复方地舍平片有效成分含量的测定

2014-07-12罗德全

中国药物经济学 2014年5期

罗德全

复方地舍平片有效成分含量的测定

罗德全

目的采用高效液相法中的外标法，测定复方地舍平片有效成分的含量。方法用乙腈以水为流动相，超声提取，波长267nm，检测甲氯噻嗪的含量。用甲醇以水为流动相，超声提取，波长217nm，检测去甲氧利血平的含量。结果甲氯噻嗪项在0.0525～0.2625µg 范围内，线性关系良好。去甲氧利血平在0.0606～0.3030µg 范围内，线性关系良好（r=1.00000），平均回收率99.43%，RSD1.3%（＜2.0 %）。结论该方法处理方便、省时、计算简单，结果准确，检验成本低。

复方羊角片；白芷；超声提取；HPLC法

复方地舍平片为复方制剂，有效成分为甲氯噻嗪、去甲氧利血平，参阅相关文献[1]，复方地舍平片有效成分的含量测定是采用了高效液相色谱的内标法。本实验采用高效液相的外标法测定复方地舍平片有效成分含量，结果表明，本实验建立的方法，具有良好的准确性、稳定性、重复性，而且操作简单，成本低，现将其阐述如下。

1 仪器

高效液相色谱仪（LC-2010C，日本岛津公司）；紫外分光光度计（UV-2550，日本岛津公司）。

2 方法与结果

2.1 流速选择流速为1m l/m in。

2.2 流动相选择①分别用乙腈:水为（40:60）、（45:55）、（50:50）三种比例流动相检测同一样品的甲氯噻嗪项，进样量 10μl，检测波长 267nm。实验结果表明，复方地舍平片中甲氯噻嗪项，采用流动相乙腈:水（40:60）配比时理论塔板数、拖尾因子及出峰时间满足要求，能准确检出甲氯噻嗪的含量。②分别甲醇：水为（80:20）、（85:15）、（90:10）三种比例流动相检测同一样品的去甲氧利血平项，进样量 10μl，检测波长 217nm。实验结果表明，复方地舍平片中去甲氧利血平项，采用流动相甲醇:水（85:15）配比时理论塔板数、拖尾因子及出峰时间满足要求，能准确检出去甲氧利血平的含量。

2.3 溶解方法取一批样品，两组平行样。测定甲氯噻嗪项时分别超声15m in和振摇15m in，超声提取平均含量101.04%，振摇提取平均含量99.38%；测定去甲氧利血平项时分别超声 30m in和振摇30min，超声提取平均含量96.85%，振摇提取平均含量95.37。实验结果有明显差异，因而选择用超声方法比较好，能完全溶解样品。

2.4 溶解时间取一批样品，甲氯噻嗪项分别超声10、15、20min，含量检测结果分别为 99.32%、102.38%、1001.96%；去甲氧利血平项分别超声25、30、35m in，含量检测结果分别为95.32%、94.62%、96.34%。实验结果显示，甲氯噻嗪项超声15m in时，其有效成分就溶解完全。去甲氧利血平项超声30min时，其有效成分就溶解完全。

2.5 线性关系配制一定浓度的对照品溶液，分别精密吸取对照品溶液5、10、15、20、25µl依次进样，结果见表1，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，找出进样量线性范围建立方程。

甲氯噻嗪项回归方程为 Y=3.07565e+006X+ 2820.80000，r=1.00000，实验结果表明，甲氯噻嗪项在0.0525～0.2625µg 范围内，进样量与其峰面积呈良好的线性关系。去甲氧利血平项回归方程为Y=7.10050e+006X+900.700000，r=1.00000，实验结果表明，去甲氧利血平在 0.0606～0.3030µg 范围内，进样量与其峰面积呈良好的线性关系。

表1 测样结果

2.6 准确度取已知有效成分含量的样品，分别测定甲氯噻嗪、去甲氧利血平各项回收率。精密称取两项样品各9份，加入定量的甲氯噻嗪、去甲氧利血平对照品，设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液，在已确定的色谱条件下测定甲氯噻嗪项平均回收率99.78%，RSD0.48%（＜2.0%）；去甲氧利血项平均回收率99.43%，RSD1.3%（＜2.0%）。从回收率可以看出，该方法测定结果与真实值接近程度好。

2.7 稳定性取一批样品制成供试品溶液，分别放置0、3、6、12、24h后，在上述色谱条件下进样分析，测定峰面积积分值，共测定5次，甲氯噻嗪项RSD0.14%（＜2.0%），去甲氧利血平项RSD1.5%（＜2.0%）。从数据可看出，甲氯噻嗪项、去甲氧利血平项均小于2.0%，结果表明复方地舍平片样品溶液在24h内稳定。

2.8 重复性取一批样品，甲氯噻嗪、去甲氧利血平项分别精密称取9个样，各自制成9份供试品进样检测。甲氯噻嗪含量结果为99.76%、99.28%、98.96%、99.86 %、99.06%、98.76%、99.54%、99.86%、98.80%；去甲氧利血平含量结果：94.80%、94.75%、94.81%、94.90 %、95.09%、94.80%、94.80%、95.02%、95.10%。从结果可看出，甲氯噻嗪、去甲氧利血平项RSD分别为0.44%和0.16%均小于2.0%，符合重复性要求。