固氮解磷解钾牛粪菌肥制作与工艺优化

方华舟+张婷

摘要：以一种芽孢杆菌（Bacillus sp.）、假单胞菌（Pseudomonas sp.）、木霉（Trichoderma sp.）及曲霉（Aspergillus sp.）组成自制腐熟菌剂，以圆褐固氮菌（Azotobacter chroococcum）、巨大芽孢杆菌（Bacillus megatherium）、胶质样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）组成功能菌剂，在对新鲜牛粪一次发酵充分腐熟的基础上，以功能菌剂不同接种量对腐熟牛粪进行二次发酵，以探索和优化牛粪菌肥制作工艺及流程。结果表明，自制腐熟菌剂升温迅速、高温期长、腐熟效果良好；二次发酵功能菌株数量、发芽指数、发酵时间、主要速效肥力效果、发酵过程控制等方面，0.5%接种量明显优于0.1%接种量，与1.0%接种量相接近。说明功能菌剂二次发酵接种量以0.5%较为适宜，以充分腐熟牛粪为发酵基质，可生产优质有机菌肥。

关键词：牛粪；功能菌肥；制作；工艺优化

中图分类号：S141.4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）03-0635-05

近年来，随着中国养牛业的迅猛发展，产生了大量牛粪，如果处理不当，将对周边环境及人们健康造成重大威胁。研究表明，将禽畜粪便进行好氧堆肥生产优质有机肥，不仅可有效解决大量禽畜粪便污染，更可良好实现禽畜粪便资源化利用及适应现代有机农业发展需求，走生态、环保、循环农业发展道路，这已被证明为现代畜牧业及现代农业有机结合的重要和行之有效的途径[1，2]。牛粪经堆肥化处理，发酵腐熟形成重要活性有机物质—腐殖质，不仅对作物土壤具有重要改良作用，可增加土壤有机质含量，更是其肥力元素的主要载体，为作物生长提供较充足的氮、磷、钾、钙、镁、硫、锌等各种大量及中微量元素，且稳产高产、品质优良[2，3]，因此近年来受到了广泛重视。然而，自然堆肥腐熟周期长，且氮、磷、钾等主要肥力元素含量偏低，导致肥力效果不显著等，极大地限制了牛粪等禽畜粪便的规模化、工业化利用。加快堆肥腐熟进程，切实提高堆肥效率，并在此基础上进一步添加固氮、解磷、解钾等功能菌株，大力增加作物土壤中有益功能菌株数量，切实提高腐熟有机质氮、磷、钾等主要肥力元素含量水平，将普通堆制有机肥转变为有机功能菌肥，是近年来对牛粪等有机废弃物进行资源化、工业化利用的主要发展方向[4，5]。目前，国内外学者关于加快牛粪等禽畜粪便堆肥发酵及腐熟进程方面的研究成果及报道较多，对堆肥适宜碳氮比、含水量、翻堆次数、通氧量、腐熟菌剂接种量等研究较为清楚[4-6]，但对进一步制作相关功能菌肥的研究及报道较为少见。本试验充分借鉴前人快速堆肥腐熟经验及成果，以自制牛粪腐熟菌剂快速腐熟牛粪，并在此基础上，进一步添加固氮、解磷、解钾等功能菌株进行二次发酵，以二次发酵工艺及参数为研究重点，以期获得氮、磷、钾等主要肥力元素含量高的牛粪功能菌肥产品，为工业化利用牛粪资源及田间应用提供一定技术参数及理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

