辣蓼不同部位的抗氧化活性

杨新周+郝志云+朱以常+董毅+林惠昆

摘要：研究辣蓼不同部位提取物的体外抗氧化活性，考察其对DPPH自由基和羟自由基的清除能力，并且与咖啡酸和芸香苷进行对照研究。试验结果表明：清除DPPH自由基的能力大小为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根；清除羟自由基的能力大小为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。表明辣蓼不同部位的提取物均有抗氧化活性，且抗氧化效果因体系的不同而呈现出一定的差异，总的来说辣蓼是一种良好的天然抗氧化剂。

关键词：辣蓼；抗氧化活性；DPPH自由基；羟自由基

中图分类号： R284.1文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0284-02

收稿日期：2013-06-24

基金项目：德宏师范高等专科学校校级科学研究课题（编号：DSK201303）。

作者简介：杨新周（1986—），男，云南腾冲人，硕士研究生，研究方向为分析化学。E-mail：YXZ1149@126.com。辣蓼（Polygonum hydropiper Linn.）为蓼科蓼属草本植物，广泛分布于我国的各个省（区）。辣蓼具有祛风利湿、解毒消肿、散瘀止痛等功效，内用主要用于治疗风湿关节痛、疥癣、肠胃炎、功能性子宫出血、痢疾、腹泻、脚气、跌打肿痛，外用可治皮肤湿疹、毒蛇咬伤等。此外，辣蓼在农业方面也有较好的用途[1-2]。近年来对辣蓼的活性成分研究较多，经过研究发现，辣蓼中含有金丝桃苷、芸香苷、斛皮素、异鼠李素、山萘酚等多种黄酮类物质和多种三萜类、鞣质类化合物[3-5]。而对辣蓼不同部位提取物清除DPPH自由基（DPPH·）和羟自由基（·OH）能力的研究则鲜见报道。本研究采用传统方法——分光光度法进行定量分析，从而评价抗氧化物质的抗氧化能力。分光光度法具有稳定性好、简便易行、灵敏可靠、不依赖昂贵的仪器设备等优点[6]。笔者通过对辣蓼不同部位的乙醇提取物进行清除DPPH·和·OH能力的测定，以期为辣蓼的综合利用提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料与仪器

722型可见分光光度计；AS20500A超声波清洗器；AR224CN电子天平；HH-4数字显示恒温水浴锅（国华电器有限公司）；ZK-82J电热真空干燥箱；EYELAN-1100旋转蒸发仪。

1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，纯度>99.0%），购自国药集团化学试剂有限公司；辣蓼，产自云南省德宏傣族景颇族自治州，烘干、粉碎、过筛；槲皮素、山奈酚、咖啡酸、芸香苷，购自国药集团浙江华东医药有限公司，纯度>98%；番红花红、EDTA-Fe2+（现配现用）、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、双氧水（现配现用）、乙醇等试剂均为分析纯；试验用水为二次蒸馏水。

1.2试验方法

1.2.1DPPH储备液的制备准确称取10 mg DPPH，用无水乙醇溶解并定容至100 mL容量瓶中，得DPPH浓度为 0.1 mg/mL 的储备溶液。然后将储备溶液稀释成浓度为 0.024 mg/mL 的标准溶液。

1.2.2辣蓼提取物的制备准确称取2.000 0 g样品于 100 mL 锥形瓶中，加入20 mL乙醇溶液后封口，超声提取3次，每次45 min；合并3次滤液于旋转蒸发仪中进行浓缩，再转移到25 mL容量瓶中，用乙醇定容后备用。

1.2.3清除DPPH·能力的测定先准确移取4.5 mL DPPH标准溶液于10 mL比色管中，再依次加入一定体积的提取物稀释液，定容至5 mL，置于暗处30 min后在517 nm波长下测定空白管、提取物管中DPPH的吸光度，分别记为D空白、D样品，按下式计算自由基清除率[6]。

2结果与讨论

2.1辣蓼不同部位对DPPH·的清除能力

辣蓼不同部位乙醇提取物及标准品咖啡酸和芸香苷清除DPPH·的能力试验结果见图1、表1。以IC50来计算DPPH·的清除作用，IC50值越小，表示清除率越高，表示抗氧化活性越强。结果表明，不同提取部位对DPPH·的清除能力出现了明显的差异，清除DPPH·能力大小依次为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根。

2.2辣蓼不同部位对·OH的清除能力

辣蓼不同部位乙醇提取物及标准品咖啡酸和芸香苷清除·OH活性的能力见图2、表2。可以看出：辣蓼不同提取部位清除·OH的能力优于芸香苷和咖啡酸，清除·OH能力大小依次为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。

3结论

辣蓼不同部位的乙醇提取物清除DPPH·和·OH的能力表现出明显的差异，清除DPPH·的能力大小依次为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根，清除·OH的能力大小依次为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。研究结果表明：辣蓼有很强的清除DPPH·和·OH的能力， 是一种很好的天然抗氧化剂，可能是因为辣蓼

参考文献：

[1]黄红泓，甄汉深. 中草药辣蓼近年来的研究进展[J]. 中国民族民间医药，2013，22（1）：38-40.

