牡丹皮饮片的有效期研究

曹臣 欧阳荣 张志国

牡丹皮饮片的有效期研究

曹臣 欧阳荣 张志国

目的 进行中药材有效期方法研究。方法 选用易散失气味、易变色的牡丹皮饮片作为研究对象 , 通过经典恒温实验和留样观察实验 , 用紫外色谱法测定其有效成分丹皮酚含量。推导出牡丹皮饮片中丹皮酚含量变化规律。结果 在经典恒温实验中 , 丹皮酚含量变化符合一级反应规律。牡丹皮在 20℃贮存 , 丹皮酚含量变化速度常数 K20℃=1.194×10-4、该批牡丹皮的有效期为 226 d。经典恒温实验推导的结果与留样观察有效成分含量的变化结果基本一致。结论 用经典恒温实验预测牡丹皮饮片有效期的方法可行 , 得出有效期结论可靠。

牡丹皮；饮片 ；有效期

牡丹皮为毛茛科植物牡丹 (Paeonia suffruticosa Andr)的干燥根皮。具有清热凉血 , 活血化瘀功能。用于治疗温毒发斑 ,吐血衄血 , 夜热早凉 , 无汗骨蒸 , 经闭痛经 , 痈肿疮毒 , 跌扑伤痛。其主要化学成分 ：牡丹皮含酚类和单萜类 , 其中丹皮酚原苷和芍药苷的含量最高 , 另外还含有挥发油以及苯甲酸、植物甾醇、蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖等。药理研究证明丹皮酚具有镇静、催眠、抗惊厥、镇痛、解热和降温药理作用；抗血栓形成和抗动脉粥样硬化 , 抗心律失常 , 降血压药理作用 ；免疫增强 , 抗炎 , 利尿药理作用。因此丹皮酚是牡丹皮清热凉血、活血化瘀功能的物质基础 , 为牡丹皮的有效成分。

1 实验仪器与材料

1. 1 仪器 超声波清洗器 (昆山市淀山湖检测仪器厂 )、万分之一电子分析天平 (沈阳龙腾电子称量仪器有限公司 )、UV-2501PC(日本岛津 )。

1. 2 试剂 甲苯 (分析纯 ), 注射用水。

1. 3 药物 药材 ：牡丹皮亘货安徽产 , 批号为 20120301。牡丹皮抢水洗 , 1 h 以后润 1 次 , 放置 4 h, 切薄片 , 50℃烘干。

2 实验方法与结果

2. 1 丹皮酚含量测定 紫外分光光度法 (2010 版药典法 ) 取本品粗粉约 0.2 g, 精密称定 , 用水蒸气蒸馏 , 收集馏出液约450 ml, 加水至 500 ml, 摇匀。照分光光度法 (2010 版药典附录 VA), 在 247 nm 的波长处测定吸收度 , 按丹皮酚的吸收系数为 862 计算 , 即得。药典规定本品按干燥品计算 , 含丹皮酚应≥1.20%。

2. 2 经典恒温试验 牡丹皮饮片样品的制备 ：取牡丹皮饮片约 50 g, 用普通塑料袋包装封口。置于电热恒温箱中 , 分别在 40、50、60、70℃下保存 , 选择 4 个间隔时间。分别为70℃ 10、20、 30、40 h ；60℃ 20、40、60、80 h ；50℃ 40、80、120、160 h ；40℃ 80、160、240、320 h。取出用药物粉碎机粉碎成粗粉备用。

牡丹皮含水量测定 ：依照药典甲苯法 , 将所用玻璃仪器烘干 , 取本品粉末 20 g, 精密称定 , 加无水甲苯 200 ml, 回流至上层液体清亮 , 读取水的体积 , 计算含水量。