新鲜牛粪，棉子壳，麸皮，土豆，蛋白胨、牛肉膏、甘露醇、葡萄糖、CaCO3、Ca3（PO4）2、Na2HPO4、钾长石粉（K2O含量10.02%）及其他常见药品；普通摇床、高压灭菌锅、超净工作台、自制二次发酵罐（外包保温材料）及锥形瓶、培养皿等常用设备与器皿。经测定，新鲜牛粪含水率为82%，全碳27.8%，全氮 1.53%，粗蛋白3.18%，粗纤维9.76%，粗脂肪0.46%，总糖7.41%，淀粉4.39%，pH 7.2；棉子壳含水率8.9%，全碳59.7%，全氮1.49%，粗蛋白4.39%，粗纤维45.6%，粗脂肪4.51%，总糖3.37%，淀粉2.44%，pH 6.2。

1.2 菌株及其培养基

腐熟菌株：XC1、XC4、MC1、MC2分别为荆楚理工学院生物工程学院应用微生物技术实验室从牛粪自然堆肥中分离获得的一种芽孢杆菌（Bacillus sp.）、假单胞菌（Pseudomonas sp.）、木霉（Trichoderma sp.）及曲霉（Aspergillus sp.）[7，8]；功能菌株：采用常用菌株，其中固氮菌为圆褐固氮菌（Azotobacter chroococcum），解磷菌为巨大芽孢杆菌（Bacillus megatherium），解钾菌为胶质样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）[9，10]。

菌株培养基：牛肉蛋白胨培养基（用于菌株XC1、XC4培养），PDA培养基（用于菌株MC1、MC4培养）；阿须贝固氮培养基（甘露醇10 g，KH2PO4 0.2 g，MgSO4·7H2O 5.0 mg，NaCl 0.2 g，CaSO4·2H2O 0.1 g，CaCO3 5.0 g，蒸馏水1 000 mL， pH7.2～7.4），解磷培养基[葡萄糖10 g，（NH4）2 SO4 0.5 g，KCl 0.3 g，MgSO4·7H2O 0.3 g，Ca3（PO4）2 10 g，FeSO4·7H2O 0.03 g，MnSO4·4H2O 0.03 g，蒸馏水1 000 mL， pH 7.0～7.5]，解钾培养基（蔗糖5.0 g，Na2HPO4 2.0 g，MgSO4·7H2O 5.0 mg，FeCl3 5.0 mg，CaCO3 0.1 g，钾长石粉1.0 g，蒸馏水1 000 mL，pH 7.0～7.5），固氮、解磷、解钾培养基分别用于固氮菌、解磷菌、解钾菌培养，以保持功能菌株的良好活性[11，12]。

1.3 牛粪处理与建堆

以棉子壳为辅料，加入到新鲜牛粪中并搅拌均匀（主辅料体积比约1.0∶0.4），调节牛粪基质含水量至60%～65%，pH 7.4～7.6，C∶N约22∶1。在平整地面以木棍作密“井”字形排列，将处理后的牛粪基质铲至木棍上建大小约2.0 m×1.5 m×1.5 m堆体，堆顶面每间隔30 cm以直径1.5 cm木棍从顶端向底部打孔，以保证堆肥发酵对氧气的需求[3]。

1.4 腐熟菌剂制作与一次发酵

将腐熟菌株XC1、XC4及MC1、MC2分别接种至牛肉蛋白胨培养基及PDA培养基，摇床180 r/min分别扩大培养3 d、5 d，按体积比1∶1混合后，与等体积灭菌麸皮混合，堆集发酵3 d后晾干，即为腐熟菌剂。将腐熟菌剂按1.0%比例均匀接入牛粪基质中建堆，以不接菌为对照，间隔3 d记录堆肥发酵温度变化情况，当发酵温度超过60 ℃时予以翻堆，以高温期温度、高温期时间及农业部行业标准NY/T394-2000为主要标准，观察堆肥腐熟及进程，比较自制腐熟菌剂性能及效果。