[2]曾维爱，谭济才，谭琳，等. 辣蓼的应用及其功效[J]. 中国农学通报，2006，22（8）：369-372.

[3]张国英，曾韬. 辣蓼主要化学成分的研究[J]. 林产化学与工业，2005，25（3）：21-24.

[4]张宏武，任恒春，丁刚，等. 水辣蓼中2种黄酮类成分含量测定[J]. 药学实践杂志，2012，30（5）：378-379，389.

[5]高雅，张可锋，朱华. HPLC测定不同产地辣蓼中槲皮素的含量[J]. 中国实验方剂学杂志，2012，18（21）：89-91.

[6]穆怀雪，杨新周，姚福泉，等. 不同提取方法对五味子清除DPPH自由基作用的影响研究[J]. 时珍国医国药，2012，23（6）：1454-1455.

[7]刘琼，李乔丽，放茂良，等. 傣族药竹叶兰不同极性部位提取物的抗氧化性研究[J]. 中国农学通报，2011，27（14）：77-81.endprint

摘要：研究辣蓼不同部位提取物的体外抗氧化活性，考察其对DPPH自由基和羟自由基的清除能力，并且与咖啡酸和芸香苷进行对照研究。试验结果表明：清除DPPH自由基的能力大小为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根；清除羟自由基的能力大小为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。表明辣蓼不同部位的提取物均有抗氧化活性，且抗氧化效果因体系的不同而呈现出一定的差异，总的来说辣蓼是一种良好的天然抗氧化剂。

关键词：辣蓼；抗氧化活性；DPPH自由基；羟自由基

中图分类号： R284.1文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0284-02

收稿日期：2013-06-24

基金项目：德宏师范高等专科学校校级科学研究课题（编号：DSK201303）。

作者简介：杨新周（1986—），男，云南腾冲人，硕士研究生，研究方向为分析化学。E-mail：YXZ1149@126.com。辣蓼（Polygonum hydropiper Linn.）为蓼科蓼属草本植物，广泛分布于我国的各个省（区）。辣蓼具有祛风利湿、解毒消肿、散瘀止痛等功效，内用主要用于治疗风湿关节痛、疥癣、肠胃炎、功能性子宫出血、痢疾、腹泻、脚气、跌打肿痛，外用可治皮肤湿疹、毒蛇咬伤等。此外，辣蓼在农业方面也有较好的用途[1-2]。近年来对辣蓼的活性成分研究较多，经过研究发现，辣蓼中含有金丝桃苷、芸香苷、斛皮素、异鼠李素、山萘酚等多种黄酮类物质和多种三萜类、鞣质类化合物[3-5]。而对辣蓼不同部位提取物清除DPPH自由基（DPPH·）和羟自由基（·OH）能力的研究则鲜见报道。本研究采用传统方法——分光光度法进行定量分析，从而评价抗氧化物质的抗氧化能力。分光光度法具有稳定性好、简便易行、灵敏可靠、不依赖昂贵的仪器设备等优点[6]。笔者通过对辣蓼不同部位的乙醇提取物进行清除DPPH·和·OH能力的测定，以期为辣蓼的综合利用提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料与仪器

722型可见分光光度计；AS20500A超声波清洗器；AR224CN电子天平；HH-4数字显示恒温水浴锅（国华电器有限公司）；ZK-82J电热真空干燥箱；EYELAN-1100旋转蒸发仪。

1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，纯度>99.0%），购自国药集团化学试剂有限公司；辣蓼，产自云南省德宏傣族景颇族自治州，烘干、粉碎、过筛；槲皮素、山奈酚、咖啡酸、芸香苷，购自国药集团浙江华东医药有限公司，纯度>98%；番红花红、EDTA-Fe2+（现配现用）、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、双氧水（现配现用）、乙醇等试剂均为分析纯；试验用水为二次蒸馏水。

1.2试验方法

1.2.1DPPH储备液的制备准确称取10 mg DPPH，用无水乙醇溶解并定容至100 mL容量瓶中，得DPPH浓度为 0.1 mg/mL 的储备溶液。然后将储备溶液稀释成浓度为 0.024 mg/mL 的标准溶液。

