痛风胶囊的薄层色谱鉴别研究

何 羽

痛风胶囊的薄层色谱鉴别研究

何 羽

目的 研究痛风胶囊的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对痛风胶囊中黄芪、虎杖、红花进行定性鉴别。结果薄层色谱斑点清晰，阴性无干扰。结论该方法简便可行，可用于痛风胶囊的质量控制。

痛风胶囊；黄芪；虎杖；红花；薄层色谱鉴别

痛风胶囊为毕节市某医院自制制剂，由黄芪、虎杖、红花等13味中药组成的复方制剂，具有清热祛风除湿、活血通络的作用，用于湿热所致的关节红肿热痛，或伴有汗出而热，不解，口渴喜饮，心烦不安，小便黄及痛风见上述证候者的治疗。经过大量的临床病例观察，疗效肯定，治愈率高。为了更好地控制该制剂的质量，本文通过采用薄层色谱（TCL）法对痛风胶囊中黄芪、虎杖、红花进行定性鉴别，研究痛风胶囊的质量控制方法。

1 材料与试剂

1.1 试验材料岛津 AY 120型电子分析天平；DK-98-Ⅱ电热恒温水浴锅；101-2电热恒温（鼓风）干燥箱；PS-100超声波清洗器；Goodsee-Ⅱ型薄层色谱摄影仪；硅胶G板（青岛海洋化工有限公司）。

1.2 主要试剂黄芪甲苷、黄芪、虎杖、红花对照药材由中国药品生物制品研究院提供；痛风胶囊制剂由毕节市某医院制剂室提供。

2 方法与结果

2.1 黄芪的薄层鉴别[1]取本品内容物5g，加水50m l，加热回流提取1h，滤过，滤液用水饱和的正丁醇萃取3次，每次35m l，合并正丁醇提取液，以5%碳酸氢钠溶液洗涤2次，每次25m l，继续以水洗涤2次，每次25m l，用无水硫酸钠吸收多余水分，回收正丁醇至干，残渣用1m l甲醇溶解，作为供试品液。取黄芪对照药材1g，同法制成对照药材溶液；取黄芪甲苷对照品，加入甲醇制成1m l含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。按标准处方同法制备缺黄芪的阴性样品，依照供试品溶液的处理方法制成阴性样品溶液。分别吸取供试品溶液、对照品溶液、对照药材溶液及阴性样品溶液各 5μl，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（65:35:10）的下层液为展开剂，上行展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加热数至斑点显色清晰，供试品色谱中，日光下观察：在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；紫外光灯（365nm）下检视，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰，见图1。

2.2 虎杖的薄层鉴别[1]取本品内容物5g，加入甲醇20m l，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10m l，水浴加热30min，放冷，滤液用三氯甲烷提取3次，每次20m l，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加入三氯甲烷1m l溶解，作为供试品溶液。取虎杖对照药材1g，同法制成对照药材溶液。按标准处方同法制备缺虎杖的阴性样品，照供试品溶液的处理方法制成阴性样品溶液。分别吸取供试品溶液、对照药材溶液及阴性样品溶液各5μl，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以苯-无水乙醇（8:2）的为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸汽中显色，日光下检视：在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；紫外光灯（365nm）下检视，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，见图2。

图1 黄芪的薄层图

图2 虎杖的薄层图

2.3 红花的薄层鉴别取本品内容物 10g，加水20m l，加热回流1h，放冷，滤过，加入乙醇适量使之含醇量为70%，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加水20m l溶解，用石油醚（90～120℃）提取2次，每次 15m l，弃去石油醚液，水溶液蒸干，用80%丙酮1m l使溶解，作为供试品溶液。取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液。按标准处方同法制备缺红花的阴性样品，照供试品溶液的处理方法制成阴性样品溶液。分别吸取供试品溶液、对照药材溶液及阴性样品溶液各 5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇（7.0:2.0:3.0:0.4）的为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视：在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，见图3。

图3 红花的薄层图

3 讨论

3.1 黄芪的鉴别，多数文献上采用《中国药典》2010版一部黄芪药材项下的方法进行薄层鉴别，但在试验中可以发现，此方法用于单味黄芪药材或药味较少的含黄芪药材的复方制剂时较合适，当用于药味较多的复方制剂时，存在明显的不足，表现为黄芪甲苷的极性较大，在薄层色谱图中的Rf值较小，斑点相对比较集中，前后相邻成分难以分开，斑点不明显，为使斑点清晰可见，点样量稍微过大时，会出现严重的拖尾，而且阴性样品在这个区域会出现干扰，影响结果的判断，采用本展开剂系统展开时，效果较好，阴性样品无干扰。

3.2 黄芪的提取方法按“国家药品标准 WS3-161 (Z-151)-2001(Z)”香菊胶囊[2]项下关于黄芪甲苷的提取方法采用甲醇回流提取，水饱和的正丁醇萃取，用氨试液洗涤至中性，发现采用甲醇提取出的成分较多，展开时分不开，其次由于氨试液碱性较强，用正丁醇饱和的水一般要洗涤5次以上才能达到中性，造成黄芪甲苷的损失很大，本法采用水提，水饱和的正丁醇萃取，以 5%碳酸氢钠溶液洗涤的方法，洗涤2次即可达到中性，使黄芪甲苷的损失较小。

3.3 在鉴别虎杖时，参照《中国药典》2010版一部项下虎杖药材鉴别的展开剂系统进行展开，结果发现即使展距很大，Rf值也较小，在日光下观察，阴性无干扰，但在紫外光灯（365nm）下检视时，阴性出现明显的干扰，采用本展开剂系统展开时，效果较好，阴性样品无干扰。

3.4 红花提取时，直接用80%丙酮提取，方中其他组分干扰较大，通过水提，用石油醚萃取掉其中的脂溶性成分后，再用80%丙酮溶解，采用本展开剂系统展开时，效果较好，阴性样品无干扰，取得了满意的效果。

总之，采用薄层色谱（TCL）法对痛风胶囊中黄芪、虎杖、红花进行定性鉴别，其薄层色谱斑点清晰，稳定性好，阴性样品无干扰，且方法简便可行，可用于该产品的质量控制。

[1] 中华人民共和国国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京.中国医药科技出版社,2010:194,283.

[2] 中华人民共和国国家药品监督管理局.国家药品标准WS3-161(Z-151)-2001(Z) [S].北京,2010.

Studies on TLC Identications of Tongfeng Capsule

He Yu

Ob jectiveTo study the quality control method of Tongfeng capsule.MethodsAstragalus membraneceus(Fisch.)Bge.var,Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc And Carthamus tinctorius L can be distinguished respectively by TLC.Resu ltsTLC spot were fairly clear,and the blank test showed no interference.Conc lusionThe method was proved to be simple and feasble,and suitable for content determ ination of Tongfeng capsule.

Tongfeng capsu le;Astraga lus mem branaceus(Fisch.)Bge.var;Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc; Carthamus tinctorius L;TLC

R927

A

1673-5846(2014)05-0014-03

毕节市食品药品检验所，贵州毕节 551700

何羽，主管药师，主要从事药品检验和药物质量标准的研究。Tel：0857-8288509，E-mail：gzheyu@163.com。