1.5 功能菌剂制作与二次发酵

分别将将固氮、解磷、解钾功能菌接种至固氮、解磷、解钾培养基，摇床180 r/min扩大培养5～7 d，稀释平板法测定各菌液菌数，使各菌液菌数约为108个/mL；各菌液按1∶1∶1等体积混合后，按体积比1∶1将混合菌液加入到灭菌麸皮中，混匀、堆积发酵3 d后晾干，即为功能菌剂。当堆肥腐熟后由高温期下降至约40 ℃，分别分堆至自制保温发酵桶，并按不同比例接入功能菌剂，适当浇水调节含水量至60%～65%，进行功能菌剂二次发酵。

1.6 二次发酵主要参数确定及优化

将复合功能菌剂分别按0.1%、0.5%、1.0%的比例接入二次发酵堆体，每天测定并记录堆体发酵温度；当发酵温度超过40 ℃即进行翻堆，以保证功能菌株适宜生长温度；当堆体温度明显下降且趋于稳定或已稳定，即终止发酵。每天于测定堆体发酵温度时，同步对发酵堆体取样，以稀释平板法分别涂布于固氮、解磷、解钾固体培养基，测定发酵堆体中固氮、解磷、解钾功能菌株数量，分析功能菌剂不同接种量在腐熟牛粪基质中进一步发酵全过程各菌株数量变化及增殖规律，比较功能菌剂不同接种量及各功能菌株数量与发酵温度、翻堆次数、菌株增殖速度等发酵过程主要参数之间的相互影响及关系，优化功能菌肥制作主要工艺参数及流程。

1.7 功能菌肥性能测定

分别取一次发酵及二次发酵堆肥样品各100 g、10 g，同步测定其发芽指数及速效氮、速效磷、速效钾含量，3次重复，结果以平均值表示，以评价各发酵处理及菌肥产品基本性能。发芽指数测定：以样品加10倍去离子水浸提2 h；在直径为10 cm培养皿内铺洁净滤纸，均匀放置水稻种子20粒，取浸提液5 mL均匀滴入，以去离子水为对照，置于恒温箱25 ℃培养96 h，测定各堆肥样品发芽指数大小，以比较自制腐熟菌剂及功能菌剂不同接种量对堆肥腐熟程度、促进发芽生根等情况的影响。发芽指数计算公式：发芽指数（GI）=（浸提液种子发芽率×种子根长）/（去离子水种子发芽率×种子根长）×100%[13]。进一步参照文献[14]所述方法，分别采用碱解扩散法、钼锑抗比色法及原子吸收法测定上述各堆肥样品速效氮、速效磷、速效钾含量，比较自制腐熟菌剂及功能菌剂不同接种量对堆肥氮、磷、钾等主要肥力元素的影响。

2 结果与分析

2.1 腐熟菌剂一次发酵及腐熟结果

发酵温度是堆体腐熟进程及是否腐熟的重要指标[13，15]。自制腐熟菌剂对牛粪堆体发酵进程的影响见图1。从图1可以看出，与对照组相比较，牛粪堆体接种自制腐熟菌剂后升温迅速，升温4～5 d即可进入高温期，经一次翻堆后维持60 ℃左右高温期可达约10 d，同时降温也较为迅速，高温期结束2～3 d即可降温至约42 ℃。分析其原因是由于自制腐熟菌剂中菌株XC1为糖、淀粉主要功能菌及蛋白质、纤维素利用菌，XC4为蛋白质、淀粉主要功能菌，MC1为纤维素主要功能菌，MC2为蛋白质及淀粉主要功能菌，可迅速利用牛粪堆体中相关成分生长及增殖，升温迅速，高温期较长[7，8，15]；同时因堆体中糖、淀粉、蛋白质等菌株易利用物质因腐熟菌株快速生长而被大量消耗，因而降温较快，堆体腐熟至约40 ℃仅需约18 d。根据NY/T 394-2000《绿色食品 肥料使用准则》，该堆肥腐熟情况完全符合标准，且高温期更长，说明自制腐熟菌剂作用效果良好，达到了堆肥腐熟目标。