1.2.2辣蓼提取物的制备准确称取2.000 0 g样品于 100 mL 锥形瓶中，加入20 mL乙醇溶液后封口，超声提取3次，每次45 min；合并3次滤液于旋转蒸发仪中进行浓缩，再转移到25 mL容量瓶中，用乙醇定容后备用。

1.2.3清除DPPH·能力的测定先准确移取4.5 mL DPPH标准溶液于10 mL比色管中，再依次加入一定体积的提取物稀释液，定容至5 mL，置于暗处30 min后在517 nm波长下测定空白管、提取物管中DPPH的吸光度，分别记为D空白、D样品，按下式计算自由基清除率[6]。

2结果与讨论

2.1辣蓼不同部位对DPPH·的清除能力

辣蓼不同部位乙醇提取物及标准品咖啡酸和芸香苷清除DPPH·的能力试验结果见图1、表1。以IC50来计算DPPH·的清除作用，IC50值越小，表示清除率越高，表示抗氧化活性越强。结果表明，不同提取部位对DPPH·的清除能力出现了明显的差异，清除DPPH·能力大小依次为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根。

2.2辣蓼不同部位对·OH的清除能力

辣蓼不同部位乙醇提取物及标准品咖啡酸和芸香苷清除·OH活性的能力见图2、表2。可以看出：辣蓼不同提取部位清除·OH的能力优于芸香苷和咖啡酸，清除·OH能力大小依次为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。

3结论

辣蓼不同部位的乙醇提取物清除DPPH·和·OH的能力表现出明显的差异，清除DPPH·的能力大小依次为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根，清除·OH的能力大小依次为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。研究结果表明：辣蓼有很强的清除DPPH·和·OH的能力， 是一种很好的天然抗氧化剂，可能是因为辣蓼

参考文献：

[1]黄红泓，甄汉深. 中草药辣蓼近年来的研究进展[J]. 中国民族民间医药，2013，22（1）：38-40.

[2]曾维爱，谭济才，谭琳，等. 辣蓼的应用及其功效[J]. 中国农学通报，2006，22（8）：369-372.

[3]张国英，曾韬. 辣蓼主要化学成分的研究[J]. 林产化学与工业，2005，25（3）：21-24.

[4]张宏武，任恒春，丁刚，等. 水辣蓼中2种黄酮类成分含量测定[J]. 药学实践杂志，2012，30（5）：378-379，389.

[5]高雅，张可锋，朱华. HPLC测定不同产地辣蓼中槲皮素的含量[J]. 中国实验方剂学杂志，2012，18（21）：89-91.

[6]穆怀雪，杨新周，姚福泉，等. 不同提取方法对五味子清除DPPH自由基作用的影响研究[J]. 时珍国医国药，2012，23（6）：1454-1455.

[7]刘琼，李乔丽，放茂良，等. 傣族药竹叶兰不同极性部位提取物的抗氧化性研究[J]. 中国农学通报，2011，27（14）：77-81.endprint

摘要：研究辣蓼不同部位提取物的体外抗氧化活性，考察其对DPPH自由基和羟自由基的清除能力，并且与咖啡酸和芸香苷进行对照研究。试验结果表明：清除DPPH自由基的能力大小为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根；清除羟自由基的能力大小为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。表明辣蓼不同部位的提取物均有抗氧化活性，且抗氧化效果因体系的不同而呈现出一定的差异，总的来说辣蓼是一种良好的天然抗氧化剂。

关键词：辣蓼；抗氧化活性；DPPH自由基；羟自由基

中图分类号： R284.1文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）02-0284-02

收稿日期：2013-06-24

基金项目：德宏师范高等专科学校校级科学研究课题（编号：DSK201303）。

作者简介：杨新周（1986—），男，云南腾冲人，硕士研究生，研究方向为分析化学。E-mail：YXZ1149@126.com。辣蓼（Polygonum hydropiper Linn.）为蓼科蓼属草本植物，广泛分布于我国的各个省（区）。辣蓼具有祛风利湿、解毒消肿、散瘀止痛等功效，内用主要用于治疗风湿关节痛、疥癣、肠胃炎、功能性子宫出血、痢疾、腹泻、脚气、跌打肿痛，外用可治皮肤湿疹、毒蛇咬伤等。此外，辣蓼在农业方面也有较好的用途[1-2]。近年来对辣蓼的活性成分研究较多，经过研究发现，辣蓼中含有金丝桃苷、芸香苷、斛皮素、异鼠李素、山萘酚等多种黄酮类物质和多种三萜类、鞣质类化合物[3-5]。而对辣蓼不同部位提取物清除DPPH自由基（DPPH·）和羟自由基（·OH）能力的研究则鲜见报道。本研究采用传统方法——分光光度法进行定量分析，从而评价抗氧化物质的抗氧化能力。分光光度法具有稳定性好、简便易行、灵敏可靠、不依赖昂贵的仪器设备等优点[6]。笔者通过对辣蓼不同部位的乙醇提取物进行清除DPPH·和·OH能力的测定，以期为辣蓼的综合利用提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料与仪器

