、发育及IL-17本身的治疗方案在类风湿性关节炎、多发性硬化及银屑病等多种自身免疫病中得到肯定，深入了解其分化调节及生物学功能，对于认识机体免疫调节规律、理解疾病发病机制提供了新思路，对于寻求更有效的疾病干预靶点有非常重要的理论意义和实际意义。

3.2IL-4、IL-17和γ-IFN含量变化分析及意义本研究中正常人血清中可测得一定含量的IL-4、IL-17和γ-IFN存在，说明在正常情况下，这些细胞因子共同参与机体的免疫反应和免疫调节。目前尚无明确数据显示正常人血清中这3种因子的含量范围，但在一些疾病状态下，如炎症、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等，血清中这些细胞因子水平发生变化[7-8]。

泪腺炎患者炎症期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量均有明显增高，与正常对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。故认为血清中IL-4、IL-17和γ-IFN的含量变化与泪腺炎相关。Guo等[9]通过对泪腺炎动物模型的研究发现，IL-4阳性细胞在颌下腺、脾脏及泪腺组织中表达较正常小鼠高，血清中可检测到IL-4、IL-17和γ-IFN含量增高；张梅等[10]发现γ-IFN可导致泪腺及结膜上皮细胞发生炎症反应以及泪腺炎症损伤；在对干燥综合征患者的研究中发现，患者外周血中Th17细胞数增高，与外分泌腺体炎症密切相关。泪腺炎患者炎症缓解期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量，与正常对照组比较，水平稍有波动，但差异均无统计学意义(均为P>0.05)。说明这三种因子参与了炎症反应过程，可作为检测泪腺炎症反应的血清学指标。

本研究结果分析，虽然泪腺炎患者炎症期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量均有显著增高，但IL-4含量增高幅度较小、个体差异较大，而IL-17和γ-IFN两种炎症因子增高幅度更为明显、且个体差异较小，与正常对照组无重叠，故认为后两者临床检测意义更大。

一些研究显示，IL-4、IL-17和γ-IFN参与多种炎症与自身免疫病的进程：如在Graves病中检测到初发患者血清中γ-IFN、IL-4水平升高，且γ-IFN可能是导致疾病容易复发的重要因素之一[11]；在原发性干燥综合征患者唇腺组织中有大量的淋巴细胞浸润及IL-17表达，IL-17参与了炎症损伤的过程[12]。故在使用IL-17和γ-IFN作为泪腺炎患者炎症期的辅助诊断指标时，应排除其他免疫性疾病。

泪腺炎患者炎症期血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量升高，说明在局部炎症反应的同时可能存在全身免疫系统的反应，故在临床泪腺炎诊治过程中，当检测到血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量明显增高时，应首先给予全身治疗，而血清中IL-4、IL-17和γ-IFN含量下降到正常水平泪腺仍有炎症时，可给予局部治疗。这些因子的含量变化有望作为临床诊断和治疗疗效的评估指标。同样，针对这些相关的细胞因子或者其信号转导通路的干预，可能阻止病情进展。如最近有研究，通过利用SiRNA减少T细胞中STAT3水平，抑制Th17细胞的分化而治疗类风湿性关节炎[13]，同样为治疗免疫反应相关泪腺炎提供了新的思路。

1 Moriyama M,Tanaka A,Maehara T,Furukawa S,Nakashima H,Nakamura S.T helper subsets in Sjögren’s syndrome and IgG4-related dacryoadenitis and sialadenitis:A critical review[J].JAutoimmun,2013,7(7):1-8.

2 唐碧霞,张烜,唐福林.IL-17与自身免疫性疾病关系的研究进展[J].基础医学与临床,2008,128(1):94-97.

3 柴文,张宁,王艳青,卜军,何奔.孤儿核受体RORs的病理生理作用及其调控机制[J].生理科学进展，2013,44(2):87-92.

4 王国兵，李成荣，杨 军，温鹏强，贾实磊.白细胞介素 6/STAT3 信号活化在急性免疫性血小板减少性紫癜患儿辅助性 T 淋巴细胞 17/调节性 T 淋巴细胞失衡中的作用[J].实用儿科临床杂志，2012,27(13):1005-1008.