2.2 功能菌剂二次发酵及结果

2.2.1 功能菌剂不同接种量对发酵温度及发酵进程的影响 功能菌剂不同接种量对二次发酵进程有重要影响。根据发酵过程一般规律，发酵温度为发酵进程的重要指标[13，15]。功能菌剂不同接种量对发酵温度的影响见图2。从图2可以看出，二次发酵堆体发酵初期温度约为32 ℃，随着发酵时间延长，功能菌剂不同接种量对堆体发酵温度影响差别较明显。功能菌剂接种量为0.1%时，堆体升温较缓慢，结合翻堆发酵温度较平稳，且基本为功能菌株适宜生长范围，但发酵周期较长，较1.0%、0.5%接种量约长3～4 d；功能菌剂接种量为1.0%时，堆体升温迅速，至第三天即升温至46.4 ℃，翻堆后堆温即迅速下降，40 ℃左右温度保持约2 d，至第七天发酵过程基本结束；而当功能菌剂接种量为0.5%时，堆体升温亦较为迅速，结合翻堆，发酵全过程堆温一般不超过45 ℃，较为适合各功能菌株生长繁殖，40 ℃左右温度保持约3 d，发酵周期约8 d。分析其原因是由于功能菌剂接种量为0.1%时，发酵基质中菌剂菌株增殖基数较低，导致增长速度较缓慢、代谢产热相对较少、发酵周期较长；功能菌剂接种量为1.0%及0.5%时，菌剂菌株增殖基数高，菌株菌群可迅速成为发酵优势菌群，大量利用相关成分迅速生长及代谢，在较短时间内发酵温度可迅速升高，同时大量相关营养被迅速增长菌群显著利用而减少，堆温下降较迅速，发酵时间较短，新的菌株菌群菌系平衡迅速形成，发酵温度趋于稳定[7，16，17]。其中功能菌剂接种量1.0%时，发酵温度易于超过45 ℃以上，大量功能菌株生长受抑制、死亡或休眠，不利于菌株增殖及生长。功能菌剂接种量为0.5%时，发酵周期约为8 d，较0.1%接种量可提前3～4 d结束发酵，表明功能菌剂接种量以0.5%较为适宜，在此条件下，发酵周期较短，翻堆、发酵温度等发酵环节及过程易于控制和操作。

2.2.2 功能菌剂不同接种量对功能菌株数量的影响 功能菌剂不同接种量在发酵进程中各功能菌株数量变化情况见图3、图4、图5。从图3、图4、图5可以看出，功能菌剂不同接种量各功能菌株数量均能在腐熟牛粪基质中迅速上升，但差异较明显。各试验组菌株数量均呈现出先升后降的趋势，最终趋于稳定。至发酵终点，各试验组功能菌株数量见图6。综合图3、图4、图5、图6可见，功能菌剂1.0%接种量其功能菌株总数及固氮、解磷、解钾菌株数均较高，0.5%接种量次之，0.1%接种量最少；0.1%接种量与0.5%、1.0%接种量差异明显，0.5%接种量与1.0%接种量之间比较接近。说明接种剂量过低不利于功能菌株快速增殖；接种剂量过高时，尽管功能菌株数量有一定程度增加但并不显著。这与发酵基质中相关营养成分的限制、基质内原有微生物之间的相互竞争乃至空间拮抗等有关[7，16]。结合图2可见，功能菌剂不同接种剂量下菌株数量上升与下降情况与堆体发酵温度变化规律基本一致，说明菌株增殖生长及数量变化是发酵温度变化的主要基础；菌株增殖快、数量大则发酵温度高，菌株增殖缓慢甚至停滞、数量少，则发酵温度低或达到发酵终点[7，17]。综合考虑生产成本及发酵过程控制等因素，功能菌剂接种量以0.5%较为适宜。