722型可见分光光度计；AS20500A超声波清洗器；AR224CN电子天平；HH-4数字显示恒温水浴锅（国华电器有限公司）；ZK-82J电热真空干燥箱；EYELAN-1100旋转蒸发仪。

1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，纯度>99.0%），购自国药集团化学试剂有限公司；辣蓼，产自云南省德宏傣族景颇族自治州，烘干、粉碎、过筛；槲皮素、山奈酚、咖啡酸、芸香苷，购自国药集团浙江华东医药有限公司，纯度>98%；番红花红、EDTA-Fe2+（现配现用）、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、双氧水（现配现用）、乙醇等试剂均为分析纯；试验用水为二次蒸馏水。

1.2试验方法

1.2.1DPPH储备液的制备准确称取10 mg DPPH，用无水乙醇溶解并定容至100 mL容量瓶中，得DPPH浓度为 0.1 mg/mL 的储备溶液。然后将储备溶液稀释成浓度为 0.024 mg/mL 的标准溶液。

1.2.2辣蓼提取物的制备准确称取2.000 0 g样品于 100 mL 锥形瓶中，加入20 mL乙醇溶液后封口，超声提取3次，每次45 min；合并3次滤液于旋转蒸发仪中进行浓缩，再转移到25 mL容量瓶中，用乙醇定容后备用。

1.2.3清除DPPH·能力的测定先准确移取4.5 mL DPPH标准溶液于10 mL比色管中，再依次加入一定体积的提取物稀释液，定容至5 mL，置于暗处30 min后在517 nm波长下测定空白管、提取物管中DPPH的吸光度，分别记为D空白、D样品，按下式计算自由基清除率[6]。

2结果与讨论

2.1辣蓼不同部位对DPPH·的清除能力

辣蓼不同部位乙醇提取物及标准品咖啡酸和芸香苷清除DPPH·的能力试验结果见图1、表1。以IC50来计算DPPH·的清除作用，IC50值越小，表示清除率越高，表示抗氧化活性越强。结果表明，不同提取部位对DPPH·的清除能力出现了明显的差异，清除DPPH·能力大小依次为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根。

2.2辣蓼不同部位对·OH的清除能力

辣蓼不同部位乙醇提取物及标准品咖啡酸和芸香苷清除·OH活性的能力见图2、表2。可以看出：辣蓼不同提取部位清除·OH的能力优于芸香苷和咖啡酸，清除·OH能力大小依次为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。

3结论

辣蓼不同部位的乙醇提取物清除DPPH·和·OH的能力表现出明显的差异，清除DPPH·的能力大小依次为咖啡酸>芸香苷>辣蓼花>辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根，清除·OH的能力大小依次为辣蓼叶>辣蓼茎>辣蓼根>辣蓼花>咖啡酸>芸香苷。研究结果表明：辣蓼有很强的清除DPPH·和·OH的能力， 是一种很好的天然抗氧化剂，可能是因为辣蓼

参考文献：

[1]黄红泓，甄汉深. 中草药辣蓼近年来的研究进展[J]. 中国民族民间医药，2013，22（1）：38-40.

[2]曾维爱，谭济才，谭琳，等. 辣蓼的应用及其功效[J]. 中国农学通报，2006，22（8）：369-372.

[3]张国英，曾韬. 辣蓼主要化学成分的研究[J]. 林产化学与工业，2005，25（3）：21-24.

[4]张宏武，任恒春，丁刚，等. 水辣蓼中2种黄酮类成分含量测定[J]. 药学实践杂志，2012，30（5）：378-379，389.

[5]高雅，张可锋，朱华. HPLC测定不同产地辣蓼中槲皮素的含量[J]. 中国实验方剂学杂志，2012，18（21）：89-91.

[6]穆怀雪，杨新周，姚福泉，等. 不同提取方法对五味子清除DPPH自由基作用的影响研究[J]. 时珍国医国药，2012，23（6）：1454-1455.

[7]刘琼，李乔丽，放茂良，等. 傣族药竹叶兰不同极性部位提取物的抗氧化性研究[J]. 中国农学通报，2011，27（14）：77-81.endprint