5 王朦夏，洪铭范.多发性硬化与Th17细胞及其主要影响因子的关系[J].新乡医学院学报，2012,29(8):641-644.

6 常红,张秋业,庄超.辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞偏倚在川崎病发病机制中的作用[J].实用儿科临床杂志，2011,26(9):664-666.

7 刘海螺，高玉兴，李淑兰，李 慧，马爱华，席家水，等.白细胞介素-17、白细胞介素-23和肿瘤坏死因子-α在吉兰-巴雷综合征发病中的作用[J].实用儿科临床杂志，2012，27(21)：1675-1677.

8 Saito S,Nakashima A,Shima T,Ito M.Th1/Th2/ Th17 and regulatory T cell paradigm in pregnancy[J].AmJReprodImmunol,2010,63(6):601-610.

9 Guo J,Qian J,Zhang R,Yuan YF.Expression of interleukin-17 in autoimmune dacryoadenitis in MRL/lpr mice[J].CurrEyeRes,2010,35(10):865-871.

10 张梅，刘祖国，陈家祺，郑健.γ-干扰素对培养人原代结膜及泪腺上皮细胞表达炎症相关因子的影响[J].眼科新进展,2003,23(4):229-234.

11 李玉琳,汤旭磊.Graves’病患者血清中γ-IFN,IL-4和IL-18水平检测及其相关研究[J].第四军医大学学报,2004,25(17):1607-1610.

12 王喜梅,厉小梅,李向培.白细胞介素-17在原发性干燥综合征患者唇腺组织和外周血的表达[J].中华风湿病学杂志，2009，13(5)：292-295.

13 郭小芹,韩根成,黎燕.IL-17/IL-17R信号转导机制及功能的研究进展[J].国际免疫学杂志,2012,35(6):416-421.

date：Oct 14,2013

Contents and significances of interleukin-4,interleukin-17 and γ-interferon in serum of dacryoadenitis patients

YANG Ping，ZHU Yu

dacryoadenitis;interleukin-4;interleukin-17;γ-interferon

Objective To investigate the contents and significances of interleukin-4(IL-4),IL-17 and γ-interferon(γ-IFN) in serum of dacryoadenitis patients.Methods A total of 31 dacryoadenitis patients with their data and blood samples in inflammation and remission stage were collected in our hospital from October 2012 to July 2013,then another 32 normal cases with their blood samples were collected as normal group.The content of IL-4,IL-17 and γ-IFN in serum of patients were detected by ELISA.Results IL-4,IL-17 and γ-IFN in serum levels in inflammatory stage of dacryoadenitis patients[945.96-1594.28 ng·L-1，178.42-300.5 ng·L-1and 371.56-432.08 ng·L-1]were significantly higher than those of remission[604.06-987.33 ng·L-1，106.6-156.78 ng·L-1and 175.86-241.04 ng·L-1] and normal control group[604.84-1293.06 ng·L-1，108.88-164.36 ng·L-1and 166-191.52 ng·L-1](allP<0.05),there was no statistical significance between inflammation remission stage of dacryoadenitis patients and normal control group(allP>0.05).Conclusion Th1 and Th17 Th2 cells which were represented by IL-4,IL-17 and γ-IFN may participate in the lacrimal gland inflammation process,and can be detected the changes in serum,the disease is associated with systemic immune.

杨萍，女，1986年7月出生，河南商丘人，硕士。研究方向：眼外伤与眼眶病。联系电话：18736012110；E-mail：pyang_172@163.com

AboutYANGPing：Female,born in July,1986.Postgraduate student.Tel:18736012110;E-mail:pyang_172@163.com

2013-10-14

450052 河南省郑州市，郑州大学第一附属医院眼科

朱豫，E-mail:13673666718@163.com

杨萍,朱豫.泪腺炎患者血清中白细胞介素-4、白细胞介素-17和γ-干扰素的含量及意义[J].眼科新进展,2014,34(5):471-473.

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10.13389/j.cnki.rao.2014.0129

修回日期：2013-12-29

本文编辑：方红玲

Accepteddate:Dec 29,2013

From theDepartmentofOphthalmology,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,HenanProvince,China

Responsibleauthor:ZHU Yu,E-mail:13673666718@163.com

[RecAdvOphthalmol，2014，34(5)：471-473]