2.3 功能菌肥性能测定结果

发芽指数大小是有机固体废弃物腐熟情况的公认指标[15，18]。当发芽指数超过50%，表明发酵物料已基本腐熟，对作物种子发芽及根的生长基本没有抑制或不利影响，可作为农田作物种植的良好基肥或追肥；发芽指数越高，则表明发酵基质腐熟程度更优及促进作物生长能力越强[18]。上述腐熟菌剂一次发酵（处理1）及功能菌剂不同接种量（0.1%接种量为处理2，0.5%接种量为处理3，1.0%接种量为处理4）二次发酵堆肥，对发芽指数影响见表1。从表1可以看出，牛粪基质经腐熟菌剂处理后，发芽指数极显著上升，从27.3%升高到76.4%，说明牛粪基质经腐熟菌剂一次发酵即已充分腐熟；以不同比例功能菌剂进行二次发酵，发芽指数进一步明显上升，依次为1.0%接种量>0.5%接种量>0.1%接种量，说明牛粪基质在腐熟基础上性能可得到进一步改善，肥力水平得到进一步提升。其中，0.5%接种量的发芽指数与1.0%接种量之间差异不显著，两者与0.1%接种量间差异均达极显著水平。说明功能菌剂适宜接种量对改善堆肥性能、提高其发芽指数及肥力水平等具有良好促进作用，而功能菌剂过高接种量对提高发酵基质发芽指数等并无显著作用。

氮、磷、钾是作物生长必需的主要营养元素，是评价各类肥料肥力状况的重要指标。牛粪基质经腐熟菌剂一次发酵及进一步接种固氮、解磷、解钾等功能菌剂二次发酵，其速效氮、速效磷、速效钾变化情况见图7。从图7可以看出，牛粪堆体经腐熟及功能菌剂进一步处理，其速效氮、速效磷、速效钾等均有较明显上升。其中，新鲜牛粪经第一次发酵腐熟，其速效氮却有较明显下降，速效磷、速效钾仅有小幅上升，说明堆肥仅经腐熟处理难以达到迅速提高肥效目的，其中部分速效氮经微生物及高温等作用造成一定损失[18，19]；而二次发酵后，速效氮、速效磷上升较明显，速效钾亦有一定程度的上升。进一步对二次发酵功能菌剂不同接种量速效氮、速效磷、速效钾的测定结果进行比较，功能菌剂接种量从0.1%上升至0.5%及从0.5%上升至1.0%，其速效氮、速效磷、速效钾含量分别上升18.3%、19.6%、7.3%及8.2%、7.3%、2.7%， 0.1%接种量与0.5%接种量相比差异较明显，而0.5%接种量与1.0%接种量之间差异并不明显，说明腐熟堆肥接入一定剂量功能菌剂可有效提高堆肥速效氮、速效磷、速效钾等主要肥力元素含量水平，但过高的功能菌剂接种量其肥力水平并未明显提高。综合前面的试验结果，功能菌剂二次发酵时，0.5%接种量其固氮、解磷、解钾等功能菌株增殖最为显著，与此相吻合。同时，固氮、解磷、解钾等功能菌株在二次发酵迅速增殖过程中，可将部分氮、磷、钾等营养要素转化为菌体氮、菌体磷、菌体钾等贮存在菌体细胞中[12]，因而接种适当剂量功能菌剂，可较好提高菌肥的肥力水平。本试验中，速效磷及速效氮增加较明显，与固氮菌株可固定空气中氮、解磷菌可降解释放发酵基质有机物质中有机磷有关，速效钾增加不明显与解钾菌株主要为无机解钾菌有关。

上述试验结果表明，功能菌剂接种量以0.5%为宜，在此条件下，功能菌肥较新鲜牛粪发芽指数、氮磷钾等主要速效肥力元素含量等分别有了极显著或较明显提高，尤其是菌肥产品中含有充足的固氮、解磷、解钾等功能菌，可显著提高施用土壤固氮、解磷、解钾等功能菌株数量，进一步提高土壤自生固氮、解磷、解钾能力及防病治病性能，具有较明显生态、环保、可持续发展及良好经济效益[4，5]。