实验结果 ：经典恒温实验结果见表1, 表2。

表1 牡丹皮经典恒温实验结果

表2 经典恒温实验中丹皮酚的含量与时间的关系

当对数浓度与时间呈线性相关时 , 即 logC ＝ -Kt/2.303+ logC0 反应为一级反应。根据 b 值得出各温度下的速度常数K 值。然后根据 Arrhenius 公式 , 计算出贮存条件下的速度常数K。

logK 对 1/T 进行回归 , 求出回归方程 ：

E 为活化能 , R 为气体常数 8.319, A 为频率因子 (见表3)。

药典规定牡丹皮须置于阴凉处贮存即保存在 20℃以下。当温度为 20℃时 , K20℃=1.194×10-4。

在 20℃下贮存 , 牡丹皮以干品计算 , 丹皮酚降至药典规定的最低含量 1.2%, 经历的时间为 226 d, 即本批产品的有效期为 226 d, 结果见表3。

2. 3 留样观察 取牡丹皮饮片 50 g, 用普通塑料袋包装并封口 , 置于恒温箱中 20℃保存 , 分别于 1、2、3、6 个月、1 年后测定样品的含水量和丹皮酚的含量。

牡丹皮留样观察结果与根据速度常数计算出丹皮酚含量比较见表4。

表3 牡丹皮中丹皮酚含量变化速度常数与温度的关系

表4 牡丹皮留样观察结果

3 讨论

3. 1 药材有效期是在一定的贮藏条件下 , 其有效成分百分含量保持不低于药典规定的期限。牡丹皮饮片 20℃贮存 , 其速度常数为 K20℃=1.194×10-4, 通过留样观察 , 计算的结果与实际测量值 , 0~6 个月丹皮酚含量二者基本相近 , 12 个月二者偏差稍大。在丹皮酚的含量 >1.2% 时 , 其降解符合一级反应 , 所得速度常数为 K20℃=1.194×10-4比较可靠。

3. 2 本实验牡丹皮采用塑料袋装 50 g/包 , 与小袋分装精制饮片的条件相似 , 可为其贮藏提供参考 , 建议牡丹皮切成饮片、制成小剂量包装 , 不宜贮藏过久 , 保证在 200 d 左右用完。3. 3 本实验曾尝试用药材牡丹皮亘货做实验 , 但由于亘货造成的取样误差较大 , 掩盖了由于温度变化引起的含量改变 , 因此实验不成功。若用药材粉末作实验 , 可消除含量不均造成的取样误差 , 但粉末与实际药材状态相距甚远 , 并无实际意义。最后选用饮片做实验时 , 反复多次实验以消除取样误差。

3. 4 牡丹皮含有丹皮酚、挥发油 , 具有特殊的芳香气 , 除注意严密包装外 , 应保持贮藏环境干燥阴凉 , 以免挥发“走气”。由于牡丹皮含苯甲酸 , 有防腐作用 , 气味能避虫蛀 , 故不易遭受虫害。但需防潮 , 以免发霉、变色。梅雨季前后可行日晒 ,保持干燥 , 即能安全贮藏。传统经验证明 ：牡丹皮若与泽泻同存 , 可避免其变色 , 也可防止泽泻生虫。因此亦与其他药材共贮 , 起防虫作用。

牡丹皮含有多种成分 , 以丹皮酚外其他成分作指标 , 观察其有效期 , 会有什么样结果 , 期待进一步实验。

Study on the validity of decoction pieces of cortex moudan

CAO Chen, OUYANG Rong, ZHANG Zhi- guo Department of Pharmaceutical, First Affiliated Hospital of Hunan College of Chinese Traditional Medicine, Changsha 410007, China

Objective To study the validity of Chinese traditional medicinal materials. Methods Classics constant temperature experiment and sample reserved experiment were used for study decoction pieces of cortex moudan, which was easy for cent loss and color change. Ultraviolet chromatography was used to determine the content of Paeonol. The change pattern of paeonol was deduced. Results In classics constant temperature experiment, the content change of paeonol met the regular pattern of one level. Stored in 20℃ , the validity of the pieces of cortex moudan was 226 d and the speed constant of paeonol is K20℃=1.194×10-4. The content change of paeonol by calculation was consistent with the results of sample reserved for observation. Conclusion It is feasible to apply classics constant temperature experiment to calculate the validity, and the result is reliable.

Cortex moudan; Decoction pieces; Validity

2014-05-08］

国家中医药管理局名老中医药专家传承工作室建设项目

410007 湖南中医药大学附属第一医院药学部

张志国