浅谈农药残留速测法的实验室内部质量控制

金晓辉

（朝阳市种子管理站，辽宁 朝阳 122000）

随着生活水平的不断提高，人们对食品质量提出了越来越高的要求，食品安全成了大家关注的问题，而准确检测农药残留是保障食品质量安全的关键所在。本文所讨论的农药残留快速检测法GB/T5009.199-2003是我国现行推广应用较多的，依据酶抑制原理建立的农药残留速测法。在农药残留的快速检测中，为了保障检验结果的准确性，在日常工作中要注意开展质量控制，实验室的质量控制包括室间质量控制和室内质量控制。本文主要探讨室内质量控制。实验室内部质量控制简称“内部控制”。内部控制是实验室自我控制质量的常规程序，它能反映分析质量稳定性状况，以便及时发现分析中异常情况，随时采取相应的校正措施。

质控的好坏直接影响着平日的检测工作。影响质控主要有以下几个因素：技术人员在质量上的控制、对样品以及试剂的控制、对检测仪器的控制和实验室内环境的控制等。

1 检测人员的质量控制

在这一环节上应该重点落实检测人员对所需理论知识、实际操作和判断的熟练程度。每个人都应该积极参加上级部门组织的培训，不断充实理论知识，提高检测水平。此外，实验室内应该把检测方法进行必要的统一，按照国家的的标准、规章制度等做好各级人员的职责以及权限。

2 试剂及样品的质量控制

2.1 试剂的一般质量要求

2.1.1 速测试剂的环境控制

速测试剂放置环境的温度一定要控制在规定范围之内。酶抑制率测试法中用到的试剂基本都是生化试剂，所以，它们的保存环境比较特殊。对于粉剂化的酶及底物应该放于-18℃的环境中。对于已被配制成溶液的药剂，适应保存的环境温度为0-4℃之间。而浸提剂在任何环境下都可以保存。

2.1.2 速测试剂配制注意事项

速测试剂在配制的时候一定要注意标记和配制的日期。在制配样液的时候，浸提是否充分，直接影响着结果的好坏。酶试剂和样品液之间产生反应后持续10分钟，时间长短不同，产生的结果也是不一样的。反应完之后，在冰箱中取出试剂，待其缓解到与室内温度平衡的时候，摇匀使用。这时候，在保证液体试剂清澈的环境下，按照标准加入一定量的酶、显色剂和底物，漏加或多加都会对实验造成坏的影响。实验中，还要保证试剂在瓶中吸出后不得再注射回试剂瓶。

2.1.3 注意保质和生产日期

认真核对试剂的生产日期和保质期，一定要保证没有变质的情况下使用。所以，为了防止变质，不论哪种试剂，用一瓶开一瓶，直到用完后才可以打开下一瓶。

2.2 样品的质量控制

检验结果是否准确要看样品是否合格，因此，样品的正确采集、保存和处理是非常重要的。

2.2.1 取样注意事项

取样时要注意的是，最好选用没有水洗过、有代表性的蔬菜，按照随机抽取的方式分样分装，然后在1天内送到实验室。

2.2.2 不同样品的处理方法

菜叶的取样要用到专门的菜叶取样器，分别取8-10片不同的植株叶片；果菜的样品要用取样器在其表面取约1厘米的样本，然后再用专用剪刀切成1厘米左右的块状。

2.2.3 特殊样品的处理方法

有些果蔬中含有大量植物次生质，这些对酶是有直接影响的。例如：葱、蒜、香菜、芹菜等，其中有些蔬菜中含有很高的叶绿素，彼此之间产生比色反应，并且容易出现假阳性，果蔬的辛辣味越浓，出现这种现象的频率越高。因此，对于这些性质特殊的果蔬来说，最好是采用整体浸提的方法来消除干扰。

3 检测仪器设备的质量控制

3.1 电子天平使用

电子天平的工作环境应无大的振动及电源干扰，无腐蚀气体及液体。天平在每次使用前都必须预热（15分钟以上）。较长时间未使用，则应对其校正。

3.2 仪器使用

农药残毒快速检测仪在使用前，最好要把仪器预热5-10分钟，使仪器稳定一下。仪器要保证在正常的环境条件下工作。

3.3 器具使用原则

器具专用，转移彻底，振荡均匀。在加提取液振荡提取残留农药这一过程中，各种移液管和加液管要分门别类,不可用同一器具盛用不同液体,因为即使刷干净了,也会对结果有不同程度的影响；转移或滴加液体要确保液面对准刻度线，释放液体要彻底；有条件的话最好选用振荡器，以消除人为因素的干扰。

3.4 准确调零，掌握好速度

检测设备之前的预热调零是非常必要的，调整好之后准备比色皿进行检测，此时一定要正置；此外，在加酶试剂产生显色反应的时候，对照并分析样品的加入量。

4 实验室的环境条件质量控制

4.1 具备的设施

为了保障实验室的安全，应该具备的设施有：带有排风系统的试剂柜、防火设施、实验人员所需的防毒面具和急救药品箱等。

4.2 保证实验室空气环境

为了实验室内的气体排出室外，应该装有排风机，排气次数最好在5次以上。还可以设置空调机，将温度控制在20℃以内，过高或者过低都会影响酶的活性，从而影响实验结果。

5 检测结果质量控制

在快速检测仪中放入要检测的样品，3分钟之后读出并记录检测数据，分析检测结果的数据来确定检测过程的准确性。

5.1 空白试验

判定标准：空白测试3min得吸光度差值0.4≤Ac≤0.8。Ac＜0.4的原因：一是，酶的活性不够；二是，温度太低。

解决办法：适当增加酶的用量或更换酶；保证反应温度37℃-38℃。

5.2 农药标准品加标试验

加标合格率达100%。

5.3 平行样测定

取测定样品数量的10%-15%做平行，5个样品以下，应增加到100%。

5.4 检测结果中抑制率出现负值原因分析

检测结果中抑制率出现负值，是指在计算中样本的△A。(3分钟后与3分钟前吸光值的差)比空白值的△A。(空白3分钟后与3分钟前吸光值的差)要大。造成的原因：一是，操作中的系统误差，如果操作中不够熟练就会产生人为的系统误差。较小的负值误差(－10%)以下，则是在允许范围之内。否则必须进行两次重复检测；二是，试剂从冰箱取出后，未恢复到室温进行对照测试；对照测试时间与样品测试时间相隔太久，导致光照与样品测试温度条件相差较大；三是，被测样品色素干扰较严重；反应试剂取用量是否准确。另外，其他非测试孔空白的孔位可能也会出现负值。仪器操作时，注意托盘上的孔位不能有头发、棉丝等其他异物，如有污物或液体可用过滤纸擦干净，以免影响光路测量。

总之，在农残实验室的质量控制方面一定要严格并长期执行。实验室人员要通过相互探讨整理出日常中不可缺少的实验操作手册，并坚持执行，不得松懈，只有这样，才能体现出质量控制的重要性。其目的主要是把误差控制到最小，来保证检测数据的准确。此外，在检测蔬菜样品的过程中，态度一定要严肃认真，按照程序一步步的进行，建议对抑制率≥50%以上的菜样，应进一步采用色谱或质谱方法定性定量分析，以确定其农药残留是否真的超标，更客观地为政府工作提供依据。S

［1］王传新,王国礼.现代检验医学技术及质量控制[M].济南：山东科学技术出版社,2004：139.

［2］叶小君,蓝萍.农药残留速测仪在蔬菜农残检测中的应用[J].农技服务,2010(1)：138.