3 小结与讨论

1）本试验采用从牛粪自然堆肥中分离获得的一种芽孢杆菌、假单胞菌、木霉及曲霉组成的复合腐熟菌剂，对牛粪堆肥具有良好腐熟作用；牛粪基质快速和良好腐熟为优良牛粪有机菌肥制作奠定了良好基础。牛粪基质含有一定可溶性糖、淀粉、蛋白质及大量纤维素等腐熟菌剂菌株易利用物质，腐熟菌剂菌株生长迅速、堆肥升温快，高温期长达10 d，不仅基质中原有大量有害微生物经此过程被杀灭和死亡[7，17]，更将大量堆肥有机物质经降解、转化等作用形成堆肥优质有机活性物质——腐殖质[15，20]，发芽指数也由27.3%迅速上升至76.4%，说明一次发酵腐熟效果良好，为功能菌剂二次发酵创造了良好条件。

2）牛粪基质经腐熟过程其主要成分仍为大分子有机物质，虽对作物土壤具有良好改良作用，但肥力效应较低[9，18]。试验结果表明，由圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌、胶质样芽孢杆菌组成的固氮、解磷、解钾功能菌剂，可充分利用腐熟牛粪基质中相关有机成分迅速和良好生长。菌剂接种量以0.5%较为适宜，翻堆及发酵温度等发酵要素易于控制，至发酵终点各功能菌株数依次达7.3×107 CFU/g、1.5×108 CFU/g、5.1×107 CFU/g，菌株总数达到并显著超过国家NY 884-2012标准中2×107 CFU/g的规定值，可为土壤及作物生长提供充足自生固氮、解磷、解钾功能菌株，大力提高土壤性能，且有机质含量丰富，发酵周期较短，仅需约8 d，速效氮、速效磷、速效钾亦分别有了较明显的提高，因而对作物正常生长、持续高产稳产、提高土壤肥力等具有良好作用，可供相关单位进一步研究及生产实践参考借鉴。

参考文献：

[1] 陈素华，孙铁衍，耿春女.我国禽畜养殖业引致的环境问题及主要对策[J].环境污染治理技术与设备，2003，4（5）：5-8.

[2] 张克强，高怀文.禽畜养殖业污染处理与处置[M].北京：化学工业出版社，2004.

[3] 李玉华.有机肥生产与应用[M].天津：天津科技翻译出版公司，2010.

[4] 侯云鹏，秦裕波，尹彩侠，等.生物有机肥在农业生产中的作用及发展趋势[J].吉林农业科学，2009，34（3）：28-29，64.

[5] 何元胜，胡晓峰，岳 宁，等.微生物肥料的作用机理及应用前景[J].湖南农业科学，2012（5）：13-16.

[6] 曹慧玲，王 琦，胡青平，等.添加复合菌剂好氧发酵牛粪生产生物肥料的工艺优化[J].农业工程学报，2009，25（1）：189-193.

[7] 方华舟，安冬梅，王培清，等.牛粪自然好氧发酵微生物变化规律[J].环境工程学报，2013，7（1）：333-339.

[8] 方华舟，王培清.牛粪各阶段主要纤维素降解菌分离与作用规律分析[J].中国土壤与肥料，2012（6）：88-92.

[9] 牛俊玲.多功能堆肥复合菌剂[M].北京：化学工业出版社，2009.

[10] 刘 刊，耿士均，王 波，等.微生物肥料研究进展[J].安徽农业科学，2011，39（22）：13445-13448.

[11] 李阜棣，喻子牛，何绍江.农业微生物学试验技术[M].北京：中国农业出版社，1996.

[12] 饶正华，林启美，孙淼鑫，等.解钾菌与解磷菌及固氮菌的相互作用[J].生态学杂志，2002，21（2）：71-73.

[13] 魏自民，席北斗，赵 斌，等.城市生活垃圾外源微生物堆肥对有机酸变化及堆肥腐熟度的影响[J].环境科学，2006，27（2）：376-380.

[14] 鲍士旦.土壤农化分析[M].北京：中国农业出版社，2000.

[15] 刘益仁，刘光荣，李祖章，等.微生物发酵菌剂对猪粪堆肥腐熟的影响[J].江西农业学报，2006，18（5）：36-38.

[16] 王伟东，刘建斌，牛俊玲，等.堆肥化过程中微生物群落的动态及接菌剂的应用效果[J].农业工程学报，2006，22（4）：148-152.

[17] 黄得扬，陆文静.有机固体废弃物堆肥化处理的微生物学机理研究进展[J].环境污染治理技术与设备，2004，5（1）：12-17.

[18] 鲍艳宇，周启星，颜 丽，等.禽畜粪便堆肥过程中各种氮化合物的动态变化及腐熟度评价指标[J].应用生态学报，2008， 19（2）：374-380.

[19] 郑瑞生，封 辉，刘 泓，等.禽畜粪便高温好氧堆肥的NH3挥发及调控[J].亚热带农业研究，2006，2（1）：65-68.

[20] 周晓红，陈洪章，李佐虎.固态发酵中纤维素基质降解过程初步研究[J].过程工程学报，2003，3（5）：447-452.

参考文献：

[1] 陈素华，孙铁衍，耿春女.我国禽畜养殖业引致的环境问题及主要对策[J].环境污染治理技术与设备，2003，4（5）：5-8.

[2] 张克强，高怀文.禽畜养殖业污染处理与处置[M].北京：化学工业出版社，2004.

[3] 李玉华.有机肥生产与应用[M].天津：天津科技翻译出版公司，2010.

[4] 侯云鹏，秦裕波，尹彩侠，等.生物有机肥在农业生产中的作用及发展趋势[J].吉林农业科学，2009，34（3）：28-29，64.

[5] 何元胜，胡晓峰，岳 宁，等.微生物肥料的作用机理及应用前景[J].湖南农业科学，2012（5）：13-16.

[6] 曹慧玲，王 琦，胡青平，等.添加复合菌剂好氧发酵牛粪生产生物肥料的工艺优化[J].农业工程学报，2009，25（1）：189-193.

[7] 方华舟，安冬梅，王培清，等.牛粪自然好氧发酵微生物变化规律[J].环境工程学报，2013，7（1）：333-339.

[8] 方华舟，王培清.牛粪各阶段主要纤维素降解菌分离与作用规律分析[J].中国土壤与肥料，2012（6）：88-92.

[9] 牛俊玲.多功能堆肥复合菌剂[M].北京：化学工业出版社，2009.

[10] 刘 刊，耿士均，王 波，等.微生物肥料研究进展[J].安徽农业科学，2011，39（22）：13445-13448.

[11] 李阜棣，喻子牛，何绍江.农业微生物学试验技术[M].北京：中国农业出版社，1996.

[12] 饶正华，林启美，孙淼鑫，等.解钾菌与解磷菌及固氮菌的相互作用[J].生态学杂志，2002，21（2）：71-73.

[13] 魏自民，席北斗，赵 斌，等.城市生活垃圾外源微生物堆肥对有机酸变化及堆肥腐熟度的影响[J].环境科学，2006，27（2）：376-380.

[14] 鲍士旦.土壤农化分析[M].北京：中国农业出版社，2000.

[15] 刘益仁，刘光荣，李祖章，等.微生物发酵菌剂对猪粪堆肥腐熟的影响[J].江西农业学报，2006，18（5）：36-38.

[16] 王伟东，刘建斌，牛俊玲，等.堆肥化过程中微生物群落的动态及接菌剂的应用效果[J].农业工程学报，2006，22（4）：148-152.

[17] 黄得扬，陆文静.有机固体废弃物堆肥化处理的微生物学机理研究进展[J].环境污染治理技术与设备，2004，5（1）：12-17.

[18] 鲍艳宇，周启星，颜 丽，等.禽畜粪便堆肥过程中各种氮化合物的动态变化及腐熟度评价指标[J].应用生态学报，2008， 19（2）：374-380.

[19] 郑瑞生，封 辉，刘 泓，等.禽畜粪便高温好氧堆肥的NH3挥发及调控[J].亚热带农业研究，2006，2（1）：65-68.

[20] 周晓红，陈洪章，李佐虎.固态发酵中纤维素基质降解过程初步研究[J].过程工程学报，2003，3（5）：447-452.

参考文献：

[1] 陈素华，孙铁衍，耿春女.我国禽畜养殖业引致的环境问题及主要对策[J].环境污染治理技术与设备，2003，4（5）：5-8.

[2] 张克强，高怀文.禽畜养殖业污染处理与处置[M].北京：化学工业出版社，2004.

[3] 李玉华.有机肥生产与应用[M].天津：天津科技翻译出版公司，2010.

[4] 侯云鹏，秦裕波，尹彩侠，等.生物有机肥在农业生产中的作用及发展趋势[J].吉林农业科学，2009，34（3）：28-29，64.

[5] 何元胜，胡晓峰，岳 宁，等.微生物肥料的作用机理及应用前景[J].湖南农业科学，2012（5）：13-16.

[6] 曹慧玲，王 琦，胡青平，等.添加复合菌剂好氧发酵牛粪生产生物肥料的工艺优化[J].农业工程学报，2009，25（1）：189-193.

[7] 方华舟，安冬梅，王培清，等.牛粪自然好氧发酵微生物变化规律[J].环境工程学报，2013，7（1）：333-339.

[8] 方华舟，王培清.牛粪各阶段主要纤维素降解菌分离与作用规律分析[J].中国土壤与肥料，2012（6）：88-92.

[9] 牛俊玲.多功能堆肥复合菌剂[M].北京：化学工业出版社，2009.

[10] 刘 刊，耿士均，王 波，等.微生物肥料研究进展[J].安徽农业科学，2011，39（22）：13445-13448.

[11] 李阜棣，喻子牛，何绍江.农业微生物学试验技术[M].北京：中国农业出版社，1996.

[12] 饶正华，林启美，孙淼鑫，等.解钾菌与解磷菌及固氮菌的相互作用[J].生态学杂志，2002，21（2）：71-73.

[13] 魏自民，席北斗，赵 斌，等.城市生活垃圾外源微生物堆肥对有机酸变化及堆肥腐熟度的影响[J].环境科学，2006，27（2）：376-380.

[14] 鲍士旦.土壤农化分析[M].北京：中国农业出版社，2000.

[15] 刘益仁，刘光荣，李祖章，等.微生物发酵菌剂对猪粪堆肥腐熟的影响[J].江西农业学报，2006，18（5）：36-38.

[16] 王伟东，刘建斌，牛俊玲，等.堆肥化过程中微生物群落的动态及接菌剂的应用效果[J].农业工程学报，2006，22（4）：148-152.

[17] 黄得扬，陆文静.有机固体废弃物堆肥化处理的微生物学机理研究进展[J].环境污染治理技术与设备，2004，5（1）：12-17.

[18] 鲍艳宇，周启星，颜 丽，等.禽畜粪便堆肥过程中各种氮化合物的动态变化及腐熟度评价指标[J].应用生态学报，2008， 19（2）：374-380.

[19] 郑瑞生，封 辉，刘 泓，等.禽畜粪便高温好氧堆肥的NH3挥发及调控[J].亚热带农业研究，2006，2（1）：65-68.

[20] 周晓红，陈洪章，李佐虎.固态发酵中纤维素基质降解过程初步研究[J].过程工程学报，2003，3（5）：447-452.